まれなドライバー遺伝子変異を有する中国の非小細胞肺癌（NSCLC）患者の多施設観察研究

包含基準:

1. 18歳以上の女性または男性；
2. -NSCLCの組織学的または細胞学的に証明された診断;
3. 院内で実施した肺がんポリメラーゼ連鎖反応（PCR）パネルキットによる腫瘍組織遺伝子検査結果が得られる
4. -署名および日付入りのインフォームドコンセント。

除外基準:

1. 他の腫瘍タイプと組み合わせる
2. 研究者は、臨床検索プロセスと結果に影響を与える可能性のある状況を判断します。

推定登録者数: 50000 人の参加者。

結果の測定:

一次評価項目：

1. 現実世界の50,000人の患者におけるNSCLCのまれなドライバー遺伝子変異の頻度と臨床病理学的特徴。
2. NSCLC患者におけるまれなドライバー遺伝子サブタイプと臨床病理学的特徴（年齢、性別、喫煙歴、組織学的サブタイプ、臨床病期、リンパ節転移、局所転移、遠隔転移、脳転移）との関係。

二次結果の測定:

1. NSCLC 患者におけるまれなドライバー遺伝子変異サブタイプと疾患の生存率または予後 (客観的奏効率 (ORR)、無増悪生存率 (PFS)、および全生存率 (OS)) との関係。

調査方法:

1. 事前エントリー・審査期間（V0）

   1. 入学基準に従って登録患者をスクリーニングします。 病院での肺がん PCR パネル キットの検出には、組織サンプル (手術組織、介入条件下での生検組織、リンパ節生検組織、転移組織などを含む) の使用が必要です。
   2. 登録されたすべてのサンプルは、神経栄養トロポミオシン受容体キナーゼ (NTRK) 遺伝子変異 (PCR) をテストする必要があります。
   3. a)+b) の結果、まれなドライバー遺伝子変異が検出されたことが示された場合、参加者は次のステップに進みます。 a)+b) の検査結果が陰性の場合、この集団の次世代シーケンシング (NGS) 検出のために 500 例が選択され、次のステップに関与しました。

2. ベースライン期間 (V1)

   を。サンガーシーケンシングにより、まれなドライバー遺伝子変異陽性サンプルをさらに分類し、テスト結果を記録します。

3. フォローアップ期間 (V2)

   1. 病気の治療レジメンと登録患者の生存状況のフォローアップを記録します。
   2. 3 か月に 1 回 (または臨床的ニーズに応じて) 60 か月または死亡まで;
   3. フォローアップ治療、疾患の状態、生存状態、画像検査の結果、臨床検査の結果などを含む情報を収集します (詳細については、症例報告書 (CRF) フォームを参照してください)。
   4. さらなる分子検査（一次薬剤耐性など）が必要な場合は、次世代シーケンシング（NGS）法を使用した多重遺伝子解析。
   5. フォローアップの喪失: 患者がフォローアップの訪問のためにセンターに戻らなかった場合、センターは電話での連絡を 2 回試行し、連絡先の記録を保持します。 患者が 2 回目の接触から 1 か月以内に応答しない場合、患者は面接に失敗したと見なされます。

材料および方法：

材料：

標本材料は、腫瘍組織サンプルから抽出されたヒトゲノム DNA および全 RNA でなければなりません。 DNA および RNA の抽出の前に、腫瘍組織サンプルに少なくとも 20% の腫瘍細胞があることを確認することが非常に重要です。

方法:

上皮成長因子受容体 20 エクソン挿入 (EGFR エクソン 20-ins) 変異/アクチビン受容体様キナーゼ (ALK) 融合/ROS プロトオンコジーン 1 受容体チロシンキナーゼ (ROS1) 融合/Kirsten Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog (KRAS) 変異/神経芽細胞腫 RAS ウイルス オンコジーン ホモログ (NRAS) 変異/B-Raf がん原遺伝子、セリン/スレオニン キナーゼ (BRAF) 変異/ホスファチジルイノシトール-4,5-ビスリン酸 3-キナーゼ 触媒サブユニット アルファ (PIK3CA) 変異/RET がん原遺伝子 (RET ) 融合/間葉上皮移行因子 (MET) 14 エクソン スキッピング/Erb-b2 受容体チロシン キナーゼ 2 (ERBB2) 変異/神経栄養性トロポミオシン受容体キナーゼ (NTRK) 融合変異は、中国の NSCLC で蛍光定量的ポリメラーゼ連鎖反応によって検出されました。

1. DNA/RNA 抽出:

   遺伝子融合検出のトータル RNA 濃度は、ホルマリン固定パラフィン包埋 (FFPE) 組織で 10~100 ng/μL、新鮮な組織で 2~30 ng/μL です。

   遺伝子変異検出のための抽出 DNA 量は、FFPE 組織で 1.5~3 ng/μL、新鮮な組織で 0.5~1 ng/μL です。

2. RNA逆転写。

3. RNA および DNA の標的変化の検出:

   ALK、ROS1、RET、NTRK 遺伝子融合および MET 14 エクソンスキッピング変異が RNA で検出されました。

   EGFR 20 エキソンイン、KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、および ERBB2 変異が DNA で検出されました。

4. 結果の解釈