COVID-19 치료를 위한 헤스페리딘 및 디오스민

연구 배경 및 근거 2019년 12월 말 중국 우한시의 병원에서 원인 불명의 폐렴이 검출되어 WHO 국가사무소에 처음으로 보고되었다[1-3]. 며칠 후 중국 정부는 신종 감염성 호흡기 질환의 사람 간 전염을 확인했다[4]. 2020년 1월 말 세계보건기구(WHO)는 신종 코로나바이러스(SARS-CoV-2)로 인한 중증급성호흡기증후군(SARS) 발병에 대해 국제 공중보건 비상사태를 선포했습니다. 코로나바이러스 19(COVID-19)라는 질병은 중국에서 전 세계로 빠르게 전파되었으며 이후 WHO는 이를 세계적인 유행병으로 선언했습니다. 악성 바이러스 구조는 단일 가닥 포지티브 센스 RNA 구성을 가진 (SARS-CoV) 변종과 밀접하게 관련되어 있습니다[5].

이 대유행병은 특히 전 세계적으로 특히 이집트와 같이 인구가 많은 국가에서 매우 중요합니다. 감염된 사람들에게 긴급하고 지속적이며 비용 효율적인 의료 서비스 제공이 절실히 필요합니다. COVID-19의 진행을 예방하기 위한 조기 발견 및 전략은 감염된 환자에게 큰 변화를 가져올 것이며 자원이 제한된 국가에 경제적으로도 도움이 될 것입니다.

COVID-19에 감염된 사람은 증상이 없을 수 있지만 여전히 주변 사람들에게 감염원 역할을 합니다. 감염 후 가장 흔한 임상 증상은 가벼운 증상(전신 피로, 마른 기침, 미열, 인후통)에서 심각한 증상(전형적인 중증 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS) 및 폐렴)까지 다양합니다[6]. 엄청난 과학적 연구 노력이 항바이러스 약물의 사용, 특정 약물 용도 변경 및 COVID-19 환자 치료를 위한 백신 생산에 주로 초점을 맞추고 있지만 지금까지 치료를 위한 특정 치료법이나 백신은 없습니다. 신약 개발은 시간이 많이 걸리는 과정이므로 약물 재창출이 이 대유행 감염을 통제하는 최적의 솔루션이 될 수 있습니다.

선별된 약물 헤스페리딘은 레몬 및 스위트 오렌지와 같은 감귤류 과일에서 발견되는 일반적인 플라본 배당체입니다[7, 8]. 헤스페리딘은 항동맥경화, 항고지혈증, 항당뇨병, 혈관조영, 심장보호, 항염증, 항고혈압 작용과 같은 몇 가지 약리학적 활성을 갖는다. 헤스페리딘의 항염증 활성은 주로 항산화 방어 메커니즘과 전염증성 사이토카인 생성 억제에 기인합니다[7]. 헤스페리딘은 바이러스 복제의 현저한 감소를 통해 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 활성을 나타냈다. 감염된 세포를 헤스페리딘으로 처리하면 인플루엔자 바이러스에 대한 세포 방어 메커니즘에 필수적인 p38 및 JNK 발현의 활성화 및 상향 조절을 통해 세포 자율 면역이 강화되었습니다[9].

헤스페리딘은 오랫동안 한약재로 사용되어 왔습니다. FDA의 요청에 따라 FASEB(Federation of American Societies of Experimental Biology)에서 헤스페리딘의 안전성을 확인했습니다. 독성 연구는 경구 섭취 후 헤스페리딘의 높은 안전성 프로필을 확인했습니다. 경구 독성 연구 결과 2g/kg 이상의 경구 헤스페리딘 섭취 후 부작용이 없는 것으로 나타났습니다[10].

Daflon 500mg은 혈관 보호 정맥 주사제로 사용되는 50mg의 헤스페리딘과 450mg의 디오스민의 미분화된 플라보노이드 혼합물을 함유하는 시판되는 정제 제형입니다[10]. 이 헤스페리딘 혼합물은 높은 안전성 프로파일을 특징으로 합니다. 쥐에게 13주와 26주 동안 헤스페리딘 혼합물을 지속적으로 경구 투여한 결과 일일 투여량의 35배에 달하는 매우 높은 투여량을 사용하여 3g/kg 체중 이상의 높은 LD50 값으로 독성이 나타나지 않았습니다. 6주에서 1년 동안 헤스페리딘 혼합물로 치료받은 2,850명 이상의 환자를 대상으로 한 임상 시험에서 독성 징후 없이 정상적인 혈액학적 매개변수, 간 및 신장 기능이 나타났습니다[11].

COVID 19의 예방 및 치료에서 헤스페리딘의 역할은 최근 Medical Hypotheses 저널[12]에 우리 연구팀에 의해 발표되었습니다.

COVID-19의 세포 진입에 사용되는 숙주 세포 수용체를 풀면 가능한 공격 경로가 제공됩니다. COVID-19의 세포 진입은 두 가지 연속 단계에 따라 달라집니다. 첫 번째는 바이러스 스파이크(S-단백질)가 숙주 세포 수용체에 결합한 다음 세포 프로테아제에 의한 S-단백질 프라이밍입니다. 최근 연구자들은 COVID-19가 진입에 ACE-2 수용체를 사용하고[13] S-단백질 프라이밍에 세린 프로테아제 TMPRSS2를 사용한다는 것을 보여주었습니다. 세린 프로테아제 억제제 약물인 Camostat mesylate는 바이러스 유입을 차단하고 일본에서 COVID-19 치료제로 사용되었습니다[14].

COVID-19는 특정 스파이크-수용체 결합 도메인(RBD) 서열을 통해 ACE-2 수용체에 결합하여 SARS-CoV-2-RBD-ACE-2 복합체를 형성합니다. 인간 ACE2 수용체에 대한 78가지 항바이러스 약물의 제안된 계산 활동은 상동성 모델링을 사용하여 스크리닝되었습니다. 이 연구는 헤스페리딘이 SARS-CoV-2 스파이크와 ACE2 인간 수용체 사이의 결합 인터페이스를 표적으로 할 수 있는 유일한 화합물임을 보여주었습니다. 가상 스크리닝을 기반으로 헤스페리딘은 SARS-CoV-2의 RBD와 ACE2의 상호 작용을 방해하여 폐 세포로의 진입을 차단할 수 있습니다[15]. 따라서 헤스페리딘은 COVID-19 감염에 대한 유망한 예방제로 사용될 수 있습니다.

COVID-19 감염에 대한 숙주 항바이러스 반응은 면역 체계와 세포 자기 방어 메커니즘의 활성화에 따라 달라집니다. 면역은 바이러스 감염으로부터 숙주를 보호하는 데 중요한 역할을 합니다. 면역 과잉 반응 또는 면역 결핍의 발생은 감염된 환자의 상태가 심각하거나 심각해지는 원인이 됩니다[16]. 인플루엔자 바이러스에 대한 헤스페리딘의 항바이러스 활성은 MAPK(mitogen-activated protein kinase) 경로의 활성화에서의 역할과 관련이 있습니다. MAPK 숙주 방어 캐스케이드는 바이러스 복제, 확산을 효율적으로 억제하고 조직 손상을 최소화하는 데 기여합니다[9]. 최근 연구에 따르면 인터페론-MAPK 경로가 COVID-19 면역 반응에 중요한 역할을 하는 것으로 나타났습니다[16]. 따라서 헤스페리딘은 숙주 면역에 대한 활성화를 통해 COVID-19 바이러스 복제에 대한 도움을 주고 따라서 환자 결과를 개선할 진행에 도움이 됩니다.

COVID-19에 감염된 환자는 주로 염증 반응으로 시작된 "사이토카인 폭풍(cytokine storm)"을 나타냈고, 그 결과 가용성 염증 표지자의 제어되지 않은 과잉 생성이 발생했습니다. 사이토카인 폭풍이 ARDS 발생의 주요 원인이라는 증거가 있습니다. 사이토카인 폭풍은 인터페론(예: IFNγ), 인터루킨(예: IL-1β, IL-2, IL-6), 케모카인 및 종양 괴사 인자-알파(TNF-α)[17].

항염증 활성이 높은 헤스페리딘은 IFN-γ 및 IL-2와 같은 전염증성 사이토카인의 분비를 억제합니다[18]. 게다가, 헤스페리딘은 NF κB 신호 캐스케이드의 활성화를 억제함으로써 IL 1β 자극 염증 반응을 억제했습니다[19]. 또한 제2형 당뇨병 환자에서 (TNFα 및 IL-6)와 같은 염증 표지자의 방출을 억제하는 데 중요한 역할을 했습니다[20]. 따라서 COVID-19에 대한 심각한 염증 반응을 조절하기 위한 보조 요법으로 사용할 수 있습니다.

COVID-19 감염에 대한 면역 반응에 따른 응고 경로의 활성화는 응고 형성을 촉진합니다. 제안된 미세 혈전증 형성 기전은 응고촉진제-항응고제 불균형, 혈소판 활성화 및 피브리노겐의 피브린으로의 전환을 포함합니다. 파종성 혈관내 응고는 특히 중증 감염 사례에서 다기관 부전이 발생하기 쉽습니다[21].

COVID-19 입원 환자의 정맥 혈전색전증을 예방하기 위해 헤파린(저분자량, LMWH)의 예방 용량이 권장됩니다[21]. 이러한 맥락에서 혈전색전증에 대한 보호를 위해 헤파린과 함께 헤스페리딘 및 디오스민 혼합물의 병용 투여의 역할을 강조하는 것이 필수적입니다. Daflon 500 mg을 LMWH와 함께 사용한 이전 임상 시험 결과는 폐색전증 및 심부 정맥 혈전증의 발생을 예방하는 데 있어서 LMWH 단독에 비해 이 조합의 상당한 효과를 확인했습니다. 따라서 LMWH와 Daflon 500mg의 병용투여는 혈전 형성을 상당히 억제하고 질병 진행을 예방할 수 있다[22].

진단 기준 중국의 바이러스 연구 기관은 고전적인 Koch의 가정을 통해 SARS-CoV-2의 예비 식별을 수행하고 전자 현미경을 통해 형태를 관찰했습니다[1]. 지금까지 COVID-19의 황금 임상 진단 방법은 비강 및 인후 면봉 샘플링 또는 기타 호흡기 샘플링에서 real-time PCR에 의한 핵산 검출이며 차세대 시퀀싱으로 추가로 확인됩니다. 환자의 임상 분류는 환자를 다음과 같이 그룹화할 수 있습니다. 세 가지 범주: 무증상, 비염, 인두염 또는 고립된 미열 및 근육통을 나타내는 경우의 상기도 감염(URTI) 및 폐렴 또는 기관지염의 증상을 나타내는 경우의 하부 호흡기 감염(LRTI)[3].

(Hesperidin과 Diosmin 혼합물, Daflon®)의 부작용 일반적인 위장 장애 및 신경생장 장애(불쾌감)의 일부 사례가 기술되었으며, 치료 중단이 필요하지 않습니다.

(헤스페리딘 및 디오스민 혼합물, Daflon®) Daflon 500mg 정제의 안전 문제는 최대 6개월 동안 입으로 복용할 때 대부분의 사람들에게 POSSIBLY SAFE입니다. 장기간 사용의 안전성은 알려져 있지 않습니다. 부작용으로는 복통과 배탈, 설사, 두통 등이 있습니다.

(헤스페리딘 및 디오스민 혼합물, Daflon®)의 금기 보고된 금기 사항 없음.

(Hesperidin과 Diosmin 혼합물, Daflon®)의 상호작용

• 셀리프롤롤: (중등도의 약물 상호작용) 헤스페리딘은 셀리프롤롤의 흡수를 감소시킬 수 있습니다.
• 딜티아젬: (중등도의 약물 상호작용) 헤스페리딘은 딜티아젬의 흡수를 감소시킬 수 있습니다.
• 베라파밀: (중간 정도의 약물-약물 상호작용) 헤스페리딘은 베라파밀의 흡수를 증가시킬 수 있습니다.
• 항고혈압제: (중등도의 약물 간 상호 작용) 헤스페리딘은 고혈압을 낮출 수 있으며 혈압이 너무 낮아질 수 있습니다.
• 항응고제/항혈소판제: (중등도의 약물 간 상호 작용) 헤스페리딘은 혈액 응고를 늦추어 멍과 출혈의 가능성을 높일 수 있습니다.
• 진정제(벤조디아제핀)(중간 정도의 약물 간 상호 작용) 헤스페리딘은 너무 많은 졸음을 유발할 수 있습니다.

특별 예방 조치 및 경고:

• 임신 및 모유 수유: 헤스페리딘은 디오스민과 함께 입으로 복용할 때 임산부 또는 모유 수유 여성에게 POSSIBLY SAFE입니다.
• 출혈 장애: 헤스페리딘은 혈액 응고를 늦추고 출혈 위험을 증가시킬 수 있습니다. 이론적으로 헤스페리딘은 출혈 장애를 악화시킬 수 있습니다.
• 저혈압: 헤스페리딘은 혈압을 낮출 수 있습니다. 이론적으로 헤스페리딘을 복용하면 이미 저혈압이 있는 사람의 혈압이 너무 낮아질 수 있습니다.
• 수술: 헤스페리딘은 출혈을 연장시킬 수 있습니다. 헤스페리딘이 수술 중 및 수술 후 출혈 위험을 증가시킬 수 있다는 우려가 있습니다. 예정된 수술 최소 2주 전에 헤스페리딘 복용을 중단하십시오.

연구 목표

이 연구 제안은 COVID-19 감염 환자의 가능한 치료를 위해 적절한 약물 또는 약물 조합을 제공하기 위한 실용적인 전략으로 채택되었습니다. 이 약물은 호흡기 합병증의 진행을 예방하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이는 다음과 같은 다양한 목표를 통해 달성할 수 있습니다.

1. COVID-19 바이러스에 대한 가능한 활동에 따라 다양한 약리학적 등급과 관련된 다양한 약물을 스크리닝합니다.
2. 감염된 환자 및/또는 호흡 부전 발병 위험이 높은 환자에게 비용 효율적이고 구현하기 쉬운 치료 전략을 제공합니다.
3. 마지막으로, 이 임상 전략은 많은 돈을 절약하는 동시에 생명을 구할 수 있는 이집트 건강 상태를 개선하는 중요한 목표로 남아 있습니다.

작업 범위 작업 범위는 다음을 통해 수행됩니다.

1. COVID-19 감염자 치료를 위해 새로 용도가 변경된 약물(Daflon 500mg) 사용.
2. 3월 13일에 발표된 WHO(COVID-19 질병이 의심되는 경우 임상 관리의 중증 급성 호흡기 감염(SARI)) 임시 지침에 따라 설계된 임상 시험을 통해 경증 COVID-19 환자의 증상 치료에 대한 약물의 효과 평가 2020.
3. 급성호흡곤란증후군(ARDS)과 같은 중증 합병증 예방에 대한 약물의 영향을 조사합니다.

이집트에서 Covid-19로 새로 진단된 환자의 치료를 위한 (헤스페리딘 및 디오스민 혼합물, Daflon®)의 무작위 이중 맹검 통제 병렬 연구.

연구 설계 이 연구는 이중 맹검 무작위 통제 병렬 연구가 될 것입니다. 연구 모집단 및 방법 설정 이 연구는 고등 교육부 산하 지정 병원에서 현재 허가를 받고 있는 환자에 대한 것입니다. 환자는 Daflon을 받을 대 표준 치료를 받을 대조군으로 무작위 배정됩니다. 환자 COVID-19가 확인된 입원 환자는 다음 기준에 따라 이 연구에 포함됩니다. 성인(18-65세), 남녀 모두, 입원 시 비인두 샘플에서 PCR 양성. 또한, 포함 기준에는 비염, 인두염 또는 고립된 미열 및 근육통을 나타낼 새로 진단된 무증상 또는 상기도 감염(URTI) 환자가 포함될 것입니다.

정보에 입각한 동의 연구에 포함되기 전에 포함 기준을 충족하는 환자는 연구 참여에 대한 서면 동의를 제공합니다. 연구의 성격과 연구 참여와 관련된 위험 또는 부작용 및 이점을 명확하게 나타내는 정보 문서가 각 참가자에게 제공됩니다. 이 연구는 헬싱키 선언의 윤리 기준에 따라 수행됩니다. 프로토콜은 검토 및 승인을 위해 국가 윤리 위원회에 제출됩니다. 이 임상시험은 임상시험으로 등록됩니다.

절차 환자는 0일에 등록, 초기 데이터 수집 및 치료를 위해 기준선에서 보게 됩니다. 후속 조치 기간은 28일 또는 PCR 음성이 될 때까지입니다. 환자는 1일째부터 매일 표준화된 치료 또는 Daflon 1000 mg을 10일 동안 매일 세 번 받게 됩니다. 임상적 판단에 따라 모든 참가자에게 세균 중복 감염을 예방하기 위한 대증적 치료 및 항생제가 제공됩니다. 모든 참가자는 RT-PCR 분석 및 혈청 IL1β, TNF-α, hsCRP의 변화를 평가하기 위해 기준선 및 추적 기간 후에 혈액 샘플 수집에 제출됩니다. CBC는 림프구 수를 측정하기 위해 수행됩니다. 호흡률과 PaO2의 변화를 평가합니다. 또한 사망률이 계산됩니다.

결과 1차 결과 측정: RT-PCR 음성임 2차 결과 측정에는 호흡률 및 PaO2의 변화, 혈청 IL1β, TNF-α, hsCRP의 변화, 림프구 수, 사망률 및 부작용 발생이 포함됩니다.

이집트에서 Covid-19로 새로 진단된 환자의 치료를 위한 (헤스페리딘 및 디오스민 혼합물, Daflon®)의 무작위 이중 맹검 통제 병렬 연구.

연구 설계: 무작위 이중 맹검 통제 병렬 연구 연구 유형: 중재적 임상 시험 등록: 각 부문에 참가자 50명 할당: 무작위 할당: 병렬 중재 모델 설명: 무작위로 주장된 두 개의 병렬 그룹 마스킹: 이중(참가자, 조사자) 1차 목적: 치료 또는 효능 + 안전성 예상 연구 시작일: 01/07/2020 예상 1차 완료일: 15/07/2020 예상 연구 완료일: 01/10/2020 Arms

실험적:

Daflon 1000mg을 10일 동안 매일 세 번

활성 비교기:

격리된 병원에서 제공되는 표준 치료. 결과

주요 결과 측정:

PCR 음성

2차 결과 측정:

호흡수 변화 환자의 변화 PaO2 혈청 IL1β 변화 혈청 TNF-α 변화 혈청 hsCRP 변화 림프구 수에 대한 CBC 보고된 부작용 사망률

포함 기준:

코로나19 확진자(전부 RT-PCR) 신규 무증상 또는 비염, 인두염, 고립성 미열 및 근육통을 동반할 상기도감염(URTI) 환자, 성인(18~65세) ) 양성

제외 기준:

출혈성 질환 환자 저혈압 내지 초저혈압 환자 수술 후 환자 스크리닝 시 약물을 복용하는 면역 저하 환자