Étude observationnelle multicentrique de patients chinois atteints d'un cancer du poumon non à petites cellules (NSCLC) présentant une mutation du gène conducteur rare

Critère d'intégration:

1. Femme ou homme, âgé de 18 ans ou plus；
2. Diagnostic histologiquement ou cytologiquement prouvé de NSCLC；
3. Capable d'obtenir les résultats des tests génétiques des tissus tumoraux par le kit de panel de réaction en chaîne par polymérase (PCR) du cancer du poumon effectué à l'hôpital
4. Consentement éclairé signé et daté.

Critère d'exclusion:

1. Combiner avec un autre type de tumeur
2. L'investigateur juge la situation qui peut affecter le processus et les résultats de la recherche clinique.

Estimation des inscriptions : 50 000 participants.

Mesures des résultats :

Principaux critères de jugement ：

1. La fréquence des mutations du gène conducteur rare du NSCLC et les caractéristiques clinicopathologiques chez 50 000 patients dans le monde réel ;
2. La relation entre les sous-types de gènes conducteurs rares et les caractéristiques clinicopathologiques (âge, sexe, antécédents de tabagisme, sous-type histologique, stade clinique, métastases ganglionnaires, métastases locales, métastases à distance, métastases cérébrales) chez les patients atteints de NSCLC.

Mesures de résultats secondaires :

1. La relation entre les sous-types de mutations du gène conducteur rare et la survie ou le pronostic de la maladie (taux de réponse objectif (ORR), survie sans progression (PFS) et survie globale (OS)) chez les patients atteints de NSCLC.

Méthode de recherche :

1. Période de pré-admission/filtrage (V0)

   1. Dépister les patients inscrits selon les critères d'admission. La détection du kit de panel PCR du cancer du poumon à l'hôpital nécessite l'utilisation d'échantillons de tissus (y compris des tissus chirurgicaux, des tissus de biopsie dans des conditions interventionnelles, des tissus de biopsie de ganglions lymphatiques, des tissus de métastases, etc.);
   2. Tous les échantillons inscrits doivent être testés. Mutation du gène neurotrophique-tropomyosine kinase du récepteur (NTRK) (PCR) ;
   3. Si les résultats a) + b) montrent qu'une mutation rare du gène conducteur a été détectée, les participants seront impliqués dans l'étape suivante ; si a) + b) les résultats des tests étaient négatifs, alors 500 cas ont été sélectionnés pour la détection par séquençage de nouvelle génération (NGS) dans cette population, et ont été impliqués dans l'étape suivante ;

2. Période de référence (V1)

   un. Effectuez une classification plus poussée des échantillons positifs à la mutation du gène conducteur rare par séquençage Sanger et enregistrez les résultats du test ;

3. Période de suivi (V2)

   1. Enregistrer le schéma thérapeutique de la maladie et le suivi de l'état de survie des patients inscrits ;
   2. Une fois tous les 3 mois (ou selon les besoins cliniques) jusqu'à 60 mois ou le décès ;
   3. Recueillir des informations, notamment le traitement de suivi, l'état de la maladie et l'état de survie, les résultats des examens d'imagerie, les résultats des examens de laboratoire, etc. (voir le formulaire de rapport de cas (CRF) pour plus de détails) ;
   4. Pour ceux qui ont besoin de tests moléculaires supplémentaires (tels que la résistance primaire aux médicaments), une analyse multigénique utilisant la méthode de séquençage de nouvelle génération (NGS) ;
   5. Perte de suivi : Si le patient ne revient pas au centre pour une visite de suivi, le centre fera deux tentatives de contact par téléphone et conservera les fiches de contact. Si le patient ne répond pas dans un délai d'un mois après le deuxième contact, le patient est considéré comme ayant perdu l'entretien.

Matériels et méthodes:

Matériaux:

Le matériel d'échantillon doit être de l'ADN génomique humain et de l'ARN total extrait d'échantillons de tissus tumoraux. Avant l'extraction de l'ADN et de l'ARN, il est très important de s'assurer qu'il y a au moins 20 % de cellules tumorales dans les échantillons de tissus tumoraux.

Méthodes :

Mutation de l'insertion d'exon du récepteur du facteur de croissance épidermique 20 (EGFR exon 20-ins)/fusion de l'Activin Receptor-like Kinase (ALK)/ROS proto-oncogene 1 receptor tyrosine kinase (ROS1) fusion/Kirsten Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog (KRAS) mutation/ Neuroblastome Mutation de l'homologue de l'oncogène viral RAS (NRAS)/proto-oncogène B-Raf, mutation de la sérine/thréonine kinase (BRAF)/mutation de la sous-unité catalytique alpha du phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase (PIK3CA)/proto-oncogène RET (RET ) fusion/facteur de transition mésenchymateuse-épithéliale (MET) 14 saut d'exon/mutation Erb-b2 du récepteur tyrosine kinase 2 (ERBB2)/mutation de fusion neurotrophique-récepteur de la tropomyosine kinase (NTRK) ont été détectés par réaction en chaîne de la polymérase quantitative fluorogénique dans le CBNPC chinois.

1. Extraction d'ADN/ARN :

   La concentration totale d'ARN pour la détection de la fusion de gènes est de 10 à 100 ng/µL dans un tissu fixé à la formaline (FFPE) ou de 2 à 30 ng/µL dans un tissu frais.

   La quantité d'ADN extrait pour la détection des mutations géniques est de 1,5 à 3 ng/µL dans le tissu FFPE ou de 0,5 à 1 ng/µL dans le tissu frais.

2. Transcription inverse de l'ARN.

3. Détection des altérations cibles dans l'ARN et l'ADN :

   La fusion des gènes ALK, ROS1, RET, NTRK et la mutation par saut d'exon MET 14 ont été détectées dans l'ARN.

   Les mutations EGFR 20 exon-ins, KRAS, NRAS, BRAF, PIK3CA et ERBB2 ont été détectées dans l'ADN.

4. Interprétation des résultats