Mikrobiell prøvetaking av karies dentin

Det foreslås at med informert samtykke, og i et sterilt driftsmiljø (kontrollert, mikronnivåfiltrert miljøluftstrøm, i tillegg til konvensjonell instrumentsterilisering) vil tannpasientfrivillige enten få områder med ødelagt tannstruktur eller tilbakevendende kariesdefekte fyllinger fjernet vha. konvensjonelle, rutinemessige prosedyrer, som vil inkludere: lokalbedøvelse; tannisolering ved hjelp av gummidemning; fjerning av overfladisk forråtnelse, svekket tannstruktur eller defekte fyllmaterialer med roterende tannskjæreinstrumenter; og deretter fjerning av myknet dentin ved hjelp av sterile gravemaskiner med skarpe skjeer, for hånd. Grensen for fjerning av dentin vil bli bestemt av klinikerens estimat av tannhardhet, det vil si ved å bruke dagens konvensjonelle og etiske praksis. Dette siste trinnet, fjerning av vev styrt av estimert hardhet, er som beskrevet ovenfor den universelt aksepterte standarden.

Etter fjerning vil den eksponerte dentinoverflaten bli undersøkt visuelt med et 15X operasjonsmikroskop for å oppdage eventuelle områder med misfarget dentin. Alle slike områder vil bli tatt med mikroprøver ved bruk av roterende skjæreinstrumenter med ultralang hastighet på 0,2 mm i diameter og fjerning av resulterende dentinflak med sterile fibre. Hvert forberedt hulrom vil deretter bli restaurert ved bruk av konvensjonelle tannfyllingsmaterialer og -teknikker.

Umiddelbart etter fjerning vil hver dentinflak veies, plasseres i bakterietransportmedium og deretter sonikeres. Transportmediet vil deles i to, og separate prøver legges til bakterievekstmedium under anaerobe og aerobe vekstforhold. Eventuelle levedyktige mikroorganismer som påvises vil bli identifisert både ved konvensjonelle pletteringsteknikker ved bruk av visuell identifikasjon, og av et kommersielt laboratorium ved bruk av RNA-analyse.