Гесперидин и диосмин для лечения COVID-19

Предыстория и обоснование исследования В конце декабря 2019 г. в больницах города Ухань, Китай, была выявлена ​​пневмония неизвестного генеза, о которой впервые сообщили в страновой офис ВОЗ [1-3]. Через несколько дней правительство Китая подтвердило передачу нового инфекционного респираторного заболевания от человека к человеку [4]. В конце января 2020 года ВОЗ объявила вспышку тяжелого острого респираторного синдрома (ТОРС), вызванного новым коронавирусом (SARS-CoV-2), международной чрезвычайной ситуацией в области общественного здравоохранения. Болезнь, названная коронавирусом 19 (COVID-19), быстро распространилась из Китая по всему миру, и впоследствии ВОЗ объявила ее глобальной пандемией. Структура вирулентного вируса тесно связана со штаммом (SARS-CoV) с одноцепочечной композицией РНК с положительным смыслом [5].

Это пандемическое заболевание имеет особое значение для всего мира и особенно для стран с большим населением, таких как Египет. Существует острая потребность в неотложной, непрерывной и экономически эффективной медицинской помощи инфицированным людям. Раннее выявление и стратегии предотвращения прогрессирования COVID-19 будут иметь большое значение для инфицированных пациентов, а также будут экономически выгодны для страны с ограниченными ресурсами.

Люди, инфицированные COVID-19, могут не иметь симптомов, но тем не менее выступать в качестве источника инфекции для окружающих. Наиболее распространенные клинические проявления после инфекции варьируют от легких симптомов (общая усталость, сухой кашель, субфебрильная температура и боль в горле) до тяжелых симптомов (типичный тяжелый острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС) и пневмония) [6]. Хотя огромные научные исследования сосредоточены в основном на использовании противовирусных препаратов, перепрофилировании некоторых лекарств и производстве вакцин для лечения пациентов с COVID-19, до сих пор не существует конкретного лекарства или вакцины для лечения. Разработка новых лекарств — это трудоемкий процесс, поэтому изменение позиции лекарств может быть оптимальным решением для борьбы с этой пандемической инфекцией.

Отдельные лекарственные средства Гесперидин — распространенный флавоновый гликозид, содержащийся в цитрусовых, таких как лимоны и сладкие апельсины [7, 8]. Гесперидин обладает несколькими фармакологическими активностями, такими как антиатерогенное, антигиперлипидемическое, антидиабетическое, венотонизирующее, кардиопротекторное, противовоспалительное и антигипертензивное действия. Противовоспалительная активность гесперидина в основном связана с его механизмом антиоксидантной защиты и подавлением продукции провоспалительных цитокинов [7]. Гесперидин проявлял противовирусную активность в отношении вируса гриппа за счет значительного снижения репликации вируса. Обработка инфицированных клеток гесперидином усиливала клеточно-автономный иммунитет за счет активации и усиления экспрессии p38 и JNK, что необходимо для механизмов защиты клеток от вируса гриппа [9].

Гесперидин давно используется в качестве растительного лекарственного средства. Безопасность гесперидина была подтверждена FASEB (Федерация американских обществ экспериментальной биологии) по запросу FDA. Исследования токсичности подтвердили высокий профиль безопасности гесперидина при пероральном приеме. Результаты исследований пероральной токсичности показали отсутствие неблагоприятных побочных эффектов после перорального приема гесперидина в дозе более 2 г/кг [10].

Дафлон 500 мг представляет собой продаваемую таблетированную лекарственную форму, содержащую микронизированную смесь флавоноидов, состоящую из 50 мг гесперидина и 450 мг диосмина, которая используется в качестве вазопротекторного венотонизирующего средства [10]. Эта смесь гесперидинов характеризуется высоким профилем безопасности. Продолжающееся пероральное введение смеси гесперидинов крысам в течение 13 и 26 недель с использованием очень высокой дозы, в 35 раз превышающей суточную дозу, не показало токсичности с высоким значением LD50 более 3 г/кг массы тела. Клинические испытания с участием более 2850 пациентов, получавших смесь гесперидинов в течение периода от 6 недель до 1 года, показали нормальные гематологические показатели, функции печени и почек без признаков токсичности [11].

Роль гесперидина в профилактике и лечении COVID-19 была недавно опубликована нашей исследовательской группой в журнале Medical Hypotheses [12].

Распутывание клеточных рецепторов хозяина, используемых для проникновения COVID-19 в клетки, обеспечит возможные пути для атаки. Проникновение COVID-19 в клетку зависит от двух последовательных этапов: сначала связывания вирусного шипа (S-белка) с клеточными рецепторами хозяина, за которым следует примирование S-белка клеточными протеазами. Недавно исследователи показали, что COVID-19 использует рецептор ACE-2 для входа [13] и сериновую протеазу TMPRSS2 для праймирования S-белка. Камостат мезилат, препарат-ингибитор сериновой протеазы, блокировал проникновение вируса и использовался для лечения COVID-19 в Японии [14].

COVID-19 связывается с рецептором ACE-2 через свою специфическую последовательность домена связывания Spike-рецептора (RBD), образуя комплекс SARS-CoV-2-RBD-ACE-2. Предложенная вычислительная активность 78 противовирусных препаратов против человеческого рецептора ACE2 была проверена с использованием моделирования гомологии. Это исследование показало, что гесперидин является единственным соединением, которое может воздействовать на интерфейс связывания между человеческими рецепторами SARS-CoV-2 Spike и ACE2. на основе виртуального скрининга гесперидин может нарушать взаимодействие ACE2 с RBD SARS-CoV-2, тем самым блокируя его проникновение в клетки легких [15]. Таким образом, гесперидин может быть использован в качестве перспективного профилактического средства против инфекции COVID-19.

Противовирусные ответы хозяина на инфекцию COVID-19 зависят от активации как иммунной системы, так и механизмов клеточной самозащиты. Иммунитет играет важную роль в защите хозяина от вирусной инфекции. Возникновение чрезмерного иммунного ответа или иммунного дефицита является причиной того, что состояние инфицированных пациентов становится критическим или тяжелым [16]. Противовирусная активность гесперидина в отношении вируса гриппа связана с его ролью в активации пути митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK). Каскад защиты хозяина MAPK способствует эффективному сдерживанию репликации вируса, его распространению и минимизации повреждения тканей [9]. Недавнее исследование показало, что путь интерферон-MAPK играет важную роль в иммунном ответе на COVID-19 [16]. Таким образом, гесперидин, активируя иммунитет хозяина, помогает против репликации вируса COVID-19 и, следовательно, его прогрессирования, что улучшит исход для пациента.

У пациентов, инфицированных COVID-19, наблюдался так называемый «цитокиновый шторм», который начинался главным образом как воспалительная реакция и приводил к неконтролируемому перепроизводству растворимых маркеров воспаления. Имеющиеся данные показывают, что цитокиновый шторм является основной причиной развития ОРДС. Цитокиновый шторм включает высвобождение различных иммуноактивных молекул, таких как интерфероны (например, IFNγ), интерлейкины (например, IL-1β, IL-2, IL-6), хемокины и фактор некроза опухоли-альфа (TNF-α) [17].

Гесперидин с его высокой противовоспалительной активностью ингибировал секрецию провоспалительных цитокинов, таких как IFN-γ и IL-2 [18]. Кроме того, гесперидин ингибировал стимулированные IL-1β воспалительные реакции, ингибируя активацию сигнального каскада NF-kB [19]. Он также сыграл важную роль в подавлении высвобождения воспалительных маркеров, таких как (TNFα и IL-6), у пациентов с диабетом 2 типа [20]. Следовательно, его можно использовать в качестве адъювантной терапии для контроля тяжелой воспалительной реакции на COVID-19.

Активация путей свертывания после иммунного ответа на инфекцию COVID-19 способствует образованию тромбов. Предполагаемый механизм образования микротромбоза включает возникновение прокоагулянтно-антикоагулянтного дисбаланса, активацию тромбоцитов и превращение фибриногена в фибрин. Диссеминированное внутрисосудистое свертывание предрасполагает к развитию полиорганной недостаточности, особенно в тяжелых случаях инфицирования [21].

Профилактическая доза гепарина (с низкой молекулярной массой, НМГ) рекомендуется для защиты от венозной тромбоэмболии у госпитализированных пациентов с COVID-19 [21]. В этом контексте важно подчеркнуть роль одновременного введения смеси гесперидина и диосмина с гепарином для защиты от тромбоэмболии. Результаты предыдущих клинических исследований, в которых Дафлон в дозе 500 мг применялся с НМГ, подтвердили значительный эффект этой комбинации по сравнению с монотерапией НМГ в предотвращении случаев легочной эмболии и тромбоза глубоких вен. Таким образом, совместное введение НМГ и дафлона в дозе 500 мг может значительно ингибировать образование тромбов и предотвращать прогрессирование заболевания [22].

Диагностические критерии Научно-исследовательский институт вирусов в Китае провел предварительную идентификацию SARS-CoV-2 с помощью классических постулатов Коха и наблюдение за его морфологией с помощью электронной микроскопии[1]. На сегодняшний день золотым методом клинической диагностики COVID-19 является обнаружение нуклеиновых кислот в образцах мазков из носа и зева или других образцов дыхательных путей с помощью ПЦР в реальном времени и дальнейшее подтверждение с помощью секвенирования нового поколения. Клиническая классификация пациентов. три категории: бессимптомная инфекция верхних дыхательных путей (ИВДП) с ринитом, фарингитом или изолированной субфебрильной лихорадкой и миалгией и инфекции нижних дыхательных путей (ИНДП) с симптомами пневмонии или бронхита [3].

Побочные эффекты (смесь гесперидина и диосмина, Дафлон®) Как и все лекарственные средства, Дафлон 500 мг может вызывать побочные эффекты, хотя они возникают не у всех. Описаны отдельные случаи банальных желудочно-кишечных расстройств и нейровегетативных нарушений (чувство дискомфорта), не требующих прекращения лечения.

Проблемы безопасности (смесь гесперидина и диосмина, Дафлон®) Таблетки Дафлон 500 мг ВОЗМОЖНО БЕЗОПАСНЫ для большинства людей при пероральном приеме на срок до 6 месяцев. Безопасность его использования в течение более длительного периода времени неизвестна. Побочные эффекты включают боль и расстройство желудка, диарею и головную боль.

Противопоказания (смесь гесперидина и диосмина, Дафлон®) Противопоказания отсутствуют.

Взаимодействия (смесь гесперидина и диосмина, Дафлон®) Нет серьезных взаимодействий между лекарственными средствами, только умеренные и незначительные взаимодействия

• Целипролол: (умеренное лекарственное взаимодействие) гесперидин может снижать всасывание целипролола.
• Дилтиазем: (умеренное лекарственное взаимодействие) гесперидин может снижать всасывание дилтиазема.
• Верапамил: (умеренное лекарственное взаимодействие) гесперидин может повышать всасывание верапамила.
• Антигипертензивные препараты: (Умеренное лекарственное взаимодействие) Гесперидин может снизить высокое кровяное давление, может привести к слишком низкому кровяному давлению.
• Антикоагулянты/антитромбоцитарные препараты: (умеренное лекарственное взаимодействие) гесперидин может замедлять свертываемость крови, что может увеличить вероятность кровоподтеков и кровотечений.
• Седативные препараты (бензодиазепины) (умеренное лекарственное взаимодействие) Гесперидин может вызывать слишком сильную сонливость.

Особые меры предосторожности и предупреждения:

• Беременность и кормление грудью: гесперидин ВОЗМОЖНО БЕЗОПАСЕН для беременных и кормящих женщин при пероральном приеме с диосмином.
• Нарушение свертываемости крови: гесперидин может замедлять свертываемость крови и повышать риск кровотечения. Теоретически гесперидин может усугубить нарушение свертываемости крови.
• Низкое кровяное давление: гесперидин может снизить кровяное давление. Теоретически прием гесперидина может привести к слишком низкому кровяному давлению у людей, у которых уже есть низкое кровяное давление.
• Хирургия: гесперидин может продлить кровотечение. Есть опасения, что гесперидин может увеличить риск кровотечения во время и после хирургических процедур. Прекратите прием гесперидина как минимум за 2 недели до запланированной операции.

Научно-исследовательские цели

Это исследовательское предложение было использовано в качестве практической стратегии для предоставления подходящего лекарства или комбинации лекарств для возможного лечения пациентов, инфицированных COVID-19. Этот препарат может помочь предотвратить прогрессирование респираторных осложнений. Это может быть достигнуто с помощью различных целей, таких как:

1. Скрининг различных препаратов, относящихся к разным фармакологическим классам, в зависимости от их возможной активности против вируса COVID-19.
2. Предоставление экономически эффективной и простой в реализации стратегии лечения инфицированных пациентов и/или пациентов с высоким риском развития дыхательной недостаточности.
3. Наконец, эта клиническая стратегия остается важной целью улучшения состояния здоровья египтян, что может спасти их жизнь, а также сэкономить много денег.

Объем работ Объем работ будет проводиться через

1. Использование нового перепрофилированного препарата (Дафлон 500 мг) для лечения людей, инфицированных COVID-19.
2. Оценка влияния препарата на симптоматическое лечение пациентов с легкой формой COVID-19 посредством клинического испытания, разработанного в соответствии с временным руководством ВОЗ (Клиническое ведение тяжелой острой респираторной инфекции (ТОРИ) при подозрении на заболевание COVID-19), опубликованным 13 марта. 2020.
3. Изучение влияния препарата на предотвращение тяжелых компиляций, таких как острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС).

Рандомизированное двойное слепое контролируемое параллельное исследование (смесь гесперидина и диосмина, Daflon®) для лечения пациентов с впервые диагностированным Covid-19 в Египте.

Дизайн исследования Это исследование будет двойным слепым рандомизированным контролируемым параллельным исследованием Исследуемая популяция и методы. Установки. Это исследование будет проводиться на пациентах, которые в настоящее время находятся в назначенных больницах, связанных с Министерством высшего образования. Пациенты будут рандомизированы либо для получения Дафлона, либо для контрольной группы, которая получит стандартную помощь. Пациенты Госпитализированные пациенты с подтвержденным COVID-19 будут включены в это исследование в соответствии со следующими критериями; Взрослые (18-65 лет), оба пола, положительный результат ПЦР в образце из носоглотки при поступлении. Кроме того, критерии включения будут включать недавно диагностированных бессимптомных пациентов или пациентов с инфекцией верхних дыхательных путей (ИВДП), у которых будут ринит, фарингит или изолированная субфебрильная лихорадка и миалгия.

Информированное согласие Перед включением в исследование пациенты, отвечающие критериям включения, дадут письменное информированное согласие на участие в исследовании. Каждому участнику будет выдан информационный документ, в котором четко указан характер исследования, а также риски или побочные эффекты и преимущества, связанные с участием в исследовании. Исследование будет проводиться в соответствии с этическими стандартами Хельсинкской декларации. Протокол будет представлен в Национальный комитет по этике для рассмотрения и утверждения. Это испытание будет зарегистрировано как клиническое испытание.

Процедура Пациентов будут наблюдать на исходном уровне для регистрации, сбора исходных данных и лечения в день 0. Продолжительность наблюдения составит 28 дней или до отрицательного результата ПЦР. Начиная с 1-го дня, каждый день пациенты будут получать стандартизированную помощь или Дафлон 1000 мг 3 раза в день в течение 10 дней. Симптоматическое лечение и антибиотики в качестве меры предотвращения бактериальной суперинфекции будут предоставлены всем участникам на основании клинической оценки. Все участники будут отправлены на сбор образцов крови на исходном уровне и после периода наблюдения для анализа ОТ-ПЦР и для оценки изменений в сыворотке IL1β, TNF-α, hsCRP. Общий анализ крови будет сделан для подсчета лимфоцитов. Будут оцениваться изменения частоты дыхания и PaO2. Кроме того, будет рассчитана смертность.

Исходы. Первичные исходы: отрицательный результат ОТ-ПЦР. Вторичные исходы включают: изменения частоты дыхания и PaO2, изменения сывороточного IL1β, TNF-α, hsCRP, количество лимфоцитов, уровень смертности и возникновение побочных эффектов.

Рандомизированное двойное слепое контролируемое параллельное исследование (смесь гесперидина и диосмина, Daflon®) для лечения пациентов с впервые диагностированным Covid-19 в Египте.

Дизайн исследования: Рандомизированное двойное слепое контролируемое параллельное исследование Тип исследования: Интервенционное клиническое исследование Набор: 50 участников в каждой группе Распределение: Рандомизированное Назначение: Параллельное вмешательство Описание модели: Две параллельные группы, выбранные случайным образом Маскировка: Двойная (участник, исследователь) Основная цель: Лечение или эффективность плюс безопасность Предполагаемая дата начала исследования: 07.01.2020 Предполагаемая дата завершения первичного исследования: 15.07.2020 Предполагаемая дата завершения исследования: 10.01.2020 Arms

Экспериментальный:

1000 мг Дафлона три раза в день в течение 10 дней.

Активный компаратор:

Стандартная помощь оказывается в инфекционных больницах. Результаты

Первичные итоговые показатели:

ПЦР отрицательный

Вторичные итоговые показатели:

Изменения частоты дыхания Изменение PaO2 у пациентов Изменение уровня IL1β в сыворотке Изменение уровня TNF-α в сыворотке Изменение уровня вчСРБ в сыворотке CBC для количества лимфоцитов Зарегистрированные побочные эффекты Уровень смертности

Критерии включения:

Подтвержденные случаи Covid-19 (все с помощью RT-PCR) Недавно диагностированные бессимптомные пациенты или пациенты с инфекцией верхних дыхательных путей (ИВДП), у которых будут ринит, фарингит или изолированная субфебрильная лихорадка и миалгия, Взрослые (18–65 лет) ) Оба пола

Критерий исключения:

Пациенты с нарушениями свертываемости крови Пациенты с низким и очень низким артериальным давлением Пациенты после операции Пациенты с ослабленным иммунитетом, принимающие лекарства во время скрининга