Metoder til fertilitetsbevarelse: Virkning af forglasning på in vitro modne oocytter (OVOMIV)
I løbet af de sidste årtier er der sket en forbedring af kvindens og teenagernes kræftbehandlinger. Derfor beskrives højere overlevelsesrate. Kræftbehandlinger kan dog ændre reproduktionsfunktionerne og reducere frugtbarhedens vindue til voksenlivet betydeligt. Derfor anbefales det at gå videre til en fertilitetsbevarelse ved forglasning af oocytter, når det er muligt. Forglasningen er en fryseteknik, der tillader høj overlevelsesrate og lignende resultater ved hjælp af assisterede reproduktionsteknologier sammenlignet med brugen af friske oocytter. En innovativ metode til automatiseret forglasning blev for nylig udviklet. Den sædvanlige protokol består i at forglasning modne oocytter. Denne strategi kan dog ikke bruges til hormonfølsom cancer, eller når ovariestimulering ikke er mulig. I disse situationer kan umodne oocytter opsamles. Det er også nødvendigt at realisere et in vitro modningstrin til brug ved assisteret reproduktionsteknologi.
Ifølge de seneste data fra litteraturen er det stadig uklart, om forglasningen af ægceller skal udføres før eller efter in vitro-modning (IVM). Derfor er formålet med denne undersøgelse at studere indvirkningen på struktur og funktioner af ægceller, når forglasning udføres før eller efter IVM. Forglasningen vil blive udført ved en semi-automatisk metode, som er en innovativ metode.
Studieoversigt
Status
Betingelser
Intervention / Behandling
Detaljeret beskrivelse
For at udføre denne undersøgelse vil investigator sammenligne tre grupper. Gruppe 1: umodne ovocytter forglasset før IVM; Gruppe 2: umodne oocytter forglasset efter IVM; Gruppe3: friske umodne oocytter behandlet med IVM (uden forglasning, kontrolgruppe).
De umodne oocytter kommer fra ICSI-patienter. I rutinen ødelægges disse oocytter (kimvesikler) normalt, fordi de ikke kan bruges til injektion. Kvinderne vil give et informeret og skriftligt samtykke. Inklusionskriterier er kvinder under 37 år uden dysovulation.
Forglasningen vil blive udført med den semi-automatiske metode (Gavi, Merck). Den kinetiske og modningshastighed vil blive analyseret ved time-lapse (Primovision, Vitrolife) I de modne oocytter vil actin- og tubulincytoskelettet, spindelorganisationen og de kortikale granula blive undersøgt ved immunfluorescens og 3D konfokal mikroskopi. Ekspressionen af transkription af maternelle faktorer vil blive analyseret ved RT-PCR. Ploidien vil blive analyseret af multiFISH og/eller CGH-array.
Undersøgelsestype
Tilmelding (Forventet)
Kontakter og lokationer
Studiesteder
-
-
-
Clermont-Ferrand, Frankrig, 63003
- Chu Clermont-Ferrand
-
-
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Køn, der er berettiget til at studere
Prøveudtagningsmetode
Studiebefolkning
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
- ICSI behandling
- Umodne oocytter
- Uden ægløsningspatologier
Ekskluderingskriterier:
- Polykistisk ovariesyndrom
- Endometriose
- Ægløsningssygdom
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
Kohorter og interventioner
Gruppe / kohorte |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Umodne oocytter forglasset før in vitro modning
Umodne oocytter vil blive forglasset ved hjælp af lukket system forglasning med en semiautomatisk metode.
Efter opvarmning udføres en modningskultur i løbet af 36 timer
|
Gavi, Merck ® tillader semi-automatisk forglasning med lukket system.
Gruppe 1: umodne ovocytter forglasset før IVM; Gruppe 2: umodne oocytter forglasset efter IVM; Gruppe3: friske umodne oocytter behandlet med IVM (uden forglasning, kontrolgruppe).
|
|
Umodne oocytter forglasset efter in vitro-modning
En modningskultur af umodne oocytter vil blive udført in vitro i løbet af 36 timer.
Efter IVM vil modne oocytter forglasses i lukket system ved en semi-automatisk metode.
|
Gavi, Merck ® tillader semi-automatisk forglasning med lukket system.
Gruppe 1: umodne ovocytter forglasset før IVM; Gruppe 2: umodne oocytter forglasset efter IVM; Gruppe3: friske umodne oocytter behandlet med IVM (uden forglasning, kontrolgruppe).
|
|
Friske oocytter
Dyrkningen af umodne oocytter vil blive udført i løbet af 36 timer
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Den embryonale udviklingskinetik
Tidsramme: 6 dage efter ICSI og gennem studieafslutning
|
ud fra de optegnelser, der er opnået med Time Lapse Primovision, vil efterforskeren være i stand til at bestemme de præcise tidspunkter for embryonal udvikling efter in vitro-modning.
|
6 dage efter ICSI og gennem studieafslutning
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Analyse af actin og tubulin cytoskelet og spindelorganisation i modne ægceller (Metafase II)
Tidsramme: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
Metafase-II stadium oocytter vil blive brugt til immunfluorescens eksperimenter til at farve actin, tubulin og kromosomer.
Oocytter vil blive afbildet ved hjælp af konfokalt mikroskop for at udføre høj opløsning billeddannelse og kvantitativ billedanalyse.
Længden, positionen og orienteringen af den anden meiotiske spindel vil blive analyseret.
Aktin-netværket og kromosomerne vil blive analyseret kvantitativt.
Alle målinger vil blive sammenlignet med friskmodnede (Metafase-II) oocytter brugt som kontrolgruppe.
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
|
Analyse af kromosomsegregation under den første meiotiske deling
Tidsramme: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
En multifluorescens in situ-hybridisering og/eller et CGH-array vil blive udført for at måle kromosomadskillelsen efter forglasning
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
|
Analyse af kortikale granulatfordeling i modne (metafase II) oocytter.
Tidsramme: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
En farvning med Lectin vil blive brugt til at markere kortikale granulat af modne oocytter for at observere, om protokollen har indflydelse på deres rumlige fordeling.
For at analysere denne farvning vil efterforskeren bruge kvantitativ billedanalysemetode.
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
|
Analyse af maternal faktor stabiliteter.
Tidsramme: 01/01/2019 - 31/12/2019
|
Maternelle faktorer lagret i oocytcytoplasmaet under oogenese som proteiner og transkripter er afgørende for den tidlige embryonale udvikling.
Investigator vil udføre omvendt transkription kombineret med realtids-PCR for at kvantificere transkriptionsmængder af kandidatgener udvalgt fra humane oocytdatabaser.
|
01/01/2019 - 31/12/2019
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart (FORVENTET)
Primær færdiggørelse (FORVENTET)
Studieafslutning (FORVENTET)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (FAKTISKE)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (FAKTISKE)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Nøgleord
Andre undersøgelses-id-numre
- CHU-393
Lægemiddel- og udstyrsoplysninger, undersøgelsesdokumenter
Studerer et amerikansk FDA-reguleret lægemiddelprodukt
Studerer et amerikansk FDA-reguleret enhedsprodukt
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .
Kliniske forsøg med Gavi, Merck® (automatiseret forglasningsinstrument)
-
University Hospital, Clermont-FerrandRekrutteringFertilitet | Assisteret reproduktionsteknologi | Forglasning | ÆgdonorFrankrig