Metody pro zachování plodnosti: Vliv vitrifikace na in vitro zralé oocyty (OVOMIV)
Během posledních desetiletí došlo ke zlepšení léčby rakoviny u žen a dospívajících. Proto je popsána vyšší míra přežití. Léčba rakoviny však může změnit reprodukční funkce a výrazně snížit okno plodnosti do dospělosti. Proto se doporučuje přistoupit k zachování plodnosti vitrifikací oocytů, pokud je to možné. Vitrifikace je zmrazovací technika umožňující vysokou míru přežití a podobné výsledky pomocí technologií asistované reprodukce ve srovnání s použitím čerstvých oocytů. Nedávno byla vyvinuta inovativní metoda automatizované vitrifikace. Obvyklý protokol spočívá v vitrifikaci zralých oocytů. Tuto strategii však nelze použít u rakoviny citlivé na hormony nebo v případech, kdy stimulace vaječníků není možná. V těchto situacích lze odebrat nezralé oocyty. Je také nutné realizovat krok zrání in vitro pro použití technologií asistované reprodukce.
Podle nejnovějších údajů z literatury zůstává nejasné, zda musí být vitrifikace ovocytů prováděna před nebo po zrání in vitro (IVM). Cílem této studie je proto studovat vliv na strukturu a funkce ovocytů, když je vitrifikace prováděna před nebo po IVM. Vitrifikace bude prováděna poloautomatickou metodou, která je inovativní metodou.
Přehled studie
Postavení
Intervence / Léčba
Detailní popis
K provedení této studie výzkumník porovná tři skupiny. Skupina 1: nezralé ovocyty vitrifikované před IVM; Skupina 2: nezralé oocyty vitrifikované po IVM; Skupina 3: čerstvé nezralé oocyty ošetřené IVM (bez vitrifikace, kontrolní skupina).
Nezralé oocyty poskytují pacientky s ICSI. Běžně jsou tyto oocyty (germinální váčky) normálně zničeny, protože je nelze použít pro injekci. Ženy dají informovaný a písemný souhlas. Kritéria pro zařazení jsou ženy do 37 let bez dysovulace.
Vitrifikace bude provedena poloautomatickou metodou (Gavi, Merck). Kinetika a rychlost zrání budou analyzovány pomocí časosběru (Primovision, Vitrolife). U zralých oocytů bude pomocí imunofluorescence a 3D konfokální mikroskopie studován aktinový a tubulinový cytoskelet, organizace vřeténka a kortikální granula. Exprese transkripce mateřských faktorů bude analyzována pomocí RT-PCR. Ploidie bude analyzována pomocí multiFISH a/nebo CGH array.
Typ studie
Zápis (Očekávaný)
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
-
Clermont-Ferrand, Francie, 63003
- Chu Clermont-Ferrand
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Pohlaví způsobilá ke studiu
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Léčba ICSI
- Nezralé oocyty
- Bez ovulačních patologií
Kritéria vyloučení:
- Syndrom polykistických vaječníků
- Endometrióza
- Ovulační onemocnění
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
Kohorty a intervence
Skupina / kohorta |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Nezralé oocyty vitrifikovány před zráním in vitro
Nezralé oocyty budou vitrifikovány pomocí uzavřeného systému vitrifikace poloautomatickou metodou.
Po zahřátí bude po dobu 36 hodin prováděna dozrávací kultura
|
Gavi, Merck ® umožňuje poloautomatickou vitrifikaci s uzavřeným systémem.
Skupina 1: nezralé ovocyty vitrifikované před IVM; Skupina 2: nezralé oocyty vitrifikované po IVM; Skupina 3: čerstvé nezralé oocyty ošetřené IVM (bez vitrifikace, kontrolní skupina).
|
|
Nezralé oocyty vitrifikované po zrání in vitro
Maturační kultura nezralých oocytů bude provedena in vitro po dobu 36 hodin.
Po IVM budou zralé oocyty vitrifikovány v uzavřeném systému poloautomatickou metodou.
|
Gavi, Merck ® umožňuje poloautomatickou vitrifikaci s uzavřeným systémem.
Skupina 1: nezralé ovocyty vitrifikované před IVM; Skupina 2: nezralé oocyty vitrifikované po IVM; Skupina 3: čerstvé nezralé oocyty ošetřené IVM (bez vitrifikace, kontrolní skupina).
|
|
Čerstvé oocyty
Kultivace nezralých oocytů bude provedena během 36 hodin
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Kinetika embryonálního vývoje
Časové okno: 6 dní po ICSI a po dokončení studie
|
ze záznamů získaných pomocí Time Lapse Primovision bude výzkumník schopen určit přesné časy embryonálního vývoje po zrání in vitro.
|
6 dní po ICSI a po dokončení studie
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Analýza aktinového a tubulinového cytoskeletu a organizace vřeténka ve zralých ovocytech (Metafáze II)
Časové okno: 01.01.2019 – 31.12.2019
|
Oocyty ve stádiu metafáze II budou použity pro imunofluorescenční experimenty k barvení aktinu, tubulinu a chromozomů.
Oocyty budou zobrazeny pomocí konfokálního mikroskopu, aby se provedlo zobrazení s vysokým rozlišením a kvantitativní analýza obrazu.
Bude analyzována délka, poloha a orientace druhého meiotického vřeténka.
Aktinová síť a chromozomy budou analyzovány kvantitativně.
Všechna měření budou porovnána s čerstvě zralými (Metaphase-II) oocyty použitými jako kontrolní skupina.
|
01.01.2019 – 31.12.2019
|
|
Analýza segregace chromozomů během prvního meiotického dělení
Časové okno: 01.01.2019 – 31.12.2019
|
K měření segregace chromozomů po vitrifikaci bude provedena multifluorescenční in situ hybridizace a/nebo pole CGH.
|
01.01.2019 – 31.12.2019
|
|
Analýza distribuce kortikálních granulí ve zralých (Metaphase II) oocytech.
Časové okno: 01.01.2019 – 31.12.2019
|
Barvení lektinem bude použito k označení kortikálních granulí zralých oocytů, aby bylo možné sledovat, zda má protokol vliv na jejich prostorovou distribuci.
K analýze tohoto barvení bude výzkumník používat metodu kvantitativní analýzy obrazu.
|
01.01.2019 – 31.12.2019
|
|
Analýza stabilit mateřských faktorů.
Časové okno: 01.01.2019 – 31.12.2019
|
Mateřské faktory uložené v cytoplazmě oocytů během oogeneze jako proteiny a transkripty jsou nezbytné pro raný embryonální vývoj.
Výzkumník provede reverzní transkripci kombinovanou s PCR v reálném čase pro kvantifikaci množství transkriptů kandidátních genů vybraných z databází lidských oocytů.
|
01.01.2019 – 31.12.2019
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (OČEKÁVANÝ)
Primární dokončení (OČEKÁVANÝ)
Dokončení studie (OČEKÁVANÝ)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (AKTUÁLNÍ)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (AKTUÁLNÍ)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Klíčová slova
Další identifikační čísla studie
- CHU-393
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .