Mikrobiel prøveudtagning af carious dentin

Det foreslås, at frivillige tandpatienter med informeret samtykke og i et sterilt driftsmiljø (kontrolleret, mikronniveaufiltreret miljøluftstrøm, foruden konventionel instrumentsterilisering) enten har områder med ødelagt tandstruktur eller tilbagevendende cariesdefekte fyldninger fjernet vha. konventionelle, rutinemæssige procedurer, som vil omfatte: lokalbedøvelse; tandisolering ved hjælp af gummidæmning; fjernelse af overfladisk forfald, svækket tandstruktur eller defekte fyldningsmaterialer med roterende tandskæreinstrumenter; og derefter fjernelse af blødgjort dentin ved hjælp af sterile, skarpe skegravemaskiner i hånden. Grænsen for dentinfjernelse vil blive bestemt af klinikerens estimat af tandhårdhed, det vil sige ved anvendelse af nuværende konventionel og etisk praksis. Dette sidste trin, fjernelse af væv styret af estimeret hårdhed, er som beskrevet ovenfor den universelt accepterede standard.

Efter fjernelse vil den eksponerede dentinoverflade blive undersøgt visuelt med et 15X operationsmikroskop for at detektere eventuelle områder med misfarvet dentin. Ethvert sådant område vil blive udtaget i mikroprøver ved hjælp af ultra-langsomme hastigheder, 0,2 mm diameter roterende skæreinstrumenter og fjernelse af resulterende dentinflager med sterile fibre. Hvert forberedt hulrum vil derefter blive restaureret ved hjælp af konventionelle tandfyldningsmaterialer og -teknikker.

Umiddelbart efter fjernelse vil hver dentinflage blive vejet, anbragt i bakterietransportmedium og derefter sonikeret. Transportmediet vil blive delt i to, og separate prøver tilsættes til bakterievækstmedium under anaerobe og aerobe vækstbetingelser. Eventuelle levedygtige mikroorganismer, der påvises, vil blive identificeret både ved konventionelle pletteringsteknikker ved hjælp af visuel identifikation og af et kommercielt laboratorium ved hjælp af RNA-analyse.