Mikrobielle Probenahme von kariösem Dentin

Es wird vorgeschlagen, dass freiwillige Zahnpatienten mit Einverständniserklärung und in einer sterilen Operationsumgebung (kontrollierter, auf Mikrometerebene gefilterter Umgebungsluftstrom zusätzlich zur herkömmlichen Instrumentensterilisation) entweder Bereiche mit kariöser Zahnstruktur oder durch wiederkehrende Karies defekte Füllungen entfernen lassen konventionelle Routineverfahren, die Folgendes umfassen: Lokalanästhesie; Zahnisolation mit Kofferdam; Entfernung oberflächlicher Karies, geschwächter Zahnsubstanz oder defekter Füllungsmaterialien mit rotierenden Zahnschneideinstrumenten; und anschließendes Entfernen des erweichten Dentins mit sterilen, scharfen Löffelbaggern von Hand. Die Grenze der Dentinentfernung wird anhand der Schätzung der Zahnhärte durch den Arzt bestimmt, d. h. anhand der gegenwärtigen konventionellen und ethischen Praxis. Dieser letzte Schritt, die Gewebeentfernung anhand der geschätzten Härte, ist, wie oben beschrieben, der allgemein anerkannte Standard.

Nach der Entfernung wird die freiliegende Dentinoberfläche visuell mit einem 15-fachen Operationsmikroskop untersucht, um etwaige Bereiche mit verfärbtem Dentin zu erkennen. In allen solchen Bereichen werden Mikroproben mit rotierenden Schneidinstrumenten mit extrem langsamer Geschwindigkeit und einem Durchmesser von 0,2 mm entnommen und die resultierenden Dentinflocken werden mit sterilen Fasern entfernt. Anschließend wird jede vorbereitete Kavität mit herkömmlichen Zahnfüllungsmaterialien und -techniken wiederhergestellt.

Unmittelbar nach der Entfernung wird jede Dentinflocke gewogen, in ein bakterielles Transportmedium gegeben und anschließend mit Ultraschall behandelt. Das Transportmedium wird in zwei Teile geteilt und separate Proben werden unter anaeroben und aeroben Wachstumsbedingungen dem Bakterienwachstumsmedium hinzugefügt. Alle nachgewiesenen lebensfähigen Mikroorganismen werden sowohl durch herkömmliche Ausplattierungstechniken mittels visueller Identifizierung als auch durch ein kommerzielles Labor mittels RNA-Analyse identifiziert.