COVID-19 の治療のためのヘスペリジンとジオスミン

研究の背景と根拠 2019 年 12 月末、中国の武漢市の病院で原因不明の肺炎が検出され、初めて WHO の国別事務所に報告されました [1-3]。 数日後、中国政府は、新しい感染性呼吸器疾患の人から人への感染を確認しました[4]。 2020 年 1 月末、WHO は、新型コロナウイルス (SARS-CoV-2) による重症急性呼吸器症候群 (SARS) の発生を国際的な公衆衛生上の緊急事態として宣言しました。 コロナウイルス 19 (COVID-19) と呼ばれるこの病気は、中国から世界中に急速に感染し、その後、WHO は世界的なパンデミック病であると宣言しました。 病原性ウイルスの構造は、一本鎖プラスセンス RNA 組成を持つ (SARS-CoV) 株と密接に関連しています [5]。

このパンデミック病は、全世界、特にエジプトのような人口の多い国にとって非常に重要です。 感染した人々への緊急、継続的、かつ費用対効果の高いヘルスケアの提供に対する重大な必要性があります。 COVID-19 の早期発見と進​​行防止のための戦略は、感染患者にとって大きな違いを生むだけでなく、資源に制約のある国にとって経済的にも有益です。

COVID-19 に感染した人は無症状かもしれませんが、周囲の人への感染源となります。 感染後の最も一般的な臨床症状は、軽度の症状 (全身疲労、乾いた咳、微熱、喉の痛み) から重度の症状 (典型的な重症急性呼吸窮迫症候群 (ARDS) および肺炎) にまで及びます [6]。 COVID-19 患者の治療のために、主に抗ウイルス薬の使用、特定の薬物転用、およびワクチンの製造に多大な科学的研究の努力が注がれていますが、これまで治療のための特定の治療法やワクチンはありません。 新薬の開発は時間のかかるプロセスであるため、薬物の再配置がこのパンデミック感染を制御するための最適なソリューションである可能性があります。

選択された薬剤 ヘスペリジンは、レモンやスイート オレンジなどの柑橘類に含まれる一般的なフラボン配糖体です [7, 8]。 ヘスペリジンには、抗アテローム生成、抗高脂血症、抗糖尿病、静脈緊張、心臓保護、抗炎症、および降圧作用などのいくつかの薬理学的活性があります。 ヘスペリジンの抗炎症活性は、主にその抗酸化防御メカニズムと炎症誘発性サイトカイン産生の抑制に起因していました[7]。 ヘスペリジンは、ウイルスの複製を大幅に減少させることにより、インフルエンザウイルスに対する抗ウイルス活性を示しました。 感染細胞をヘスペリジンで処理すると、インフルエンザウイルスに対する細胞防御メカニズムに不可欠な p38 および JNK 発現の活性化とアップレギュレーションを介して、細胞自律免疫が強化されます [9]。

ヘスペリジンは、漢方薬として古くから使用されてきました。 ヘスペリジンの安全性は、FDA の要求に応じて FASEB (米国実験生物学会連合) によって確認されました。 毒性研究では、経口摂取後のヘスペリジンの高い安全性プロファイルが確認されています。 経口毒性研究の結果は、ヘスペリジンを 2g/kg 以上経口摂取しても有害な副作用がないことを示しています [10]。

Daflon 500 mg は、50 mg のヘスペリジンと 450 mg のジオスミンの微粉化フラボノイド混合物を含む市販の錠剤剤形であり、血管保護静脈緊張剤として使用されます [10]。 このヘスペリジン混合物は、その高い安全性プロファイルが特徴です。 ラットへのヘスペリジン混合物の経口投与を 13 週間および 26 週間継続し、1 日投与量の 35 倍という非常に高用量を使用しても、3 g/kg 体重を超える高い LD50 値で毒性は示されませんでした。 ヘスペリジン混合物で6週間から1年間治療された2850人以上の患者を使用した臨床試験では、毒性の兆候のない正常な血液学的パラメーター、肝臓および腎臓機能が示されました[11]。

COVID 19 の予防と治療におけるヘスペリジンの役割は、最近、Medical Hypotheses ジャーナルで私たちの研究チームによって発表されました [12]。

COVID-19 の細胞侵入に使用される宿主細胞受容体を解明することで、攻撃の可能性のある経路が提供されます。 COVID-19 の細胞侵入は、2 つの連続したステップに依存します。まず、ウイルス スパイク (S タンパク質) が宿主細胞受容体に結合し、続いて細胞プロテアーゼによる S タンパク質のプライミングが行われます。 最近、研究者は、COVID-19 が侵入に ACE-2 受容体を使用し [13]、S タンパク質のプライミングにセリンプロテアーゼ TMPRSS2 を使用することを示しました。 セリンプロテアーゼ阻害薬であるメシル酸カモスタットは、ウイルスの侵入をブロックし、日本で COVID-19 治療薬として使用されました[14]。

COVID-19 は、その特定のスパイク受容体結合ドメイン (RBD) 配列を介して ACE-2 受容体に結合し、SARS-CoV-2-RBD-ACE-2 複合体を形成します。 人間の ACE2 受容体に対する 78 の抗ウイルス薬の提案された計算活動は、相同性モデリングを使用してスクリーニングされました。 この研究は、ヘスペリジンが、SARS-CoV-2 スパイクと ACE2 ヒト受容体の間の結合界面を標的とすることができる唯一の化合物であることを示しました。 仮想スクリーニングに基づいて、ヘスペリジンはACE2とSARS-CoV-2のRBDとの相互作用を妨害し、肺細胞への侵入をブロックする可能性があります[15]。 したがって、ヘスペリジンは、COVID-19 感染に対する有望な予防薬として使用できます。

COVID-19 感染に対する宿主の抗ウイルス反応は、免疫系と細胞の自己防御メカニズムの両方の活性化に依存しています。 免疫は、ウイルス感染に対する宿主の保護において主要な役割を果たします。 免疫過剰反応または免疫不全の発生は、感染した患者の状態が重篤または重篤になる原因となります[16]。 インフルエンザ ウイルスに対するヘスペリジンの抗ウイルス活性には、マイトジェン活性化プロテイン キナーゼ (MAPK) 経路の活性化におけるその役割が関与しています。 MAPK 宿主防御カスケードは、ウイルスの複製、拡散を効率的に抑制し、組織の損傷を最小限に抑えることに貢献します [9]。 最近の研究では、インターフェロン-MAPK 経路が COVID-19 免疫応答において重要な役割を果たしていることが示されました[16]。 したがって、ヘスペリジンは、宿主免疫への活性化により、COVID-19 ウイルスの複製を防ぎ、それによって患者の転帰を改善する進行を防ぎます。

COVID-19 に感染した患者は、いわゆる「サイトカイン ストーム」を示しました。これは、主に炎症反応として始まり、炎症の可溶性マーカーの制御不能な過剰産生をもたらしました。 サイトカインストームがARDS発症の主な原因であることを示す利用可能な証拠。 サイトカインストームには、インターフェロンなどのさまざまな免疫活性分子の放出が含まれます (例: IFNγ)、インターロイキン (例: IL-1β、IL-2、IL-6)、ケモカイン、および腫瘍壊死因子-アルファ (TNF-α) [17]。

高い抗炎症活性を持つヘスペリジンは、IFN-γ や IL-2 などの炎症性サイトカインの分泌を抑制しました [18]。 さらに、ヘスペリジンは、NF κB シグナル伝達カスケードの活性化を阻害することにより、IL 1β 刺激による炎症反応を阻害しました [19]。 また、2 型糖尿病患者における (TNFα や IL-6) などの炎症マーカーの放出を抑制する上でも重要な役割を果たしました [20]。 したがって、COVID-19 に対する重度の炎症反応を制御するための補助療法として使用できます。

COVID-19感染に対する免疫応答に続く凝固経路の活性化は、血栓形成を促進します。 提案されている微小血栓症の形成機序には、凝固促進剤と抗凝固剤の不均衡の発生、血小板の活性化、およびフィブリノゲンからフィブリンへの変換が含まれます。 播種性血管内凝固症候群は、特に重度の感染症例において、多臓器不全の発症の素因となります[21]。

COVID-19入院患者の静脈血栓塞栓症を予防するために、ヘパリン（低分子量、LMWH）の予防投与が推奨されています[21]。 これに関連して、血栓塞栓症に対する保護のためのヘスペリジンおよびジオスミン混合物のヘパリンとの同時投与の役割を強調することが不可欠です。 Daflon 500 mg と LMWH を併用した以前の臨床試験の結果では、肺塞栓症と深部静脈血栓症の発生を予防する上で、LMWH 単独と比較して、この組み合わせの有意な効果が確認されました。 したがって、LMWH と Daflon 500 mg の同時投与は、血栓形成を有意に抑制し、疾患の進行を防ぐことができます [22]。

診断基準 中国のウイルス研究機関は、古典的なコッホの仮説と電子顕微鏡による形態観察を通じて SARS-CoV-2 の予備的同定を行った[1]。 これまでのところ、COVID-19 の黄金の臨床診断方法は、リアルタイム PCR による鼻および喉のスワブサンプリングまたはその他の気道サンプリングにおける核酸検出であり、さらに次世代シーケンシングによって確認されています。 3つのカテゴリー：鼻炎、咽頭炎、または孤立した微熱および筋肉痛を呈する場合の無症候性の上気道感染症（URTI）、および肺炎または気管支炎の症状を呈する場合の下気道感染症（LRTI）[3]。

(ヘスペリジンとジオスミンの混合物、Daflon®) の副作用 すべての薬と同様に、Daflon 500 mg は副作用を引き起こす可能性がありますが、すべての人が副作用を起こすわけではありません。 ありふれた胃腸障害および神経栄養障害（不快感）のいくつかの症例が報告されており、治療を中止する必要はありません。

(ヘスペリジンとジオスミンの混合物、Daflon®) の安全性に関する懸念 Daflon 500 mg 錠剤は、最大 6 か月間経口摂取した場合、ほとんどの人にとって安全である可能性があります。 長期間使用した場合の安全性は不明です。 副作用には、胃の痛みや不調、下痢、頭痛などがあります。

（ヘスペリジンとジオスミンの混合物、Daflon®）の禁忌 報告された禁忌はありません。

(ヘスペリジンとジオスミンの混合物、Daflon®) の相互作用

• セリプロロール: (中程度の薬物間相互作用) ヘスペリジンは、セリプロロールの吸収を低下させる可能性があります。
• ジルチアゼム: (中程度の薬物間相互作用) ヘスペリジンは、ジルチアゼムの吸収を低下させる可能性があります。
• ベラパミル: (中程度の薬物間相互作用) ヘスペリジンは、ベラパミルの吸収を増加させる可能性があります。
• 降圧薬: (中等度の薬物間相互作用) ヘスペリジンは高血圧を下げる可能性があり、血圧が下がりすぎる可能性があります.
• 抗凝固薬 / 抗血小板薬: (中程度の薬物間相互作用) ヘスペリジンは血液凝固を遅らせ、あざや出血の可能性を高める可能性があります。
• 鎮静剤 (ベンゾジアゼピン) (中等度の薬物相互作用) ヘスペリジンは過度の眠気を引き起こす可能性があります。

特別な注意事項と警告:

• 妊娠中および授乳中: ヘスペリジンは、ジオスミンと一緒に経口摂取した場合、妊娠中または授乳中の女性にとっておそらく安全です.
• 出血性疾患：ヘスペリジンは血液凝固を遅らせ、出血のリスクを高める可能性があります. 理論的には、ヘスペリジンは出血性疾患を悪化させる可能性があります。
• 低血圧：ヘスペリジンは血圧を下げる可能性があります。 理論的には、ヘスペリジンを服用すると、すでに血圧が低い人の血圧が低くなりすぎる可能性があります.
• 手術: ヘスペリジンは出血を長引かせる可能性があります。 ヘスペリジンは、手術中および手術後の出血のリスクを高める可能性があるという懸念があります. 予定された手術の少なくとも 2 週間前に、ヘスペリジンの服用を中止してください。

調査目的

この研究提案は、COVID-19 感染患者の治療に適した薬剤または薬剤の組み合わせを提供するための実用的な戦略として採用されました。 この薬は、呼吸器合併症の進行を防ぐのに役立ちます。 これは、次のようなさまざまな目標を通じて達成できます。

1. COVID-19 ウイルスに対する潜在的な活性に応じた、さまざまな薬理学的クラスに関連するさまざまな薬物のスクリーニング。
2. 感染した患者および/または呼吸不全を発症するリスクが高い患者に、費用対効果が高く、実施しやすい治療戦略を提供します。
3. 最後に、この臨床戦略は、多くのお金を節約しながら命を救うことができるエジプト人の健康状態を改善する上で重要な目標であり続けています.

作業範囲 作業範囲は、以下を通じて実施されます。

1. COVID-19 感染者の治療のための新たに転用された薬剤 (ダフロン 500 mg) の使用。
2. 3月13日に発表されたWHO（COVID-19疾患が疑われる場合の重症急性呼吸器感染症（SARI）の臨床管理）に従って設計された臨床試験による、軽度のCOVID-19患者の対症療法に対する薬物の効果の評価2020年。
3. 急性呼吸窮迫症候群 (ARDS) などのサーバー コンパイルの予防に対する薬物の影響を調査します。

エジプトでCovid-19と新たに診断された患者の治療のための（ヘスペリジンとジオスミンの混合物、Daflon®）の無作為化二重盲検並行試験。

研究デザイン この研究は、二重盲検無作為対照並行研究となる 研究集団と方法の設定 この研究は、高等教育省に所属する指定病院で現在承認されている患者に関するものである。 患者は、ダフロンを受けるか、標準治療を受ける対照群に無作為に割り付けられます。 患者 COVID-19 が確認された入院患者は、次の基準に従ってこの研究に含まれます。 -成人（18〜65歳）、男女ともに、入院時の鼻咽頭サンプルでPCR陽性。 さらに、選択基準には、新たに診断された無症候性または鼻炎、咽頭炎、または孤立した微熱および筋肉痛を呈する上気道感染症（URTI）患者が含まれます。

インフォームド コンセント 研究に参加する前に、選択基準を満たす患者は、研究に参加するための書面によるインフォームド コンセントを提供します。 研究の性質と、研究への参加に関連するリスクまたは副作用と利点を明確に示す情報文書が各参加者に渡されます。 この研究は、ヘルシンキ宣言の倫理基準に従って実施されます。 プロトコルは、レビューと承認のために国家倫理委員会に提出されます。 この試験は臨床試験として登録されます。

手順 患者は、登録、初期データ収集、および0日目の治療のためにベースラインで見られます。 フォローアップ期間は28日またはPCR陰性になるまでです。 1日目から毎日、患者は標準化されたケアまたはDaflon 1000 mgを1日3回、10日間受けます。 細菌の重感染を防ぐための対策としての対症療法と抗生物質は、すべての参加者の臨床的判断に基づいて提供されます。 すべての参加者は、ベースライン時および追跡期間後にRT-PCRアッセイのための血液サンプル収集を受け、血清IL1β、TNF-α、hsCRPの変化を評価します。 CBCはリンパ球数のために行われます。 呼吸数とPaO2の変化が評価されます。 さらに、死亡率が計算されます。

アウトカム 一次アウトカム測定値: RT-PCR 陰性 二次アウトカム測定値には、呼吸数と PaO2 の変化、血清 IL1β、TNF-α、hsCRP、リンパ球数、死亡率、および副作用の発生の変化が含まれます。

エジプトでCovid-19と新たに診断された患者の治療のための（ヘスペリジンとジオスミンの混合物、Daflon®）の無作為化二重盲検並行試験。

研究デザイン: 無作為化二重盲検対照並行研究 研究タイプ: 介入臨床試験 登録: 各アームに 50 人の参加者 割り当て: 無作為化 割り当て: 並行介入モデル 説明: ランダムに主張された 2 つの並行グループ マスキング: 二重 (参加者、研究者) 主な目的: 治療または有効性と安全性 推定試験開始日: 2020 年 1 月 7 日 推定一次完了日: 2020 年 7 月 15 日 推定試験完了日: 2020 年 1 月 10 日

実験的:

ダフロン1000mgを1日3回、10日間

アクティブコンパレータ:

隔離病院で​​提供される標準的なケア。 結果

主要な結果の測定:

PCR陰性

二次結果の測定:

呼吸数の変化 患者の PaO2 の変化 血清 IL1β の変化 血清 TNF-α の変化 血清 hsCRP の変化 リンパ球数の CBC 報告された副作用 死亡率

包含基準:

Covid-19 の確定例 (すべて RT-PCR による) 新たに診断された無症候性または上気道感染症 (URTI) の患者で、鼻炎、咽頭炎、または孤立した微熱と筋肉痛を呈する成人 (18 ～ 65 歳) ） 男女

除外基準:

出血性疾患の患者 低血圧から超低血圧の患者 手術後の患者 免疫不全の患者 スクリーニング時に投薬を受けている患者