中国非小细胞肺癌（NSCLC）罕见驱动基因突变患者的多中心观察研究

纳入标准：

1. 男女不限，年满18周岁；
2. 经组织学或细胞学证实的NSCLC诊断；
3. 在医院进行的肺癌聚合酶链反应（PCR）panel试剂盒能够得到肿瘤组织基因检测结果
4. 签署并注明日期的知情同意书。

排除标准：

1. 合并其他肿瘤类型
2. 研究者判断可能影响临床检索过程和结果的情况。

预计报名人数：50000 人。

结果措施：

主要结局指标：

1. 5万名真实世界NSCLC罕见驱动基因突变频率及临床病理特征；
2. NSCLC患者罕见驱动基因亚型与临床病理特征（年龄、性别、吸烟史、组织学亚型、临床分期、淋巴结转移、局部转移、远处转移、脑转移）的关系。

次要结果指标：

1. NSCLC患者罕见驱动基因突变亚型与疾病生存或预后（客观缓解率（ORR）、无进展生存（PFS）和总生存（OS））的关系。

研究方法：

1. 进入前/筛选期 (V0)

   1. 根据入院标准筛选入组患者。 医院肺癌PCR panel试剂盒检测需要使用组织样本（包括手术组织、介入条件下的活检组织、淋巴结活检组织、转移灶组织等）；
   2. 所有入组样本均需检测神经营养原肌球蛋白受体激酶（NTRK）基因突变（PCR）；
   3. 如果a)+b)结果显示检测到罕见的驱动基因突变，参与者将参与下一步；如果a)+b)检测结果为阴性，则在该人群中选择500例进行下一代测序（NGS）检测，并进入下一步；

2. 基线期（V1）

   A。对罕见驱动基因突变阳性样本进行Sanger测序进一步分类，并记录检测结果；

3. 随访期（V2）

   1. 记录入组患者的疾病治疗方案及生存情况随访；
   2. 每3个月一次（或根据临床需要）长达60个月或死亡；
   3. 收集包括随访治疗、疾病状态、生存状态、影像学检查结果、实验室检查结果等信息（详见病例报告表（CRF）表）；
   4. 对于需要进一步分子检测（如原发性耐药）的，使用下一代测序（NGS）方法进行多基因分析；
   5. 失访：如患者未能回中心复诊，中心将进行两次电话联系，并保留联系记录。 如果患者在第二次接触后 1 个月内没有回应，则视为患者失去访谈。

材料和方法：

材料：

标本材料必须是从肿瘤组织样本中提取的人体基因组DNA和总RNA。 在提取 DNA 和 RNA 之前，确保肿瘤组织样本中至少有 20% 的肿瘤细胞非常重要。

方法：

表皮生长因子受体 20 外显子插入（EGFR 外显子 20-ins）突变/激活素受体样激酶（ALK）融合/ROS 原癌基因 1 受体酪氨酸激酶（ROS1）融合/Kirsten 大鼠肉瘤病毒致癌基因同系物（KRAS）突变/神经母细胞瘤 RAS 病毒癌基因同系物 (NRAS) 突变/B-Raf 原癌基因、丝氨酸/苏氨酸激酶 (BRAF) 突变/磷脂酰肌醇 4,5-二磷酸 3-激酶催化亚基 α (PIK3CA) 突变/RET 原癌基因 (RET ) 融合/间充质-上皮转移因子 (MET) 14 外显子跳跃/Erb-b2 受体酪氨酸激酶 2 (ERBB2) 突变/神经营养原肌球蛋白受体激酶 (NTRK) 融合突变通过荧光定量聚合酶链反应在中国 NSCLC 中检测到。

1. DNA/RNA 提取：

   用于基因融合检测的总 RNA 浓度在福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织中为 10~100 ng/µL，在新鲜组织中为 2~30 ng/µL。

   用于基因突变检测的 DNA 提取量在 FFPE 组织中为 1.5~3 ng/µL，在新鲜组织中为 0.5~1 ng/µL。

2. RNA逆转录。

3. 检测 RNA 和 DNA 中的目标改变：

   在RNA中检测到ALK、ROS1、RET、NTRK基因融合和MET 14外显子跳跃突变。

   在 DNA 中检测到 EGFR 20 外显子、KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA 和 ERBB2 突变。

4. 结果解读