Métodos de Preservação da Fertilidade: Impacto da Vitrificação em Oócitos Maturados In Vitro (OVOMIV)
Durante as últimas décadas, houve um aprimoramento dos tratamentos de câncer da mulher e dos adolescentes. Portanto, uma taxa de sobrevivência mais alta é descrita. No entanto, os tratamentos contra o câncer podem alterar as funções reprodutivas e reduzir consideravelmente a janela da fertilidade para a idade adulta. Portanto, recomenda-se proceder à preservação da fertilidade por vitrificação de oócitos quando possível. A vitrificação é uma técnica de congelamento que permite alta taxa de sobrevivência e resultados semelhantes por tecnologias de reprodução assistida em comparação com o uso de oócitos frescos. Um método inovador de vitrificação automatizada foi desenvolvido recentemente. O protocolo usual consiste em vitrificar ovócitos maduros. No entanto, esta estratégia não pode ser usada para câncer sensível a hormônios ou quando a estimulação ovariana não é possível. Nessas situações, oócitos imaturos podem ser coletados. Também é necessário realizar uma etapa de maturação in vitro para uso por tecnologia de reprodução assistida.
De acordo com os dados recentes da literatura, ainda não está claro se a vitrificação dos ovócitos deve ser realizada antes ou após a maturação in vitro (MIV). Portanto, o objetivo deste estudo é estudar o impacto na estrutura e funções dos ovócitos quando a vitrificação é realizada antes ou depois da MIV. A vitrificação será realizada por um método semi-automático que é um método inovador.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
Para realizar este estudo, o investigador irá comparar três grupos. Grupo 1: ovócitos imaturos vitrificados antes da MIV; Grupo 2: ovócitos imaturos vitrificados após IVM; Grupo3: oócitos imaturos frescos tratados por IVM (sem vitrificação, grupo controle).
Os oócitos imaturos são fornecidos por pacientes com ICSI. Na rotina, esses oócitos (vesícula germinativa) são normalmente destruídos porque não podem ser usados para injeção. As mulheres darão um consentimento informado e por escrito. Os critérios de inclusão são mulheres com menos de 37 anos sem disovulação.
A vitrificação será realizada pelo método semi-automático (Gavi, Merck). A cinética e taxa de maturação serão analisadas por time lapse (Primovision, Vitrolife). Nos oócitos maduros, o citoesqueleto de actina e tubulina, a organização do fuso e os grânulos corticais serão estudados por imunofluorescência e microscopia confocal 3D. A expressão de transcrição dos fatores maternos será analisada por RT-PCR. A ploidia será analisada por multiFISH e/ou CGH array.
Tipo de estudo
Inscrição (Antecipado)
Contactos e Locais
Locais de estudo
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Clermont-Ferrand, França, 63003
- CHU clermont-ferrand
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Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
Aceita Voluntários Saudáveis
Gêneros Elegíveis para o Estudo
Método de amostragem
População do estudo
Descrição
Critério de inclusão:
- Tratamento ICSI
- ovócitos imaturos
- Sem patologias de ovulação
Critério de exclusão:
- Síndrome dos ovários poliquísticos
- Endometriose
- doença ovulatória
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
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Ovócitos imaturos vitrificados antes da maturação in vitro
Os ovócitos imaturos serão vitrificados em sistema fechado de vitrificação com método semiautomático.
Após o aquecimento, será realizada uma cultura de maturação durante 36 horas
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Gavi, Merck ® permite a vitrificação semiautomática com sistema fechado.
Grupo 1: ovócitos imaturos vitrificados antes da MIV; Grupo 2: ovócitos imaturos vitrificados após IVM; Grupo3: oócitos imaturos frescos tratados por IVM (sem vitrificação, grupo controle).
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Ovócitos imaturos vitrificados após maturação in vitro
Uma cultura de maturação de oócitos imaturos será realizada in vitro durante 36 horas.
Após a MIV, os oócitos maduros serão vitrificados em sistema fechado por método semi-automático.
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Gavi, Merck ® permite a vitrificação semiautomática com sistema fechado.
Grupo 1: ovócitos imaturos vitrificados antes da MIV; Grupo 2: ovócitos imaturos vitrificados após IVM; Grupo3: oócitos imaturos frescos tratados por IVM (sem vitrificação, grupo controle).
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Ovócitos frescos
A cultura de ovócitos imaturos será realizada durante 36 horas
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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A cinética do desenvolvimento embrionário
Prazo: 6 dias após ICSI e até a conclusão do estudo
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a partir dos registros obtidos com Time Lapse Primovision, o investigador poderá determinar os tempos precisos de desenvolvimento embrionário após a maturação in vitro.
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6 dias após ICSI e até a conclusão do estudo
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Análise do citoesqueleto de actina e tubulina e organização do fuso em ovócitos maduros (Metáfase II)
Prazo: 01/01/2019 - 31/12/2019
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Oócitos em estágio de metáfase II serão utilizados para experimentos de imunofluorescência para coloração de actina, tubulina e cromossomos.
Os oócitos serão visualizados usando microscópio confocal para realizar imagens de alta resolução e análise quantitativa de imagens.
O comprimento, posição e orientação do segundo fuso meiótico serão analisados.
A rede de actina e os cromossomos serão analisados quantitativamente.
Todas as medições serão comparadas com oócitos recém-madurecidos (Metaphase-II) usados como grupo controle.
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01/01/2019 - 31/12/2019
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Análise da segregação cromossômica durante a primeira divisão meiótica
Prazo: 01/01/2019 - 31/12/2019
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Uma Hibridização in Situ multifluorescência e/ou um array CGH será realizada para medir a segregação cromossômica após a vitrificação
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01/01/2019 - 31/12/2019
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Análise da distribuição dos grânulos corticais em oócitos maduros (metáfase II).
Prazo: 01/01/2019 - 31/12/2019
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Uma coloração com lectina será utilizada para marcar grânulos corticais de oócitos maturados para observar se o protocolo tem impacto em sua distribuição espacial.
Para analisar esta coloração, o investigador usará o método quantitativo de análise de imagem.
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01/01/2019 - 31/12/2019
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Análise das estabilidades dos fatores maternos.
Prazo: 01/01/2019 - 31/12/2019
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Fatores maternos armazenados no citoplasma do oócito durante a oogênese como proteínas e transcritos são essenciais para o desenvolvimento embrionário inicial.
O investigador realizará transcrição reversa combinada com PCR em tempo real para quantificar as quantidades de transcrição de genes candidatos selecionados a partir de bancos de dados de oócitos humanos.
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01/01/2019 - 31/12/2019
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (ANTECIPADO)
Conclusão Primária (ANTECIPADO)
Conclusão do estudo (ANTECIPADO)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (REAL)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (REAL)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Outros números de identificação do estudo
- CHU-393
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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