う蝕象牙質の微生物サンプリング

インフォームド・コンセントのもと、無菌操作環境（従来の器具滅菌に加えて、制御され、ミクロンレベルでフィルターされた環境空気流）下で、歯科患者ボランティアが虫歯構造の領域または再発性虫歯の欠陥のある詰め物を除去することを提案します。従来の日常的な手順には次のものが含まれます。 局所麻酔。ラバーダムを使用した歯の隔離。回転式歯の切削器具を使用して、表面の虫歯、弱った歯の構造、または欠陥のある充填材を除去します。次に、滅菌した鋭利なスプーン掘削機を使用して、軟化した象牙質を手作業で除去します。 象牙質除去の限界は、臨床医による歯の硬度の推定、つまり現在の従来の倫理的実践を使用して決定されます。 この最後のステップ、つまり推定硬度に基づいて組織を除去することは、上で説明したとおり、広く受け入れられている標準です。

除去後、露出した象牙質表面を 15 倍の手術用顕微鏡で視覚的に検査し、変色した象牙質の領域を検出します。 このような領域は、超低速の直径 0.2 mm の回転切断器具を使用してマイクロサンプリングされ、結果として生じる象牙質のフレークが滅菌ファイバーで除去されます。 準備された各窩洞は、従来の歯の充填材料と技術を使用して修復されます。

除去直後に各象牙質フレークの重量を測定し、細菌輸送培地に入れて超音波処理します。 輸送培地は 2 つに分割され、別々のサンプルが嫌気性および好気性増殖条件下で細菌増殖培地に添加されます。 検出された生存微生物は、視覚的識別を使用する従来のプレーティング技術と、RNA 分析を使用する商用研究室の両方によって識別されます。