Mikrobiell provtagning av karies dentin

Det föreslås att frivilliga tandpatienter med informerat samtycke och i en steril driftsmiljö (kontrollerat, mikronnivåfiltrerat luftflöde, utöver konventionell instrumentsterilisering) antingen har områden med förstörd tandstruktur eller återkommande kariesdefekta fyllningar som tas bort med hjälp av konventionella, rutinmässiga procedurer, som kommer att innefatta: lokalbedövning; tandisolering med gummidamm; avlägsnande av ytligt förfall, försvagad tandstruktur eller defekta fyllnadsmaterial med roterande tandskärningsinstrument; och sedan avlägsnande av uppmjukat dentin med hjälp av sterila grävmaskiner med vassa sked, för hand. Gränsen för dentinavlägsnande kommer att bestämmas av läkarens uppskattning av tandhårdheten, det vill säga genom att använda nuvarande konventionella och etiska metoder. Detta sista steg, borttagning av vävnad styrt av uppskattad hårdhet, är enligt beskrivningen ovan den universellt accepterade standarden.

Efter avlägsnande kommer den exponerade dentinytan att undersökas visuellt med ett 15X operationsmikroskop för att upptäcka eventuella områden med missfärgat dentin. Alla sådana områden kommer att mikroprovtas med hjälp av ultralångsamma, 0,2 mm diameter roterande skärinstrument och avlägsnande av resulterande dentinflingor med sterila fibrer. Varje förberedd hålighet kommer sedan att återställas med hjälp av konventionella tandfyllningsmaterial och tekniker.

Omedelbart efter avlägsnande kommer varje dentinflinga att vägas, placeras i bakterietransportmedium och sedan sonikeras. Transportmediet kommer att delas i två och separata prover tillsätts till bakteriellt tillväxtmedium under anaeroba och aeroba tillväxtförhållanden. Alla livsdugliga mikroorganismer som upptäcks kommer att identifieras både med konventionella pläteringsmetoder med visuell identifiering och av ett kommersiellt laboratorium som använder RNA-analys.