Methoden voor het behoud van vruchtbaarheid: impact van vitrificatie op in vitro gerijpte eicellen (OVOMIV)
Tijdens de laatste decennia was er een verbetering van de kankerbehandelingen van de vrouw en de tieners. Daarom wordt een hoger overlevingspercentage beschreven. Kankerbehandelingen kunnen echter de voortplantingsfuncties veranderen en de periode van vruchtbaarheid tot volwassenheid aanzienlijk verkorten. Daarom wordt aanbevolen om, indien mogelijk, over te gaan tot behoud van de vruchtbaarheid door vitrificatie van eicellen. De vitrificatie is een bevriezingstechniek die een hoge overlevingskans en vergelijkbare resultaten mogelijk maakt door geassisteerde voortplantingstechnologieën in vergelijking met het gebruik van verse eicellen. Onlangs is een innovatieve methode van geautomatiseerde vitrificatie ontwikkeld. Het gebruikelijke protocol bestaat uit het vitrificeren van rijpe eicellen. Deze strategie kan echter niet worden gebruikt voor hormoongevoelige kanker of wanneer stimulatie van de eierstokken niet mogelijk is. In deze situaties kunnen onrijpe eicellen worden verzameld. Het is ook noodzakelijk om een in vitro rijpingsstap te realiseren voor gebruik door kunstmatige voortplantingstechnologie.
Volgens de recente gegevens van de literatuur blijft het onduidelijk of de vitrificatie van eicellen vóór of na in vitro rijping (IVM) moet worden uitgevoerd. Daarom is het doel van deze studie om de impact op de structuur en functies van ovocyten te bestuderen wanneer vitrificatie wordt uitgevoerd voor of na IVM. De vitrificatie zal worden uitgevoerd door middel van een semi-automatische methode die een innovatieve methode is.
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Om dit onderzoek uit te voeren, zal de onderzoeker drie groepen vergelijken. Groep 1: onrijpe eicellen verglaasd vóór IVM; Groep 2: onrijpe eicellen verglaasd na IVM; Groep 3: verse onrijpe eicellen behandeld met IVM (zonder vitrificatie, controlegroep).
De onrijpe eicellen die afkomstig zijn van ICSI-patiënten. Normaal gesproken worden deze oöcyten (kiemblaasjes) vernietigd omdat ze niet voor injectie kunnen worden gebruikt. De vrouwen zullen een geïnformeerde en schriftelijke toestemming geven. Inclusiecriteria zijn vrouwen jonger dan 37 jaar zonder dysovulatie.
De vitrificatie zal worden uitgevoerd met de semi-automatische methode (Gavi, Merck). De kinetische en rijpingssnelheid zullen geanalyseerd worden door tijdsverloop (Primovision, Vitrolife). In de rijpe oöcyten zullen het actine en tubuline cytoskelet, de spilorganisatie en de corticale korrels bestudeerd worden door middel van immunofluorescentie en 3D confocale microscopie. De expressie van transcriptie van maternale factoren zal worden geanalyseerd door middel van RT-PCR. De ploïdie zal worden geanalyseerd door multiFISH en/of CGH array.
Studietype
Inschrijving (Verwacht)
Contacten en locaties
Studie Locaties
-
-
-
Clermont-Ferrand, Frankrijk, 63003
- CHU clermont-ferrand
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Geslachten die in aanmerking komen voor studie
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- ICSI-behandeling
- Onrijpe eicellen
- Zonder ovulatiepathologieën
Uitsluitingscriteria:
- Polykistisch ovariumsyndroom
- Endometriose
- Ovulatoire ziekte
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Onrijpe eicellen verglaasd vóór in vitro rijping
Onrijpe oöcyten zullen worden verglaasd met behulp van vitrificatie in een gesloten systeem met een halfautomatische methode.
Na opwarming wordt gedurende 36 uur een rijpingscultuur uitgevoerd
|
Gavi, Merck ® maakt semi-automatische vitrificatie met gesloten systeem mogelijk.
Groep 1: onrijpe eicellen verglaasd vóór IVM; Groep 2: onrijpe eicellen verglaasd na IVM; Groep 3: verse onrijpe eicellen behandeld met IVM (zonder vitrificatie, controlegroep).
|
|
Onrijpe eicellen verglaasd na in vitro rijping
Een rijpingscultuur van onrijpe eicellen zal gedurende 36 uur in vitro worden uitgevoerd.
Na IVM worden rijpe eicellen halfautomatisch in een gesloten systeem verglaasd.
|
Gavi, Merck ® maakt semi-automatische vitrificatie met gesloten systeem mogelijk.
Groep 1: onrijpe eicellen verglaasd vóór IVM; Groep 2: onrijpe eicellen verglaasd na IVM; Groep 3: verse onrijpe eicellen behandeld met IVM (zonder vitrificatie, controlegroep).
|
|
Verse eicellen
De kweek van onrijpe eicellen wordt gedurende 36 uur uitgevoerd
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
De kinetiek van de embryonale ontwikkeling
Tijdsspanne: 6 dagen na ICSI en tot en met afronding van de studie
|
uit de gegevens verkregen met Time Lapse Primovision, zal de onderzoeker in staat zijn om de precieze tijden van embryonale ontwikkeling na in vitro rijping te bepalen.
|
6 dagen na ICSI en tot en met afronding van de studie
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Analyse van actine en tubuline cytoskelet en spilorganisatie in volwassen eicellen (Metafase II)
Tijdsspanne: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
Eicellen in het metafase-II-stadium zullen worden gebruikt voor immunofluorescentie-experimenten om actine, tubuline en chromosomen te kleuren.
Oöcyten zullen worden afgebeeld met behulp van een confocale microscoop om beeldvorming met hoge resolutie en kwantitatieve beeldanalyse uit te voeren.
De lengte, positie en oriëntatie van de tweede meiotische spil zullen worden geanalyseerd.
Het actinenetwerk en de chromosomen zullen kwantitatief geanalyseerd worden.
Alle metingen worden vergeleken met vers gerijpte (Metafase-II) oöcyten die als controlegroep worden gebruikt.
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
|
Analyse van chromosoomscheiding tijdens de eerste meiotische deling
Tijdsspanne: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
Een multi-fluorescentie in situ hybridisatie en/of een CGH-array zal worden uitgevoerd om de chromosoomsegregatie na vitrificatie te meten
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
|
Analyse van de verdeling van corticale korrels in volwassen (Metafase II) oöcyten.
Tijdsspanne: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
Een kleuring met lectine zal worden gebruikt om corticale korrels van gerijpte oöcyten te markeren om te observeren of het protocol een impact heeft op hun ruimtelijke verdeling.
Om deze kleuring te analyseren, zal de onderzoeker de kwantitatieve beeldanalysemethode gebruiken.
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
|
Analyse van maternale factorstabiliteiten.
Tijdsspanne: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
Maternale factoren opgeslagen in het oöcytcytoplasma tijdens oögenese als eiwitten en transcripten zijn essentieel voor de vroege embryonale ontwikkeling.
De onderzoeker zal omgekeerde transcriptie uitvoeren in combinatie met real-time PCR om transcripthoeveelheden van kandidaat-genen te kwantificeren die zijn geselecteerd uit databases van menselijke eicellen.
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
Medewerkers en onderzoekers
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (VERWACHT)
Primaire voltooiing (VERWACHT)
Studie voltooiing (VERWACHT)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (WERKELIJK)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (WERKELIJK)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Trefwoorden
Andere studie-ID-nummers
- CHU-393
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .