Multizentrische Beobachtungsstudie an chinesischen Patienten mit nicht-kleinzelligem Lungenkrebs (NSCLC) mit seltener Mutation des Treibergens

Einschlusskriterien:

1. Weiblich oder männlich, 18 Jahre oder älter;
2. Histologisch oder zytologisch gesicherte Diagnose von NSCLC;
3. Kann Ergebnisse von Tumorgewebe-Gentests mit einem im Krankenhaus durchgeführten Panel-Kit für die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) für Lungenkrebs erhalten
4. Unterschriebene und datierte Einverständniserklärung.

Ausschlusskriterien:

1. Mit anderen Tumorarten kombinieren
2. Der Prüfer beurteilt die Situation, die sich auf den klinischen Suchprozess und die Ergebnisse auswirken kann.

Geschätzte Einschreibung: 50000 Teilnehmer.

Zielparameter:

Primäre Ergebnismaße:

1. Die Mutationshäufigkeit des seltenen NSCLC-Treibergens und klinisch-pathologische Merkmale bei 50.000 Patienten in der realen Welt;
2. Die Beziehung zwischen seltenen Treibergen-Subtypen und klinisch-pathologischen Merkmalen (Alter, Geschlecht, Raucheranamnese, histologischer Subtyp, klinisches Stadium, Lymphknotenmetastasen, lokale Metastasen, Fernmetastasen, Hirnmetastasen) bei NSCLC-Patienten.

Sekundäre Ergebnismaße:

1. Die Beziehung zwischen seltenen Treibergen-Mutationssubtypen und dem Überleben oder der Prognose der Erkrankung (objektive Ansprechrate (ORR), progressionsfreies Überleben (PFS) und Gesamtüberleben (OS)) bei NSCLC-Patienten.

Forschungsmethode:

1. Pre-entry/screening period (V0)

   1. Screenen Sie die eingeschriebenen Patienten gemäß den Zulassungskriterien. Der Nachweis von Lungenkrebs-PCR-Panel-Kits im Krankenhaus erfordert die Verwendung von Gewebeproben (einschließlich chirurgischem Gewebe, Biopsiegewebe unter interventionellen Bedingungen, Lymphknotenbiopsiegewebe, Gewebe von Metastasen usw.);
   2. Alle aufgenommenen Proben sollten auf die Genmutation (PCR) der Neurotrophic-Tropomyosin Receptor Kinase (NTRK) getestet werden;
   3. Wenn die a)+b)-Ergebnisse zeigen, dass eine seltene Treibergen-Mutation entdeckt wurde, werden die Teilnehmer in den nächsten Schritt einbezogen; wenn die Testergebnisse a)+b) negativ waren, dann wurden 500 Fälle für den Nachweis der nächsten Generationssequenzierung (NGS) in dieser Population ausgewählt und in den nächsten Schritt einbezogen;

2. Basiszeitraum (V1)

   A. Führen Sie eine weitere Klassifizierung von Proben mit positiver Mutation des seltenen Treibergens durch Sanger-Sequenzierung durch und zeichnen Sie die Testergebnisse auf;

3. Nachbeobachtungszeitraum (V2)

   1. Aufzeichnung des therapeutischen Behandlungsschemas der Krankheit und Nachverfolgung des Überlebensstatus der eingeschriebenen Patienten;
   2. Einmal alle 3 Monate (oder je nach klinischem Bedarf) bis zu 60 Monaten oder Tod;
   3. Sammeln Sie Informationen, einschließlich Nachsorgebehandlung, Krankheitsstatus und Überlebensstatus, bildgebende Untersuchungsergebnisse, Laboruntersuchungsergebnisse usw. (Einzelheiten finden Sie im Case Report Form (CRF)-Formular);
   4. Für diejenigen, die weitere molekulare Tests (z. B. primäre Arzneimittelresistenz) benötigen, Multigenanalyse mit der Next-Generation-Sequencing-Methode (NGS);
   5. Verlust der Nachsorge: Wenn der Patient nicht für einen Nachsorgebesuch ins Zentrum zurückkehrt, unternimmt das Zentrum zwei Versuche, telefonisch Kontakt aufzunehmen und die Kontaktdaten aufzubewahren. Wenn der Patient nicht innerhalb von 1 Monat nach dem zweiten Kontakt antwortet, wird davon ausgegangen, dass der Patient das Interview verloren hat.

Materialen und Methoden:

Materialien:

Das Probenmaterial muss humane genomische DNA und aus Tumorgewebeproben extrahierte Gesamt-RNA sein. Vor der Extraktion von DNA und RNA ist es sehr wichtig sicherzustellen, dass sich mindestens 20 % Tumorzellen in den Tumorgewebeproben befinden.

Methoden:

Epidermal Growth Factor Receptor 20 Exon Insertion (EGFR Exon 20-ins) Mutation/Activin Receptor-like Kinase (ALK) Fusion/ROS Proto-Oncogen 1 Rezeptor Tyrosinkinase (ROS1) Fusion/Kirsten Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog (KRAS) Mutation/ Neuroblastom RAS Viral Oncogen Homolog (NRAS) Mutation/B-Raf Proto-Oncogen, Serine/Threonine Kinase (BRAF) Mutation/Phosphatidylinositol-4,5-Bisphosphate 3-Kinase Catalytic Subunit Alpha (PIK3CA) Mutation/RET Proto-Oncogen (RET ) Fusion/Mesenchymal-Epithelial Transition Factor (MET) 14 Exon Skipping/Erb-b2 Rezeptor Tyrosine Kinase 2 (ERBB2) Mutation/ Neurotrophic-Tropomyosin Receptor Kinase (NTRK) Fusionsmutation wurden durch fluorogene quantitative Polymerase-Kettenreaktion bei chinesischem NSCLC nachgewiesen.

1. DNA/RNA-Extraktion:

   Die Gesamt-RNA-Konzentration für den Genfusionsnachweis beträgt 10~100 ng/µL in Formalin-Fixed Paraffin-Embedded (FFPE)-Gewebe oder 2~30 ng/µL in frischem Gewebe.

   Die Menge an extrahierter DNA zum Nachweis von Genmutationen beträgt 1,5 bis 3 ng/µl in FFPE-Gewebe oder 0,5 bis 1 ng/µl in frischem Gewebe.

2. RNA-Umkehrtranskription.

3. Nachweis der Zielveränderungen in RNA und DNA:

   ALK-, ROS1-, RET-, NTRK-Genfusion und MET 14-Exon-Skipping-Mutation wurden in RNA nachgewiesen.

   EGFR 20 Exon-Ins, KRAS, NRAS, BRAF, PIK3CA und ERBB2 Mutationen wurden in der DNA nachgewiesen.

4. Ergebnisinterpretation