Studio osservazionale multicentrico su pazienti cinesi affetti da carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) con rara mutazione del gene driver

Criterio di inclusione:

1. Femmina o maschio, di età pari o superiore a 18 anni;
2. Diagnosi istologicamente o citologicamente provata di NSCLC;
3. In grado di ottenere i risultati dei test genetici del tessuto tumorale mediante il kit del pannello di reazione a catena della polimerasi (PCR) del cancro del polmone effettuato in ospedale
4. Consenso informato firmato e datato.

Criteri di esclusione:

1. Combinare con altri tipi di tumore
2. Lo sperimentatore giudica la situazione che può influenzare il processo ei risultati della ricerca clinica.

Iscrizione stimata: 50000 partecipanti.

Misure di risultato:

Misure di esito primarie：

1. La rara frequenza di mutazione del gene driver NSCLC e le caratteristiche clinicopatologiche in 50.000 pazienti nel mondo reale;
2. La relazione tra sottotipi di geni driver rari e caratteristiche clinicopatologiche (età, sesso, storia del fumo, sottotipo istologico, stadio clinico, metastasi linfonodali, metastasi locali, metastasi a distanza, metastasi cerebrali) nei pazienti con NSCLC.

Misure di esito secondarie:

1. La relazione tra i sottotipi di mutazione del gene driver raro e la sopravvivenza o la prognosi della malattia (tasso di risposta obiettiva (ORR), sopravvivenza libera da progressione (PFS) e sopravvivenza globale (OS)) nei pazienti con NSCLC.

Metodo di ricerca:

1. Periodo di pre-ingresso/screening (V0)

   1. Screening dei pazienti arruolati in base ai criteri di ammissione. Il rilevamento del kit del pannello PCR per carcinoma polmonare in ospedale richiede l'uso di campioni di tessuto (inclusi tessuto chirurgico, tessuto bioptico in condizioni interventistiche, tessuto bioptico linfonodale, tessuto metastatico, ecc.);
   2. Tutti i campioni arruolati devono essere testati per la mutazione del gene del recettore della chinasi neurotrofica-tropomiosina (NTRK) (PCR);
   3. Se i risultati a) + b) mostrano che è stata rilevata una rara mutazione del gene driver, i partecipanti saranno coinvolti nella fase successiva; se i risultati del test a) + b) erano negativi, allora 500 casi sono stati selezionati per il rilevamento del sequenziamento di nuova generazione (NGS) in questa popolazione e sono stati coinvolti nella fase successiva;

2. Periodo di riferimento (V1)

   UN. Effettuare un'ulteriore classificazione dei campioni positivi alla mutazione del gene driver raro mediante il sequenziamento di Sanger e registrare i risultati del test;

3. Periodo di follow-up (V2)

   1. Registrare il regime terapeutico della malattia e il follow-up dello stato di sopravvivenza dei pazienti arruolati;
   2. Una volta ogni 3 mesi (o secondo necessità cliniche) fino a 60 mesi o morte;
   3. Raccogliere informazioni tra cui il trattamento di follow-up, lo stato della malattia e lo stato di sopravvivenza, i risultati degli esami di imaging, i risultati degli esami di laboratorio, ecc. (vedere il modulo Case Report Form (CRF) per i dettagli);
   4. Per coloro che necessitano di ulteriori test molecolari (come la resistenza primaria ai farmaci), analisi multigeniche utilizzando il metodo di sequenziamento di nuova generazione (NGS);
   5. Perdita del follow-up: se il paziente non torna al centro per una visita di follow-up, il centro effettuerà due tentativi di contatto telefonico e conserverà i registri dei contatti. Se il paziente non risponde entro 1 mese dal secondo contatto, si considera che il paziente abbia perso il colloquio.

Materiali e metodi:

Materiali:

Il materiale del campione deve essere DNA genomico umano e RNA totale estratto da campioni di tessuto tumorale. Prima dell'estrazione di DNA e RNA, è molto importante assicurarsi che vi sia almeno il 20% di cellule tumorali nei campioni di tessuto tumorale.

Metodi:

Inserimento dell'esone del recettore del fattore di crescita epidermico 20 (EGFR esone 20-ins)/fusione ALK (Activin Receptor-like Kinase)/fusione del recettore tirosin-chinasi (ROS1) del proto-oncogene 1 ROS/mutazione dell'omologo virale dell'oncogene del sarcoma di Kirsten Rat (KRAS)/ Neuroblastoma RAS viral oncogene homolog (NRAS) mutazione/B-Raf proto-oncogene, mutazione serina/treonina chinasi (BRAF)/fosfatidilinositolo-4,5-bisfosfato 3-chinasi subunità catalitica alfa (PIK3CA) mutazione/RET proto-oncogene (RET ) fusione/fattore di transizione mesenchimale-epiteliale (MET) 14 exon skipping/mutazione del recettore della tirosina chinasi 2 (ERBB2) del recettore Erb-b2/mutazione della fusione della chinasi del recettore della tropomiosina neurotrofica (NTRK) sono state rilevate dalla reazione a catena della polimerasi quantitativa fluorogenica nel NSCLC cinese.

1. Estrazione di DNA/RNA:

   La concentrazione totale di RNA per il rilevamento della fusione genica è di 10~100 ng/µL nel tessuto fissato in formalina e incorporato in paraffina (FFPE) o 2~30 ng/µL nel tessuto fresco.

   La quantità di DNA estratto per il rilevamento della mutazione genica è di 1,5~3 ng/µL nel tessuto FFPE o 0,5~1 ng/µL nel tessuto fresco.

2. Trascrizione inversa dell'RNA.

3. Rilevazione delle alterazioni target nell'RNA e nel DNA:

   La fusione del gene ALK, ROS1, RET, NTRK e la mutazione che salta l'esone MET 14 sono state rilevate nell'RNA.

   Nel DNA sono state rilevate mutazioni dell'esone 20 di EGFR, KRAS, NRAS, BRAF, PIK3CA e ERBB2.

4. Interpretazione dei risultati