생식력 보존을 위한 방법: 체외 성숙 난모세포에 대한 유리화의 영향 (OVOMIV)
지난 수십 년 동안 여성과 청소년의 암 치료법이 개선되었습니다. 따라서 더 높은 생존율이 설명됩니다. 그러나 암 치료는 생식 기능을 변경하고 성년까지 생식력의 창을 상당히 줄일 수 있습니다. 따라서 가능하면 난자 유리화에 의한 생식력 보존을 진행하는 것이 좋습니다. 유리화는 신선한 난자를 사용하는 것과 비교하여 보조 생식 기술에 의해 높은 생존율과 유사한 결과를 얻을 수 있는 동결 기술입니다. 자동화된 유리화의 혁신적인 방법이 최근에 개발되었습니다. 일반적인 프로토콜은 성숙한 난모세포를 유리화하는 것으로 구성됩니다. 그러나 이 전략은 호르몬에 민감한 암이나 난소 자극이 불가능한 경우에는 사용할 수 없습니다. 이러한 상황에서 미성숙 난모세포를 채취할 수 있습니다. 또한 생식 보조 기술에 의한 사용을 위한 체외 성숙 단계를 구현하는 것이 필요합니다.
문헌의 최근 데이터에 따르면 난모세포의 유리화가 체외 성숙(IVM) 이전 또는 이후에 수행되어야 하는지 여부가 불분명합니다. 따라서 본 연구의 목적은 IVM 전후에 유리화를 시행할 때 난자의 구조와 기능에 미치는 영향을 연구하는 것이다. 유리화는 혁신적인 방식인 반자동 방식으로 진행됩니다.
연구 개요
상세 설명
이 연구를 수행하기 위해 연구자는 세 그룹을 비교합니다. 그룹 1: IVM 전에 유리화된 미성숙 난모세포; 그룹 2: IVM 후 유리화된 미성숙 난모세포; 그룹 3: IVM으로 처리된 신선한 미성숙 난모세포(유리화 없음, 대조군).
미성숙 난모세포는 ICSI 환자에게서 제공됩니다. 일반적으로 이러한 난모세포(배낭)는 주사에 사용할 수 없기 때문에 일반적으로 파괴됩니다. 여성은 정보에 입각한 서면 동의를 제공합니다. 포함 기준은 배란 장애가 없는 37세 미만의 여성입니다.
유리화는 반자동 방법(Gavi, Merck)으로 수행됩니다. 동역학 및 성숙율은 시간 경과(Primovision, Vitrolife)에 의해 분석될 것이다. 성숙한 난모세포에서, 액틴 및 튜불린 세포골격, 스핀들 조직 및 피질 과립은 면역형광 및 3D 공초점 현미경으로 연구될 것이다. 모계 인자 전사의 발현을 RT-PCR로 분석한다. 계략은 multiFISH 및/또는 CGH 어레이로 분석됩니다.
연구 유형
등록 (예상)
연락처 및 위치
연구 장소
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Clermont-Ferrand, 프랑스, 63003
- CHU clermont-ferrand
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참여기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
연구 대상 성별
샘플링 방법
연구 인구
설명
포함 기준:
- ICSI 치료
- 미성숙 난모세포
- 배란 병리없이
제외 기준:
- 다키성 난소 증후군
- 자궁내막증
- 배란병
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
코호트 및 개입
그룹/코호트 |
개입 / 치료 |
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체외 성숙 전에 유리화된 미성숙 난모세포
미성숙 난모세포는 반자동 방법으로 폐쇄 시스템 유리화를 사용하여 유리화됩니다.
가온 후 36시간 동안 숙성 배양을 진행합니다.
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Gavi, Merck ®는 폐쇄형 시스템으로 반자동 유리화를 허용합니다.
그룹 1: IVM 전에 유리화된 미성숙 난모세포; 그룹 2: IVM 후 유리화된 미성숙 난모세포; 그룹 3: IVM으로 처리된 신선한 미성숙 난모세포(유리화 없음, 대조군).
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체외 성숙 후 유리화된 미성숙 난모세포
미성숙 난자의 성숙 배양은 36시간 동안 시험관 내에서 수행된다.
IVM 후 성숙한 난모세포는 반자동 방법으로 폐쇄 시스템에서 유리화됩니다.
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Gavi, Merck ®는 폐쇄형 시스템으로 반자동 유리화를 허용합니다.
그룹 1: IVM 전에 유리화된 미성숙 난모세포; 그룹 2: IVM 후 유리화된 미성숙 난모세포; 그룹 3: IVM으로 처리된 신선한 미성숙 난모세포(유리화 없음, 대조군).
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신선한 난자
미성숙 난자의 배양은 36시간 동안 진행됩니다.
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연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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배아 발생 동역학
기간: ICSI 6일 후부터 연구 완료까지
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Time Lapse Primovision으로 얻은 기록에서 연구자는 체외 성숙 후 배아 발달의 정확한 시간을 결정할 수 있습니다.
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ICSI 6일 후부터 연구 완료까지
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2차 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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성숙한 난모세포에서 액틴 및 튜불린 세포골격 및 방추 조직 분석(중기 II)
기간: 2019년 1월 1일 - 2019년 12월 31일
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중기-II 단계 난모세포는 액틴, 튜불린 및 염색체를 염색하기 위한 면역-형광 실험에 사용될 것입니다.
난모세포는 고해상도 이미징 및 정량적 이미지 분석을 수행하기 위해 공초점 현미경을 사용하여 이미지화됩니다.
두 번째 감수분열 방추의 길이, 위치 및 방향이 분석됩니다.
액틴 네트워크와 염색체를 정량적으로 분석합니다.
모든 측정값은 대조군으로 사용되는 신선한 성숙(Metaphase-II) 난모세포와 비교됩니다.
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2019년 1월 1일 - 2019년 12월 31일
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제1감수분열 동안의 염색체 분리 분석
기간: 2019년 1월 1일 - 2019년 12월 31일
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Multi Fluorescence in Situ Hybridization 및/또는 CGH 어레이는 유리화 후 염색체 분리를 측정하기 위해 수행됩니다.
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2019년 1월 1일 - 2019년 12월 31일
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성숙한 (Metaphase II) 난 모세포의 피질 과립 분포 분석.
기간: 2019년 1월 1일 - 2019년 12월 31일
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프로토콜이 공간 분포에 영향을 미치는지 여부를 관찰하기 위해 성숙한 난모세포의 피질 과립을 표시하는 데 Lectin을 사용한 염색이 사용됩니다.
이 염색을 분석하기 위해 조사자는 정량적 이미지 분석 방법을 사용합니다.
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2019년 1월 1일 - 2019년 12월 31일
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모성 요인 안정성 분석.
기간: 2019년 1월 1일 - 2019년 12월 31일
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단백질 및 전사물로서 난자 형성 동안 난자 세포질에 저장된 모성 인자는 초기 배아 발달에 필수적입니다.
조사자는 인간 난모세포 데이터베이스에서 선택된 후보 유전자의 전사량을 정량화하기 위해 실시간 PCR과 결합된 역전사를 수행할 것입니다.
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2019년 1월 1일 - 2019년 12월 31일
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공동 작업자 및 조사자
연구 기록 날짜
연구 주요 날짜
연구 시작 (예상)
기본 완료 (예상)
연구 완료 (예상)
연구 등록 날짜
최초 제출
QC 기준을 충족하는 최초 제출
처음 게시됨 (실제)
연구 기록 업데이트
마지막 업데이트 게시됨 (실제)
QC 기준을 충족하는 마지막 업데이트 제출
마지막으로 확인됨
추가 정보
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