Estudio observacional multicéntrico de pacientes chinos con cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) con mutación rara del gen conductor

Criterios de inclusión:

1. Hombre o mujer, mayor de 18 años;
2. Diagnóstico probado histológica o citológicamente de NSCLC;
3. Capaz de obtener resultados de pruebas de genes de tejido tumoral mediante el kit de panel de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de cáncer de pulmón realizado en el hospital
4. Consentimiento informado firmado y fechado.

Criterio de exclusión:

1. Combinar con otro tipo de tumor
2. El investigador juzga la situación que puede afectar el proceso de búsqueda clínica y los resultados.

Inscripción estimada: 50000 participantes.

Medidas de resultado:

Medidas de resultado primarias:

1. La frecuencia de mutación del gen impulsor raro de NSCLC y las características clinicopatológicas en 50,000 pacientes en el mundo real;
2. La relación entre los subtipos de genes impulsores raros y las características clinicopatológicas (edad, sexo, antecedentes de tabaquismo, subtipo histológico, estadio clínico, metástasis en los ganglios linfáticos, metástasis local, metástasis a distancia, metástasis cerebral) en pacientes con NSCLC.

Medidas de resultado secundarias:

1. La relación entre los subtipos de mutaciones raras del gen impulsor y la supervivencia o el pronóstico de la enfermedad (tasa de respuesta objetiva [ORR], supervivencia libre de progresión [PFS] y supervivencia general [OS]) en pacientes con NSCLC.

Método de investigación:

1. Pre-entrada/período de selección (V0)

   1. Examinar a los pacientes inscritos de acuerdo con los criterios de admisión. La detección del kit de panel de PCR de cáncer de pulmón en el hospital requiere el uso de muestras de tejido (incluyendo tejido quirúrgico, tejido de biopsia en condiciones intervencionistas, tejido de biopsia de ganglio linfático, tejido de metástasis, etc.);
   2. Todas las muestras inscritas deben someterse a prueba de mutación del gen (PCR) del receptor de tropomiosina neurotrófica (NTRK);
   3. Si los resultados a)+b) muestran que se detectó una mutación rara del gen impulsor, los participantes participarán en el siguiente paso; si los resultados de las pruebas a)+b) fueron negativos, entonces se seleccionaron 500 casos para la detección de secuenciación de próxima generación (NGS) en esta población, y se incluyeron en el siguiente paso;

2. Período de referencia (V1)

   a. Hacer una clasificación adicional de las muestras positivas de mutación del gen impulsor raro mediante secuenciación de Sanger y registrar los resultados de la prueba;

3. Período de seguimiento (V2)

   1. Registrar el régimen terapéutico de la enfermedad y el seguimiento del estado de supervivencia de los pacientes incluidos;
   2. Una vez cada 3 meses (o según las necesidades clínicas) hasta los 60 meses o la muerte;
   3. Recopilar información, incluido el tratamiento de seguimiento, el estado de la enfermedad y el estado de supervivencia, los resultados de los exámenes de imágenes, los resultados de los exámenes de laboratorio, etc. (consulte el formulario de informe de casos (CRF) para obtener más detalles);
   4. Para aquellos que necesitan más pruebas moleculares (como la resistencia primaria a los medicamentos), análisis de múltiples genes utilizando el método de secuenciación de próxima generación (NGS);
   5. Pérdida de seguimiento: Si el paciente no regresa al centro para una visita de seguimiento, el centro hará dos intentos de contacto por teléfono y mantendrá los registros de contacto. Si el paciente no responde dentro de 1 mes después del segundo contacto, se considera que el paciente ha perdido la entrevista.

Materiales y métodos:

Materiales:

El material de la muestra debe ser ADN genómico humano y ARN total extraído de muestras de tejido tumoral. Antes de la extracción de ADN y ARN, es muy importante asegurarse de que haya al menos un 20 % de células tumorales en las muestras de tejido tumoral.

Métodos:

Mutación de inserción del exón 20 del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR exón 20-ins)/Fusión de cinasa similar al receptor de activina (ALK)/Fusión de tirosina cinasa del receptor del protooncogén 1 de ROS (ROS1)/Mutación del homólogo del oncogén viral del sarcoma de rata Kirsten (KRAS)/ Neuroblastoma RAS homólogo del oncogén viral (NRAS) mutación/protooncogén B-Raf, serina/treonina cinasa (BRAF) mutación/fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato 3-cinasa catalítica subunidad alfa (PIK3CA) mutación/protooncogén RET (RET )/Factor de transición mesenquimatoso-epitelial (MET) 14 omisión de exón/Receptor de tirosina quinasa 2 Erb-b2 (ERBB2) mutación/Receptor de tropomiosina quinasa neurotrófica (NTRK) mutación de fusión fueron detectados por reacción en cadena de polimerasa cuantitativa fluorogénica en NSCLC chino.

1. Extracción de ADN/ARN:

   La concentración total de ARN para la detección de fusión génica es de 10 a 100 ng/µl en tejido embebido en parafina fijado en formalina (FFPE) o de 2 a 30 ng/µl en tejido fresco.

   La cantidad de ADN extraído para la detección de mutaciones genéticas es de 1,5 a 3 ng/µL en tejido FFPE o de 0,5 a 1 ng/µL en tejido fresco.

2. Transcripción inversa de ARN.

3. Detección de las alteraciones diana en ARN y ADN:

   ALK, ROS1, RET, NTRK La fusión génica y la mutación de omisión de exón MET 14 se detectaron en el ARN.

   Se detectaron mutaciones en el ADN de EGFR 20 exon-ins, KRAS, NRAS, BRAF, PIK3CA y ERBB2.

4. Interpretación de resultados