Multicentrická observační studie pacientů s čínským nemalobuněčným karcinomem plic (NSCLC) se vzácnou mutací genu řidiče

Kritéria pro zařazení:

1. Žena nebo muž, 18 let nebo starší；
2. Histologicky nebo cytologicky prokázaná diagnóza NSCLC；
3. Schopnost získat výsledky testování genů pro nádorovou tkáň pomocí sady panelu polymerázové řetězové reakce (PCR) z rakoviny plic provedené v nemocnici
4. Podepsaný a datovaný informovaný souhlas.

Kritéria vyloučení:

1. Kombinujte s jiným typem nádoru
2. Vyšetřovatel posuzuje situaci, která může ovlivnit proces klinického vyhledávání a výsledky.

Předpokládaný počet účastníků: 50 000.

Výsledná opatření:

Primární měřítka výsledku:

1. Frekvence vzácné mutace genu řidiče NSCLC a klinickopatologické vlastnosti u 50 000 pacientů v reálném světě;
2. Vztah mezi vzácnými podtypy řídících genů a klinicko-patologickými rysy (věk, pohlaví, kuřácká anamnéza, histologický podtyp, klinické stadium, metastázy do lymfatických uzlin, lokální metastázy, vzdálené metastázy, mozkové metastázy) u pacientů s NSCLC.

Sekundární výsledná opatření:

1. Vztah mezi vzácnými podtypy mutací genu řidiče a přežitím nebo prognózou onemocnění (objektivní odezva (ORR), přežití bez progrese (PFS) a celkové přežití (OS)) u pacientů s NSCLC.

Metoda výzkumu:

1. Období před vstupem/prověřováním (V0)

   1. Proveďte screening zapsaných pacientů podle vstupních kritérií. Detekce soupravy panelu PCR rakoviny plic v nemocnici vyžaduje použití vzorků tkáně (včetně chirurgické tkáně, tkáně biopsie za intervenčních podmínek, tkáně biopsie lymfatických uzlin, tkáně metastáz atd.);
   2. Všechny zapsané vzorky by měly být testovány genovou mutací neurotrofické-tropomyosinového receptoru kinázy (NTRK) (PCR);
   3. Pokud výsledky a)+b) ukážou, že byla detekována vzácná mutace řídícího genu, účastníci budou zapojeni do dalšího kroku; pokud a)+b) výsledky testů byly negativní, pak bylo v této populaci vybráno 500 případů pro detekci sekvenování nové generace (NGS) a bylo zahrnuto do dalšího kroku;

2. Výchozí období (V1)

   A. Proveďte další klasifikaci vzácných vzorků pozitivních na mutaci řidičského genu pomocí Sangerova sekvenování a zaznamenejte výsledky testu;

3. Následné období (V2)

   1. Zaznamenejte terapeutický režim onemocnění a sledování stavu přežití zařazených pacientů;
   2. Jednou za 3 měsíce (nebo podle klinických potřeb) až do 60 měsíců nebo úmrtí;
   3. Sbírejte informace včetně následné léčby, stavu onemocnění a stavu přežití, výsledků zobrazovacích vyšetření, výsledků laboratorních vyšetření atd. (podrobnosti viz formulář Case Report Form (CRF));
   4. Pro ty, kteří potřebují další molekulární testování (jako je primární léková rezistence), multigenová analýza pomocí metody sekvenování nové generace (NGS);
   5. Ztráta sledování: Pokud se pacient nepodaří vrátit do centra na kontrolní návštěvu, centrum provede dva pokusy o telefonický kontakt a uchovává záznamy o kontaktech. Pokud pacient neodpoví do 1 měsíce po druhém kontaktu, má se za to, že pacient rozhovor ztratil.

Materiály a metody:

Materiály:

Materiálem vzorku musí být lidská genomová DNA a celková RNA extrahovaná ze vzorků nádorové tkáně. Před extrakcí DNA a RNA je velmi důležité se ujistit, že ve vzorcích nádorové tkáně je alespoň 20 % nádorových buněk.

Metody:

Mutace receptoru epidermálního růstového faktoru 20 (exon EGFR 20 palců)/fúze kinázy podobné receptoru aktivinu (ALK)/fúze ROS proto-onkogenu 1 receptoru tyrozinkinázy (ROS1)/mutace virového onkogenu Kirsten Rat Sarkom/mutace virového onkogenu (KRAS) Neuroblastom RAS mutace virového onkogenu (NRAS) / B-Raf protoonkogen, mutace serin/threonin kinázy (BRAF) / fosfatidylinositol-4,5-bisfosfát 3-kináza katalytická podjednotka alfa (PIK3CA) mutace (protoonkogen RET RET ) fúze/mezenchymálně-epiteliální přechodový faktor (MET) 14 přeskočení exonu/mutace tyrosinkinázy 2 receptoru Erb-b2 (ERBB2)/ fúzní mutace neurotrofického-tropomyosinového receptoru kinázy (NTRK) byly detekovány pomocí fluorogenní kvantitativní polymerázové řetězové reakce NSC v čínské řetězové reakci.

1. Extrakce DNA/RNA:

   Celková koncentrace RNA pro detekci genové fúze je 10~100 ng/ul v tkáni zalité v parafínu (FFPE) nebo 2~30 ng/ul v čerstvé tkáni.

   Množství extrahované DNA pro detekci genové mutace je 1,5~3 ng/µl v tkáni FFPE nebo 0,5~1 ng/µl v čerstvé tkáni.

2. Reverzní transkripce RNA.

3. Detekce cílových změn v RNA a DNA:

   V RNA byla detekována genová fúze ALK, ROS1, RET, NTRK a mutace přeskočení exonu MET 14.

   V DNA byly detekovány exon-iny EGFR 20, mutace KRAS, NRAS, BRAF, PIK3CA a ERBB2.

4. Interpretace výsledků