- ICH GCP
- Реестр клинических исследований США
- Клиническое испытание NCT03680937
Методы сохранения фертильности: влияние витрификации на созревшие in vitro ооциты (OVOMIV)
В течение последних десятилетий произошло улучшение методов лечения рака у женщин и подростков. Поэтому описывается более высокая выживаемость. Тем не менее, лечение рака может изменить репродуктивные функции и значительно сократить окно фертильности во взрослом возрасте. Поэтому рекомендуется при возможности приступить к сохранению фертильности путем витрификации ооцитов. Витрификация представляет собой метод замораживания, обеспечивающий высокую выживаемость и аналогичные результаты вспомогательных репродуктивных технологий по сравнению с использованием свежих ооцитов. Недавно был разработан инновационный метод автоматизированной витрификации. Обычный протокол состоит в витрификации зрелых ооцитов. Однако эту стратегию нельзя использовать при гормоночувствительном раке или когда стимуляция яичников невозможна. В этих ситуациях можно собирать незрелые ооциты. Также необходимо реализовать этап созревания in vitro для использования вспомогательных репродуктивных технологий.
По последним данным литературы остается неясным, следует ли проводить витрификацию овоцитов до или после созревания in vitro (IVM). Поэтому целью данного исследования является изучение влияния на структуру и функции овоцитов при проведении витрификации до или после ИВМ. Витрификация будет проводиться полуавтоматическим методом, который является инновационным методом.
Обзор исследования
Статус
Условия
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Чтобы выполнить это исследование, исследователь сравнит три группы. Группа 1: незрелые овоциты, витрифицированные перед ИВМ; группа 2: незрелые ооциты, витрифицированные после ИВМ; Группа 3: свежие незрелые ооциты, обработанные IVM (без витрификации, контрольная группа).
Незрелые ооциты получают от пациенток с ИКСИ. Обычно эти ооциты (зародышевые везикулы) разрушаются, потому что их нельзя использовать для инъекций. Женщины дадут информированное и письменное согласие. Критерии включения: женщины моложе 37 лет без дизовуляции.
Витрификация будет проводиться полуавтоматическим методом (Gavi, Merck). Кинетика и скорость созревания будут проанализированы по промежутку времени (Primovision, Vitrolife). В зрелых ооцитах актиновый и тубулиновый цитоскелет, организация веретена и кортикальные гранулы будут изучены с помощью иммунофлуоресценции и 3D-конфокальной микроскопии. Экспрессия материнских факторов транскрипции будет проанализирована с помощью ОТ-ПЦР. Плоидность будет проанализирована с помощью массива multiFISH и/или CGH.
Тип исследования
Регистрация (Ожидаемый)
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
-
Clermont-Ferrand, Франция, 63003
- CHU clermont-ferrand
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- ИКСИ лечение
- Незрелые ооциты
- Без патологий овуляции
Критерий исключения:
- Синдром поликистоза яичников
- Эндометриоз
- Овуляторная болезнь
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Витрификация незрелых ооцитов перед созреванием in vitro
Незрелые ооциты будут витрифицированы с использованием закрытой системы витрификации полуавтоматическим методом.
После прогревания культура созревания будет проводиться в течение 36 часов.
|
Gavi, Merck ® разрешает полуавтоматическую витрификацию с закрытой системой.
Группа 1: незрелые овоциты, витрифицированные перед ИВМ; группа 2: незрелые ооциты, витрифицированные после ИВМ; Группа 3: свежие незрелые ооциты, обработанные IVM (без витрификации, контрольная группа).
|
|
Незрелые ооциты, витрифицированные после созревания in vitro
Культура созревания незрелых ооцитов будет проводиться in vitro в течение 36 часов.
После IVM зрелые ооциты будут витрифицировать в закрытой системе полуавтоматическим методом.
|
Gavi, Merck ® разрешает полуавтоматическую витрификацию с закрытой системой.
Группа 1: незрелые овоциты, витрифицированные перед ИВМ; группа 2: незрелые ооциты, витрифицированные после ИВМ; Группа 3: свежие незрелые ооциты, обработанные IVM (без витрификации, контрольная группа).
|
|
Свежие ооциты
Посев незрелых ооцитов будет проводиться в течение 36 часов.
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Кинетика эмбрионального развития
Временное ограничение: Через 6 дней после ИКСИ и по завершении исследования
|
по записям, полученным с помощью Time Lapse Primovision, исследователь сможет определить точное время эмбрионального развития после созревания in vitro.
|
Через 6 дней после ИКСИ и по завершении исследования
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Анализ актинового и тубулинового цитоскелета и организации веретена в зрелых овоцитах (метафаза II)
Временное ограничение: 01.01.2019 - 31.12.2019
|
Ооциты стадии метафазы-II будут использоваться в экспериментах по иммунофлуоресценции для окрашивания актина, тубулина и хромосом.
Ооциты будут визуализированы с использованием конфокальной микроскопии для выполнения визуализации с высоким разрешением и количественного анализа изображений.
Будут проанализированы длина, положение и ориентация второго мейотического веретена.
Актиновая сеть и хромосомы будут проанализированы количественно.
Все измерения будут сравниваться со свежесозревшими (метафаза-II) ооцитами, используемыми в качестве контрольной группы.
|
01.01.2019 - 31.12.2019
|
|
Анализ расхождения хромосом во время первого деления мейоза
Временное ограничение: 01.01.2019 - 31.12.2019
|
Для измерения сегрегации хромосом после витрификации будет проведена множественная флуоресцентная гибридизация in situ и/или массив CGH.
|
01.01.2019 - 31.12.2019
|
|
Анализ распределения кортикальных гранул в зрелых (метафаза II) ооцитах.
Временное ограничение: 01.01.2019 - 31.12.2019
|
Окрашивание лектином будет использоваться для маркировки кортикальных гранул созревших ооцитов, чтобы наблюдать, влияет ли протокол на их пространственное распределение.
Чтобы проанализировать это окрашивание, исследователь будет использовать метод количественного анализа изображения.
|
01.01.2019 - 31.12.2019
|
|
Анализ стабильности материнского фактора.
Временное ограничение: 01.01.2019 - 31.12.2019
|
Материнские факторы, хранящиеся в цитоплазме ооцита во время оогенеза в виде белков и транскриптов, необходимы для раннего эмбрионального развития.
Исследователь выполнит обратную транскрипцию в сочетании с ПЦР в реальном времени для количественного определения количества транскриптов генов-кандидатов, выбранных из баз данных ооцитов человека.
|
01.01.2019 - 31.12.2019
|
Соавторы и исследователи
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (ОЖИДАЕТСЯ)
Первичное завершение (ОЖИДАЕТСЯ)
Завершение исследования (ОЖИДАЕТСЯ)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Другие идентификационные номера исследования
- CHU-393
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .