Metoder för bevarande av fertilitet: Inverkan av vitrifikation på in vitro-mogna oocyter (OVOMIV)
Under de senaste decennierna har det skett en förbättring av cancerbehandlingarna för kvinnan och tonåringarna. Därför beskrivs högre överlevnad. Däremot kan cancerbehandlingar förändra reproduktionsfunktionerna och avsevärt minska fönstret för fertiliteten till vuxen ålder. Därför rekommenderas det att gå vidare till en fertilitetskonservering genom äggvitrifiering när det är möjligt. Förglasningen är en frysteknik som tillåter hög överlevnadsgrad och liknande resultat med assisterad reproduktionsteknologi jämfört med användningen av färska oocyter. En innovativ metod för automatiserad vitrifiering har nyligen utvecklats. Det vanliga protokollet består i att förglasa mogna oocyter. Denna strategi kan dock inte användas för hormonkänslig cancer eller när äggstocksstimulering inte är möjlig. I dessa situationer kan omogna oocyter samlas in. Det är också nödvändigt att realisera ett mognadssteg in vitro för användning med assisterad reproduktionsteknologi.
Enligt de senaste uppgifterna i litteraturen är det fortfarande oklart om förglasning av äggceller måste utföras före eller efter in vitro-mognad (IVM). Därför är syftet med denna studie att studera inverkan på struktur och funktioner hos äggceller när vitrifikation utförs före eller efter IVM. Förglasningen kommer att utföras med en halvautomatisk metod som är en innovativ metod.
Studieöversikt
Status
Betingelser
Intervention / Behandling
Detaljerad beskrivning
För att utföra denna studie kommer utredaren att jämföra tre grupper. Grupp 1: omogna äggocyter förglasade före IVM; Grupp 2: omogna oocyter förglasade efter IVM; Grupp 3: färska omogna oocyter behandlade med IVM (utan förglasning, kontrollgrupp).
De omogna oocyterna tillhandahålls från ICSI-patienter. Rutinmässigt förstörs dessa oocyter (groddblåsor) normalt eftersom de inte kan användas för injektion. Kvinnorna kommer att ge ett informerat och skriftligt samtycke. Inklusionskriterier är kvinnor under 37 år utan dysovulation.
Förglasningen kommer att utföras med den halvautomatiska metoden (Gavi, Merck). Den kinetiska och mognadshastigheten kommer att analyseras genom tidsförlopp (Primovision, Vitrolife) I de mogna oocyterna kommer aktin- och tubulincytoskelettet, spindelorganisationen och de kortikala granulerna att studeras med immunfluorescens och 3D-konfokalmikroskopi. Uttrycket av transkription av maternala faktorer kommer att analyseras med RT-PCR. Ploidin kommer att analyseras med multiFISH och/eller CGH-array.
Studietyp
Inskrivning (Förväntat)
Kontakter och platser
Studieorter
-
-
-
Clermont-Ferrand, Frankrike, 63003
- CHU clermont-ferrand
-
-
Deltagandekriterier
Urvalskriterier
Åldrar som är berättigade till studier
Tar emot friska volontärer
Kön som är behöriga för studier
Testmetod
Studera befolkning
Beskrivning
Inklusionskriterier:
- ICSI behandling
- Omogna oocyter
- Utan ägglossningspatologier
Exklusions kriterier:
- Polykistiskt ovariesyndrom
- Endometrios
- Ägglossningssjukdom
Studieplan
Hur är studien utformad?
Designdetaljer
Kohorter och interventioner
Grupp / Kohort |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Omogna oocyter förglasade före in vitro-mognad
Omogna oocyter kommer att förglasas med förglasning i slutet system med en halvautomatisk metod.
Efter uppvärmning kommer en mognadsodling att utföras under 36 timmar
|
Gavi, Merck ® tillåter halvautomatisk förglasning med slutet system.
Grupp 1: omogna äggocyter förglasade före IVM; Grupp 2: omogna oocyter förglasade efter IVM; Grupp 3: färska omogna oocyter behandlade med IVM (utan förglasning, kontrollgrupp).
|
|
Omogna oocyter förglasade efter in vitro-mognad
En mognadsodling av omogna oocyter kommer att utföras in vitro under 36 timmar.
Efter IVM kommer mogna oocyter att förglasas i slutet system med en halvautomatisk metod.
|
Gavi, Merck ® tillåter halvautomatisk förglasning med slutet system.
Grupp 1: omogna äggocyter förglasade före IVM; Grupp 2: omogna oocyter förglasade efter IVM; Grupp 3: färska omogna oocyter behandlade med IVM (utan förglasning, kontrollgrupp).
|
|
Färska oocyter
Odlingen av omogna oocyter kommer att utföras under 36 timmar
|
Vad mäter studien?
Primära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Den embryonala utvecklingskinetiken
Tidsram: 6 dagar efter ICSI och genom avslutad studie
|
från de register som erhållits med Time Lapse Primovision, kommer utredaren att kunna bestämma de exakta tidpunkterna för embryonal utveckling efter in vitro-mognad.
|
6 dagar efter ICSI och genom avslutad studie
|
Sekundära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Analys av aktin och tubulins cytoskelett och spindelorganisation i mogna äggocyter (metafas II)
Tidsram: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
Oocyter i Metafas II-stadiet kommer att användas för immunfluorescensexperiment för att färga aktin, tubulin och kromosomer.
Oocyter kommer att avbildas med konfokalmikroskop för att utföra högupplöst bildbehandling och kvantitativ bildanalys.
Längden, positionen och orienteringen av den andra meiotiska spindeln kommer att analyseras.
Aktinnätverket och kromosomerna kommer att analyseras kvantitativt.
Alla mätningar kommer att jämföras med färska mogna (Metaphase-II) oocyter som används som kontrollgrupp.
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
|
Analys av kromosomsegregation under den första meiotiska uppdelningen
Tidsram: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
En multifluorescens in situ-hybridisering och/eller en CGH-array kommer att utföras för att mäta kromosomsegregeringen efter förglasning
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
|
Analys av kortikala granulatfördelning i mogna (metafas II) oocyter.
Tidsram: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
En färgning med Lektin kommer att användas för att markera kortikala granuler av mogna oocyter för att observera om protokollet har en inverkan på deras rumsliga fördelning.
För att analysera denna färgning kommer utredaren att använda kvantitativ bildanalysmetod.
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
|
Analys av maternal faktorstabilitet.
Tidsram: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
Maternala faktorer som lagras i oocytcytoplasman under oogenes som proteiner och transkript är väsentliga för den tidiga embryonala utvecklingen.
Utredaren kommer att utföra omvänd transkription i kombination med realtids-PCR för att kvantifiera transkriptmängder av kandidatgener valda från humana oocytdatabaser.
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
Samarbetspartners och utredare
Studieavstämningsdatum
Studera stora datum
Studiestart (FÖRVÄNTAT)
Primärt slutförande (FÖRVÄNTAT)
Avslutad studie (FÖRVÄNTAT)
Studieregistreringsdatum
Först inskickad
Först inskickad som uppfyllde QC-kriterierna
Första postat (FAKTISK)
Uppdateringar av studier
Senaste uppdatering publicerad (FAKTISK)
Senaste inskickade uppdateringen som uppfyllde QC-kriterierna
Senast verifierad
Mer information
Termer relaterade till denna studie
Nyckelord
Andra studie-ID-nummer
- CHU-393
Läkemedels- och apparatinformation, studiedokument
Studerar en amerikansk FDA-reglerad läkemedelsprodukt
Studerar en amerikansk FDA-reglerad produktprodukt
Denna information hämtades direkt från webbplatsen clinicaltrials.gov utan några ändringar. Om du har några önskemål om att ändra, ta bort eller uppdatera dina studieuppgifter, vänligen kontakta register@clinicaltrials.gov. Så snart en ändring har implementerats på clinicaltrials.gov, kommer denna att uppdateras automatiskt även på vår webbplats .