Campionamento microbico della dentina cariata

Si propone che con il consenso informato e in un ambiente operativo sterile (flusso d'aria ambientale controllato, filtrato a livello di micron, oltre alla sterilizzazione convenzionale degli strumenti) i volontari dei pazienti odontoiatrici vengano rimossi sia dalle aree della struttura del dente cariato sia dalle otturazioni difettose della carie ricorrenti utilizzando procedure convenzionali e di routine, che includeranno: anestesia locale; isolamento del dente mediante diga di gomma; rimozione di carie superficiali, struttura del dente indebolita o materiali di riempimento difettosi con strumenti rotanti per il taglio dei denti; e quindi rimozione della dentina ammorbidita utilizzando escavatori a cucchiaio taglienti sterili, a mano. Il limite di rimozione della dentina sarà determinato dalla stima della durezza del dente da parte del medico, ovvero utilizzando la pratica convenzionale ed etica attuale. Quest'ultima fase, la rimozione del tessuto guidata dalla durezza stimata, è come descritto sopra lo standard universalmente accettato.

Dopo la rimozione, la superficie della dentina esposta verrà esaminata visivamente con un microscopio operatorio 15X per rilevare eventuali aree di dentina scolorita. Qualsiasi area di questo tipo verrà micro-campionata utilizzando strumenti di taglio rotanti a velocità ultra lenta di 0,2 mm di diametro e rimuovendo le scaglie di dentina risultanti con fibre sterili. Ogni cavità preparata verrà quindi restaurata utilizzando materiali e tecniche di otturazione dentale convenzionali.

Immediatamente dopo la rimozione, ogni scaglia di dentina verrà pesata, posta nel mezzo di trasporto batterico, quindi sonicata. Il terreno di trasporto sarà diviso in due, e campioni separati verranno aggiunti al terreno di crescita batterica in condizioni di crescita anaerobica e aerobica. Tutti i microrganismi vitali rilevati saranno identificati sia mediante tecniche di placcatura convenzionali utilizzando l'identificazione visiva, sia da un laboratorio commerciale utilizzando l'analisi dell'RNA.