Hesperidin och Diosmin för behandling av covid-19

Forskningsbakgrund och motivering I slutet av december 2019 upptäcktes lunginflammation av okänt ursprung på sjukhusen i staden Wuhan, Kina, och rapporterades till WHO:s landskontor för första gången [1-3]. Efter några dagar har den kinesiska regeringen bekräftat överföringen från människa till människa av den nya smittsamma luftvägssjukdomen [4]. I slutet av januari 2020 förklarade WHO utbrottet av allvarligt akut respiratoriskt syndrom (SARS), orsakat av ett nytt coronavirus (SARS-CoV-2), som en internationell folkhälsokris. Sjukdomen som kallas coronavirus 19 (COVID-19) överfördes snabbt från Kina till hela världen och därefter förklarade WHO att det var en global pandemisjukdom. Den virulenta virusstrukturen är nära besläktad med (SARS-CoV) stam med en enkelsträngad positiv-sens RNA-komposition[5].

Denna pandemisjukdom är särskilt av stor betydelse för hela världen och särskilt för länder med en tung befolkning som Egypten. Det finns ett kritiskt behov av framväxande, kontinuerlig och kostnadseffektiv hälsovård till infekterade människor. Tidig upptäckt och strategier för att förhindra progression av covid-19 skulle göra stor skillnad för infekterade patienter och skulle också vara ekonomiskt fördelaktigt för ett land med begränsade resurser.

Personer som är smittade med covid-19 kanske inte har några symtom men fungerar ändå som en smittkälla för andra omgivande personer. De vanligaste kliniska manifestationerna efter infektion sträcker sig från milda symtom på (generaliserad trötthet, torrhosta, låggradig feber och halsont) till svåra symtom på (typiskt allvarligt akut andnödsyndrom (ARDS) och lunginflammation)[6]. Även om den enorma vetenskapliga forskningsinsatsen huvudsakligen fokuserar på användningen av antivirala läkemedel, återanvändning av vissa läkemedel och produktion av vaccin för behandling av COVID-19-patienter, finns det hittills inget specifikt botemedel eller vaccin för behandling. Utveckling av nya läkemedel är en tidskrävande process så att ompositionering av läkemedel kan vara den optimala lösningen för att kontrollera denna pandemiska infektion.

Utvalda läkemedel Hesperidin är en vanlig flavonglykosid som finns i citrusfrukter som citroner och söta apelsiner[7, 8]. Hesperidin har flera farmakologiska aktiviteter såsom antiaterogena, antihyperlipidemiska, antidiabetiska, venotoniska, kardioprotektiva, antiinflammatoriska och antihypertensiva effekter. Hesperidins antiinflammatoriska aktivitet tillskrevs främst dess antioxidantförsvarsmekanism och undertryckande av pro-inflammatorisk cytokinproduktion[7]. Hesperidin uppvisade antiviral aktivitet mot influensaviruset genom en signifikant minskning av virusreplikationen. Behandling av infekterade celler med hesperidin förbättrade cellautonom immunitet via aktivering och uppreglering av p38- och JNK-uttryck som är väsentligt för cellförsvarsmekanismer mot influensavirus[9].

Hesperidin har använts som örtmedicin under lång tid. Säkerheten för hesperidin bekräftades av FASEB (Federation of American Societies of Experimental Biology) på begäran av FDA. Toxicitetsstudier har bekräftat den höga säkerhetsprofilen för hesperidin efter oralt intag. Resultat från orala toxicitetsstudier visade frånvaron av negativa biverkningar efter oralt intag av hesperidin på mer än 2g/kg [10].

Daflon 500 mg är en marknadsförd tablettdoseringsform som innehåller en mikroniserad flavonoidblandning av 50 mg hesperidin och 450 mg diosmin som används som kärlskyddande venotoniskt medel[10]. Denna hesperidinblandning kännetecknas av sin höga säkerhetsprofil. Fortsätter oral administrering av hesperidinblandning till råttor i 13 och 26 veckor, med användning av en mycket hög dos på 35 gånger den dagliga dosen visade ingen toxicitet med ett högt LD50-värde på mer än 3 g/kg kroppsvikt. Kliniska prövningar som använde mer än 2850 patienter som behandlats med hesperidinblandningen under en period av 6 veckor till 1 år visade normala hematologiska parametrar, lever- och njurfunktioner utan tecken på toxicitet[11].

Hesperidin roll i förebyggande och behandling av COVID 19 publicerades nyligen av vårt forskarteam i Medical Hypotheses journal [12].

Att lösa upp värdcellulära receptorer som används för cellulärt inträde av COVID-19 kommer att tillhandahålla möjliga linjer för attack. Cellinträde av COVID-19 beror på två på varandra följande steg, först bindning av den virala spiken (S-protein) till värdcellulära receptorer följt av priming av S-protein av cellproteaser. Nyligen visade forskare att COVID-19 använder ACE-2-receptorn för inträde [13] och serinproteaset TMPRSS2 för priming av S-protein. Camostatmesylat, en serinproteashämmare blockerade virusinträde och användes som en covid-19-behandling i Japan[14].

COVID-19 binder till ACE-2-receptorn genom dess specifika Spike-receptor-bindande domän (RBD)-sekvens för att bilda SARS-CoV-2-RBD-ACE-2-komplexet. Den föreslagna beräkningsaktiviteten för 78 antivirala läkemedel mot den humana ACE2-receptorn screenades med användning av homologimodellering. Denna studie visade att hesperidin är den enda föreningen som kan rikta in sig på bindningsgränssnittet mellan SARS-CoV-2 Spike och ACE2 humana receptorer. baserat på virtuell screening, kan hesperidin störa interaktionen av ACE2 med RBD av SARS-CoV-2 och blockerar därmed dess inträde i lungcellerna [15]. Därför kan hesperidin användas som ett lovande profylaktiskt medel mot COVID-19-infektion.

Värdens antivirala svar mot COVID-19-infektion beror på aktiveringen av både immunsystemet och cellulära självförsvarsmekanismer. Immunitet spelar en viktig roll i skyddet av värden mot virusinfektion. Förekomsten av immunöversvar eller immunbrist är ansvarig för att tillståndet hos infekterade patienter blir kritiskt eller allvarligt[16]. Hesperidins antivirala aktivitet mot influensaviruset involverar dess roll i aktiveringen av den mitogenaktiverade proteinkinasvägen (MAPK). MAPK-värdförsvarskaskaden bidrar till att effektivt begränsa viral replikation, spridning och minimera vävnadsskada[9]. En nyligen genomförd studie visade att interferon-MAPK-vägen spelade en viktig roll i covid-19-immunsvaret[16]. Därför hjälper hesperidin genom sin aktivering till värdimmunitet mot COVID-19 viral replikation och därav dess progression som kommer att förbättra patientens resultat.

Patienter infekterade med COVID-19 uppvisade vad som kallas "cytokinstorm" som initierades främst som ett inflammatoriskt svar och resulterade i okontrollerad överproduktion av lösliga markörer för inflammation. Tillgängliga bevis som visar att cytokinstorm är en viktig orsak till utvecklingen av ARDS. Cytokinstorm involverar frisättning av olika immunaktiva molekyler såsom interferoner (t. IFNy), interleukiner (t.ex. IL-1β, IL-2, IL-6), kemokiner och tumörnekrosfaktor-alfa (TNF-α) [17].

Hesperidin med sin höga antiinflammatoriska aktivitet hämmade utsöndringen av pro-inflammatoriska cytokiner som IFN-y och IL-2[18]. Dessutom hämmade hesperidin IL 1β-stimulerade inflammatoriska svar genom att hämma aktiveringen av NF κB-signalkaskaden [19]. Det spelade också en viktig regel för att undertrycka frisättningen av inflammatoriska markörer såsom (TNFα och IL-6) hos patienter med typ 2-diabetes[20]. Därför kan den användas som adjuvant terapi för att kontrollera den allvarliga inflammatoriska reaktionen mot COVID-19.

Aktivering av koagulationsvägar efter immunsvaret på COVID-19-infektion främjar koagelbildning. Den föreslagna mekanismen för bildande av mikrotrombos involverar förekomsten av prokoagulant-antikoagulant obalans, trombocytaktivering och omvandling av fibrinogen till fibrin. Disseminerad intravaskulär koagulation predisponerar för utveckling av multiorgansvikt, särskilt i allvarliga infekterade fall[21].

En profylaktisk dos av heparin (med låg molekylvikt, LMWH) rekommenderas för skydd mot venös tromboembolism hos covid-19-patienter på sjukhus[21]. I detta sammanhang är det viktigt att lyfta fram rollen av samtidig administrering av hesperidin och diosminblandning med heparin för skydd mot tromboembolism. Resultat från tidigare kliniska prövningar som använde Daflon 500 mg med LMWH bekräftade den signifikanta effekten av denna kombination jämfört med enbart LMWH för att förhindra förekomsten av lungemboli och djup ventrombos. Därför kan samtidig administrering av LMWH och Daflon 500 mg signifikant hämma koagelbildning och förhindra sjukdomsprogression [22].

Diagnostiska kriterier Den virala forskningsinstitutionen i Kina har genomfört en preliminär identifiering av SARS-CoV-2 genom de klassiska Kochs postulat och observerat dess morfologi genom elektronmikroskopi[1]. Hittills är den gyllene kliniska diagnosmetoden för COVID-19 nukleinsyradetektering i näs- och svalgprovtagning eller andra luftvägsprovtagningar genom realtids-PCR och bekräftas ytterligare genom nästa generations sekvensering Klinisk klassificering av patienter Patienter kan grupperas i tre kategorier: asymtomatisk, övre luftvägsinfektion (URTI) vid rinit, faryngit eller isolerad låggradig feber och myalgi, och nedre luftvägsinfektioner (LRTI) vid symtom på lunginflammation eller bronkit[3].

Biverkningar av (Hesperidin och Diosmin-blandning, Daflon®) Liksom alla läkemedel kan Daflon 500 mg orsaka biverkningar, men alla användare behöver inte få dem. Vissa fall av vanliga gastrointestinala störningar och neurovegetativa störningar (känsla av obehag) har beskrivits, som inte kräver att behandlingen avbryts.

Säkerhetsproblem för (Hesperidin och Diosmin-blandning, Daflon®) Daflon 500 mg tabletter är MÖJLIGT SÄKER för de flesta när de tas genom munnen i upp till 6 månader. Säkerheten att använda den under en längre tid är okänd. Biverkningar inkluderar magsmärtor och oro, diarré och huvudvärk.

Kontraindikationer för (Hesperidin och Diosmin-blandning, Daflon®) Inga rapporterade kontraindikationer.

Interaktioner av (Hesperidin och Diosmin-blandning, Daflon®) Inga allvarliga läkemedelsinteraktioner, endast måttliga och mindre interaktioner

• Celiprolol: (Måttlig läkemedelsinteraktion) Hesperidin kan minska absorptionen av celiprolol.
• Diltiazem: (Måttlig läkemedelsinteraktion) Hesperidin kan minska absorptionen av diltiazem.
• Verapamil: (Måttlig läkemedelsinteraktion) Hesperidin kan öka absorptionen av verapamil.
• Antihypertensiva läkemedel: (Måttlig läkemedelsinteraktion) Hesperidin kan sänka högt blodtryck kan göra att ditt blodtryck blir för lågt.
• Antikoagulantia/trombocythämmande läkemedel: (Måttlig interaktion mellan läkemedel och läkemedel) Hesperidin kan bromsa blodets koagulering vilket kan öka risken för blåmärken och blödningar.
• Lugnande mediciner (bensodiazepiner) (måttlig läkemedelsinteraktion) Hesperidin kan orsaka för mycket sömnighet.

Särskilda försiktighetsåtgärder och varningar:

• Graviditet och amning: Hesperidin är EVENTUELLT SÄKER för gravida eller ammande kvinnor när det tas genom munnen med diosmin.
• Blödningsrubbning: Hesperidin kan bromsa blodets koagulering och öka risken för blödning. I teorin kan hesperidin göra blödningsrubbningar värre.
• Lågt blodtryck: Hesperidin kan sänka blodtrycket. I teorin kan hesperidin göra att blodtrycket blir för lågt hos personer som redan har lågt blodtryck.
• Kirurgi: Hesperidin kan förlänga blödningen. Det finns oro för att hesperidin kan öka risken för blödning under och efter kirurgiska ingrepp. Sluta ta hesperidin minst 2 veckor före en planerad operation.

Forskningsmål

Detta forskningsförslag användes som en praktisk strategi för att tillhandahålla ett lämpligt läkemedel eller läkemedelskombination för eventuell behandling av COVID-19-infekterade patienter. Detta läkemedel kan hjälpa till att förhindra utvecklingen av respiratoriska komplikationer. Detta kan uppnås genom olika mål som följande:

1. Screening av olika läkemedel relaterade till olika farmakologiska klasser beroende på dess möjliga aktivitet mot COVID-19-virus.
2. Tillhandahålla en kostnadseffektiv och enkel att implementera behandlingsstrategi för infekterade patienter och/eller patienter med hög risk att utveckla andningssvikt.
3. Slutligen är denna kliniska strategi fortfarande ett viktigt mål för att förbättra det egyptiska hälsotillståndet som kan rädda deras liv och samtidigt spara mycket pengar.

Arbetets omfattning Arbetets omfattning kommer att genomföras genom

1. Användning av nyligen återanvänt läkemedel (Daflon 500 mg) för behandling av covid-19-infekterade personer.
2. Utvärdering av läkemedlets effekt på symptomatisk behandling av milda covid-19-patienter genom en klinisk prövning utformad enligt WHO (Clinical management of severe acute respiratory infektion (SARI) vid misstanke om covid-19-sjukdom) interimsriktlinjer publicerade den 13 mars 2020.
3. Undersöker läkemedlets inverkan på förebyggandet av flera sammanställningar som Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS).

Randomiserad dubbelblind kontrollerad parallellstudie av (Hesperidin och Diosmin-blandning, Daflon®) för behandling av Covid-19 nydiagnostiserade patienter i Egypten.

Studiedesign Denna studie kommer att vara en dubbelblind randomiserad kontrollerad parallell studie. Studiepopulation och metodinställning Denna studie kommer att vara på patienter som för närvarande beviljas vid utsedda sjukhus anslutna till ministeriet för högre utbildning. Patienter kommer att randomiseras till att antingen få Daflon kontra kontrollgrupp som kommer att få standardvård. Patienter Inlagda patienter med bekräftad covid-19 kommer att inkluderas i denna studie enligt följande kriterier; Vuxen (18-65 år), båda könen, PCR-positiv i nasofarynxprov vid inläggning. Dessutom kommer inklusionskriterier att involvera nyligen diagnostiserade asymtomatiska eller med övre luftvägsinfektion (URTI) patienter som kommer att uppvisa rinit, faryngit eller isolerad låggradig feber och myalgi.

Informerat samtycke Innan de inkluderas i studien kommer patienter som uppfyller inklusionskriterierna att ge sitt skriftliga informerade samtycke till att delta i studien. Ett informationsdokument som tydligt anger studiens natur och riskerna eller biverkningarna och fördelarna med deltagandet i studien kommer att ges till varje deltagare. Studien kommer att genomföras i enlighet med Helsingforsdeklarationens etiska standarder. Protokollet kommer att överlämnas till den nationella etiska kommittén för granskning och godkännande. Denna prövning kommer att registreras som klinisk prövning.

Procedur Patienter kommer att ses vid baslinjen för inskrivning, initial datainsamling och behandling på dag 0. Uppföljningstiden kommer att vara 28 dagar eller tills PCR-negativ. Från och med dag 1, varje dag, kommer patienterna att få standardiserad vård eller Daflon 1000 mg, tre gånger dagligen i 10 dagar. Symtomatisk behandling och antibiotika som en åtgärd för att förhindra bakteriell superinfektion kommer att tillhandahållas baserat på klinisk bedömning för alla deltagare. Alla deltagare kommer att skickas till blodprovtagning vid baslinjen och efter uppföljningsperioden för RT-PCR-analys och för att utvärdera förändringen i serum IL1β, TNF-α, hsCRP. CBC kommer att göras för lymfocyträkning. Förändringar i andningsfrekvens och PaO2 kommer att bedömas. Dessutom kommer dödligheten att beräknas.

Utfall Primära utfallsmått: är RT-PCR negativ Sekundära utfallsmått inkluderar: förändringar i andningsfrekvens och PaO2, förändring i serum IL1β, TNF-α, hsCRP, antal lymfocyter, dödlighet och förekomst av biverkningar.

Randomiserad dubbelblind kontrollerad parallellstudie av (Hesperidin och Diosmin-blandning, Daflon®) för behandling av Covid-19 nydiagnostiserade patienter i Egypten.

Studiedesign: Randomiserad dubbelblind kontrollerad Parallellstudie Studietyp: Interventionell klinisk prövning Registrering: 50 deltagare i varje arm Tilldelning: Randomiserat uppdrag: Parallell interventionsmodell Beskrivning: Två parallella grupper slumpmässigt hävda Maskering: Dubbel (deltagare, utredare) Primärt syfte: Behandling eller effekt plus säkerhet Beräknat studiestartdatum: 01/07/2020 Beräknat primärt slutdatum: 15/07/2020 Beräknat studiens slutdatum: 2020/01/10 Arms

Experimentell:

1000mg Daflon tre gånger dagligen i 10 dagar

Aktiv komparator:

Standardvård levereras på isoleringssjukhusen. Resultat

Primära resultatmått:

PCR negativ

Sekundära resultatmått:

Förändringar i andningsfrekvens Förändring hos patienter PaO2 Förändring i serum IL1β Förändring i serum TNF-α Förändring av serum hsCRP CBC för lymfocytantal Rapporterade biverkningar Dödlighetsfrekvens

Inklusionskriterier:

Bekräftade fall av Covid-19 (alla genom RT-PCR) Nydiagnostiserade asymtomatiska eller med övre luftvägsinfektion (URTI) patienter som kommer att uppvisa rinit, faryngit eller isolerad låggradig feber och myalgi, vuxen (18-65 år gammal) ) Båda könen

Exklusions kriterier:

Patienter med blödningsrubbningar Patienter med lågt till mycket lågt blodtryck Patienter efter operation Immunförsvagade patienter som tar medicin vid screening