Prélèvement microbien de dentine cariée

Il est proposé qu'avec le consentement éclairé et dans un environnement opératoire stérile (flux d'air environnemental contrôlé et filtré au niveau du micron, en plus de la stérilisation conventionnelle des instruments), les patients dentaires volontaires auront soit des zones de structure dentaire cariée, soit des obturations défectueuses de caries récurrentes retirées à l'aide les procédures conventionnelles de routine, qui comprendront : l'anesthésie locale ; isolation des dents à l'aide d'une digue en caoutchouc ; élimination de la carie superficielle, de la structure dentaire affaiblie ou des matériaux d'obturation défectueux avec des instruments de coupe dentaire rotatifs ; puis l'élimination de la dentine ramollie à l'aide d'excavatrices stériles à cuillère pointue, à la main. La limite d'élimination de la dentine sera déterminée par l'estimation de la dureté de la dent par le clinicien, c'est-à-dire en utilisant la pratique conventionnelle et éthique actuelle. Cette dernière étape, l'élimination du tissu guidée par la dureté estimée, est telle que décrite ci-dessus la norme universellement acceptée.

Après le retrait, la surface de dentine exposée sera examinée visuellement avec un microscope opératoire 15X pour détecter toute zone de dentine décolorée. Toutes ces zones seront micro-échantillonnées à l'aide d'instruments de coupe rotatifs à vitesse ultra lente de 0,2 mm de diamètre et l'élimination des flocons de dentine résultants avec des fibres stériles. Chaque cavité préparée sera ensuite restaurée à l'aide de matériaux et de techniques d'obturation dentaire conventionnels.

Immédiatement après le retrait, chaque flocon de dentine sera pesé, placé dans un milieu de transport bactérien, puis soniqué. Le milieu de transport sera divisé en deux et des échantillons séparés seront ajoutés au milieu de croissance bactérienne dans des conditions de croissance anaérobie et aérobie. Tous les micro-organismes viables détectés seront identifiés à la fois par des techniques de mise en culture conventionnelles utilisant l'identification visuelle et par un laboratoire commercial utilisant l'analyse de l'ARN.