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Méthodes de préservation de la fertilité : impact de la vitrification sur les ovocytes mûris in vitro (OVOMIV)

20 septembre 2018 mis à jour par: University Hospital, Clermont-Ferrand

Au cours des dernières décennies, il y a eu une amélioration des traitements du cancer de la femme et des adolescents. Par conséquent, un taux de survie plus élevé est décrit. Cependant, les traitements anticancéreux peuvent altérer les fonctions de reproduction et réduire considérablement la fenêtre de la fertilité à l'âge adulte. Il est donc recommandé de procéder à une préservation de la fertilité par vitrification des ovocytes lorsque cela est possible. La vitrification est une technique de congélation permettant un taux de survie élevé et des résultats similaires par les technologies de procréation assistée par rapport à l'utilisation d'ovocytes frais. Une méthode innovante de vitrification automatisée a été récemment développée. Le protocole habituel consiste à vitrifier les ovocytes matures. Cependant, cette stratégie ne peut pas être utilisée pour les cancers hormonosensibles ou lorsque la stimulation ovarienne n'est pas possible. Dans ces situations, des ovocytes immatures peuvent être prélevés. Il est également nécessaire de réaliser une étape de maturation in vitro pour une utilisation par PMA.

D'après les données récentes de la littérature, il reste à déterminer si la vitrification des ovocytes doit être réalisée avant ou après la maturation in vitro (IVM). L'objectif de cette étude est donc d'étudier l'impact sur la structure et les fonctions des ovocytes lorsque la vitrification est réalisée avant ou après l'IVM. La vitrification sera réalisée par une méthode semi-automatique qui est une méthode innovante.

Aperçu de l'étude

Description détaillée

Pour réaliser cette étude, l'enquêteur comparera trois groupes. Groupe 1 : ovocytes immatures vitrifiés avant IVM ; Groupe 2 : ovocytes immatures vitrifiés après IVM ; Groupe 3 : ovocytes frais immatures traités par IVM (sans vitrification, groupe contrôle).

Les ovocytes immatures proviennent de patients ICSI. En routine, ces ovocytes (vésicule germinale) sont normalement détruits car ils ne peuvent pas être utilisés pour l'injection. Les femmes donneront un consentement éclairé et écrit. Les critères d'inclusion sont les femmes de moins de 37 ans sans dysovulation.

La vitrification sera réalisée avec la méthode semi-automatique (Gavi, Merck). La cinétique et la vitesse de maturation seront analysées par time lapse (Primovision, Vitrolife) Dans les ovocytes matures, le cytosquelette d'actine et de tubuline, l'organisation du fuseau et les granules corticaux seront étudiés par immunofluorescence et microscopie confocale 3D. L'expression des facteurs maternels de transcription sera analysée par RT-PCR. La ploïdie sera analysée par multiFISH et/ou CGH array.

Type d'étude

Observationnel

Inscription (Anticipé)

240

Contacts et emplacements

Cette section fournit les coordonnées de ceux qui mènent l'étude et des informations sur le lieu où cette étude est menée.

Lieux d'étude

      • Clermont-Ferrand, France, 63003
        • CHU Clermont-Ferrand

Critères de participation

Les chercheurs recherchent des personnes qui correspondent à une certaine description, appelée critères d'éligibilité. Certains exemples de ces critères sont l'état de santé général d'une personne ou des traitements antérieurs.

Critère d'éligibilité

Âges éligibles pour étudier

18 ans à 37 ans (ADULTE)

Accepte les volontaires sains

Non

Sexes éligibles pour l'étude

Femelle

Méthode d'échantillonnage

Échantillon non probabiliste

Population étudiée

femmes

La description

Critère d'intégration:

  • Traitement ICSI
  • Ovocytes immatures
  • Sans pathologies de l'ovulation

Critère d'exclusion:

  • Syndrome des ovaires polykystiques
  • Endométriose
  • Maladie ovulatoire

Plan d'étude

Cette section fournit des détails sur le plan d'étude, y compris la façon dont l'étude est conçue et ce que l'étude mesure.

Comment l'étude est-elle conçue ?

Détails de conception

Cohortes et interventions

Groupe / Cohorte
Intervention / Traitement
Ovocytes immatures vitrifiés avant maturation in vitro
Les ovocytes immatures seront vitrifiés en utilisant une vitrification en système fermé avec une méthode semi-automatique. Après réchauffement, une culture de maturation sera réalisée pendant 36 heures
Gavi, Merck ® permet une vitrification semi-automatisée en système fermé.
Groupe 1 : ovocytes immatures vitrifiés avant IVM ; Groupe 2 : ovocytes immatures vitrifiés après IVM ; Groupe 3 : ovocytes frais immatures traités par IVM (sans vitrification, groupe contrôle).
Ovocytes immatures vitrifiés après maturation in vitro
Une culture de maturation des ovocytes immatures sera réalisée in vitro pendant 36 heures. Après IVM, les ovocytes matures seront vitrifiés en système fermé par une méthode semi-automatique.
Gavi, Merck ® permet une vitrification semi-automatisée en système fermé.
Groupe 1 : ovocytes immatures vitrifiés avant IVM ; Groupe 2 : ovocytes immatures vitrifiés après IVM ; Groupe 3 : ovocytes frais immatures traités par IVM (sans vitrification, groupe contrôle).
Ovocytes frais
La culture des ovocytes immatures sera réalisée pendant 36 heures

Que mesure l'étude ?

Principaux critères de jugement

Mesure des résultats
Description de la mesure
Délai
La cinétique du développement embryonnaire
Délai: 6 jours après l'ICSI et jusqu'à la fin de l'étude
à partir des enregistrements obtenus avec Time Lapse Primovision, l'investigateur pourra déterminer les temps précis de développement embryonnaire après maturation in vitro.
6 jours après l'ICSI et jusqu'à la fin de l'étude

Mesures de résultats secondaires

Mesure des résultats
Description de la mesure
Délai
Analyse du cytosquelette d'actine et de tubuline et de l'organisation du fuseau dans les ovocytes matures (Métaphase II)
Délai: 01/01/2019 - 31/12/2019
Les ovocytes au stade métaphase II seront utilisés pour des expériences d'immuno-fluorescence afin de colorer l'actine, la tubuline et les chromosomes. Les ovocytes seront imagés à l'aide d'un microscope confocal pour effectuer une imagerie haute résolution et une analyse d'image quantitative. La longueur, la position et l'orientation du deuxième fuseau méiotique seront analysées. Le réseau d'actine et les chromosomes seront analysés quantitativement. Toutes les mesures seront comparées avec des ovocytes frais mûris (métaphase-II) utilisés comme groupe témoin.
01/01/2019 - 31/12/2019
Analyse de la ségrégation chromosomique lors de la première division méiotique
Délai: 01/01/2019 - 31/12/2019
Une hybridation multi fluorescence in situ et/ou une matrice CGH seront réalisées pour mesurer la ségrégation chromosomique après vitrification
01/01/2019 - 31/12/2019
Analyse de la distribution des granules corticaux dans les ovocytes matures (métaphase II).
Délai: 01/01/2019 - 31/12/2019
Une coloration à la lectine sera utilisée pour marquer les granules corticaux des ovocytes matures afin d'observer si le protocole a un impact sur leur distribution spatiale. Pour analyser cette coloration, l'enquêteur utilisera une méthode d'analyse d'image quantitative.
01/01/2019 - 31/12/2019
Analyse des stabilités des facteurs maternels.
Délai: 01/01/2019 - 31/12/2019
Les facteurs maternels stockés dans le cytoplasme de l'ovocyte pendant l'ovogenèse sous forme de protéines et de transcrits sont essentiels au développement embryonnaire précoce. L'investigateur effectuera une transcription inverse combinée à une PCR en temps réel pour quantifier les quantités de transcrits de gènes candidats sélectionnés à partir de bases de données d'ovocytes humains.
01/01/2019 - 31/12/2019

Collaborateurs et enquêteurs

C'est ici que vous trouverez les personnes et les organisations impliquées dans cette étude.

Dates d'enregistrement des études

Ces dates suivent la progression des dossiers d'étude et des soumissions de résultats sommaires à ClinicalTrials.gov. Les dossiers d'étude et les résultats rapportés sont examinés par la Bibliothèque nationale de médecine (NLM) pour s'assurer qu'ils répondent à des normes de contrôle de qualité spécifiques avant d'être publiés sur le site Web public.

Dates principales de l'étude

Début de l'étude (ANTICIPÉ)

20 septembre 2018

Achèvement primaire (ANTICIPÉ)

31 décembre 2019

Achèvement de l'étude (ANTICIPÉ)

31 juillet 2020

Dates d'inscription aux études

Première soumission

5 juin 2018

Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité

20 septembre 2018

Première publication (RÉEL)

21 septembre 2018

Mises à jour des dossiers d'étude

Dernière mise à jour publiée (RÉEL)

21 septembre 2018

Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité

20 septembre 2018

Dernière vérification

1 septembre 2018

Plus d'information

Termes liés à cette étude

Informations sur les médicaments et les dispositifs, documents d'étude

Étudie un produit pharmaceutique réglementé par la FDA américaine

Non

Étudie un produit d'appareil réglementé par la FDA américaine

Non

Ces informations ont été extraites directement du site Web clinicaltrials.gov sans aucune modification. Si vous avez des demandes de modification, de suppression ou de mise à jour des détails de votre étude, veuillez contacter register@clinicaltrials.gov. Dès qu'un changement est mis en œuvre sur clinicaltrials.gov, il sera également mis à jour automatiquement sur notre site Web .

Essais cliniques sur Gavi , Merck® (instrument de vitrification automatisé)

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