Muestreo microbiano de dentina cariada

Se propone que, con consentimiento informado, y en un entorno quirúrgico estéril (flujo de aire ambiental controlado y filtrado a nivel de micras, además de la esterilización de instrumentos convencionales), los pacientes dentales voluntarios tendrán áreas de estructura dental cariada o caries recurrentes con empastes defectuosos eliminados utilizando procedimientos convencionales de rutina, que incluirán: anestesia local; aislamiento de dientes con dique de goma; eliminación de caries superficiales, estructura dental debilitada o materiales de relleno defectuosos con instrumentos rotatorios para cortar dientes; y luego la eliminación de la dentina reblandecida utilizando excavadoras de cuchara afiladas estériles, a mano. El límite de remoción de dentina estará determinado por la estimación de la dureza del diente por parte del clínico, es decir, utilizando la práctica convencional y ética actual. Este último paso, la eliminación de tejido guiada por la dureza estimada, es como se describe anteriormente, el estándar universalmente aceptado.

Después de la extracción, la superficie expuesta de la dentina se examinará visualmente con un microscopio operativo de 15X para detectar cualquier área de dentina decolorada. Se tomarán micromuestras de dichas áreas utilizando instrumentos de corte rotatorios de 0,2 mm de diámetro y velocidad ultra lenta y se eliminarán las escamas de dentina resultantes con fibras estériles. Luego, cada cavidad preparada se restaurará utilizando materiales y técnicas de obturación dental convencionales.

Inmediatamente después de la extracción, se pesará cada escama de dentina, se colocará en un medio de transporte bacteriano y luego se sonicará. El medio de transporte se dividirá en dos y se agregarán muestras separadas al medio de crecimiento bacteriano en condiciones de crecimiento anaeróbico y aeróbico. Todos los microorganismos viables detectados se identificarán tanto mediante técnicas convencionales de cultivo mediante identificación visual como mediante un laboratorio comercial mediante análisis de ARN.