Hesperidin og Diosmin til behandling af COVID-19

Forskningsbaggrund og begrundelse I slutningen af ​​december 2019 blev lungebetændelse af ukendt oprindelse påvist på hospitalerne i Wuhan by, Kina, og rapporteret til WHO's landskontor for første gang [1-3]. Efter et par dage har den kinesiske regering bekræftet overførsel fra menneske til menneske af den nye smitsomme luftvejssygdom [4]. I slutningen af ​​januar 2020 erklærede WHO udbruddet af alvorligt akut respiratorisk syndrom (SARS), forårsaget af en ny coronavirus (SARS-CoV-2), som en international folkesundhedsnødsituation. Sygdommen kaldet coronavirus 19 (COVID-19) overføres hurtigt fra Kina til hele verden, og efterfølgende erklærede WHO det for en global pandemisk sygdom. Den virulente virusstruktur er tæt beslægtet med (SARS-CoV)-stamme med en enkeltstrenget positiv-sense RNA-sammensætning[5].

Denne pandemiske sygdom er især af stor betydning for hele verden og især for lande med en tung befolkning som Egypten. Der er et kritisk behov for nye, kontinuerlige og omkostningseffektive sundhedsydelser til inficerede mennesker. Tidlig opdagelse og strategier til forebyggelse af progression af COVID-19 ville gøre en stor forskel for inficerede patienter og ville også være økonomisk fordelagtige for et ressourcebegrænset land.

Personer, der er inficeret med COVID-19, har muligvis ingen symptomer, men fungerer stadig som en smittekilde for andre omkringliggende personer. De mest almindelige kliniske manifestationer efter infektion spænder fra milde symptomer på (generaliseret træthed, tør hoste, lavgradig feber og ondt i halsen) til alvorlige symptomer på (typisk alvorligt akut respiratorisk distress-syndrom (ARDS) og lungebetændelse)[6]. Selvom den enorme videnskabelige forskningsindsats hovedsageligt fokuserer på brugen af ​​antivirale lægemidler, genbrug af visse lægemidler og vaccineproduktion til behandling af COVID-19-patienter, er der indtil nu ingen specifik kur eller vaccine til behandling. Udvikling af nye lægemidler er en tidskrævende proces, så lægemiddelrepositionering kan være den optimale løsning til at kontrollere denne pandemiske infektion.

Udvalgte lægemidler Hesperidin er et almindeligt flavonglycosid, der findes i citrusfrugter såsom citroner og søde appelsiner[7, 8]. Hesperidin har adskillige farmakologiske aktiviteter, såsom anti-atherogen, antihyperlipidæmisk, antidiabetisk, venotonisk, kardiobeskyttende, anti-inflammatorisk og antihypertensiv virkning. Hesperidins antiinflammatoriske aktivitet blev hovedsageligt tilskrevet dets antioxidantforsvarsmekanisme og undertrykkelse af pro-inflammatorisk cytokinproduktion[7]. Hesperidin udviste antiviral aktivitet mod influenzavirus gennem en signifikant reduktion af virusreplikation. Behandling af inficerede celler med hesperidin forbedrede celleautonom immunitet via aktivering og opregulering af p38- og JNK-ekspression, som er afgørende for celleforsvarsmekanismer mod influenzavirus[9].

Hesperidin har været brugt som urtemedicin i lang tid. Hesperidins sikkerhed blev bekræftet af FASEB (Federation of American Societies of Experimental Biology) efter anmodning fra FDA. Toksicitetsundersøgelser har bekræftet hesperidins høje sikkerhedsprofil efter oral indtagelse. Resultater fra orale toksicitetsundersøgelser viste fravær af uønskede bivirkninger efter oral hesperidinindtagelse på mere end 2g/kg [10].

Daflon 500 mg er en markedsført tabletdoseringsform, der indeholder en mikroniseret flavonoidblanding af 50 mg hesperidin og 450 mg diosmin, der anvendes som vasobeskyttende venotonisk middel[10]. Denne hesperidinblanding er kendetegnet ved sin høje sikkerhedsprofil. Fortsætter oral administration af hesperidinblanding til rotter i 13 og 26 uger ved anvendelse af en meget høj dosis på 35 gange af den daglige dosis viste ingen toksicitet med en høj LD50-værdi på mere end 3 g/kg kropsvægt. Kliniske forsøg med mere end 2850 patienter behandlet med hesperidinblandingen i en periode på 6 uger til 1 år viste normale hæmatologiske parametre, lever- og nyrefunktioner uden tegn på toksicitet[11].

Hesperidins rolle i forebyggelse og behandling af COVID 19 blev for nylig offentliggjort af vores forskerhold i tidsskriftet Medical Hypotheses [12].

Optrævling af værtscellulære receptorer, der bruges til cellulær indtræden af ​​COVID-19, vil give mulige angrebslinjer. Celleindtræden af ​​COVID-19 afhænger af to på hinanden følgende trin, for det første binding af den virale spike (S-protein) til værtscellulære receptorer efterfulgt af priming af S-protein med celleproteaser. For nylig viste forskere, at COVID-19 bruger ACE-2-receptoren til indtræden [13] og serinproteasen TMPRSS2 til priming af S-protein. Camostatmesylat, et serinproteasehæmmerlægemiddel blokerede virusindtrængen og blev brugt som COVID-19-behandling i Japan[14].

COVID-19 binder til ACE-2-receptoren gennem dens specifikke Spike-receptor binding domain (RBD) sekvens for at danne SARS-CoV-2-RBD-ACE-2 komplekset. Den foreslåede beregningsmæssige aktivitet af 78 antivirale lægemidler mod den humane ACE2-receptor blev screenet ved hjælp af homologimodellering. Denne undersøgelse viste, at hesperidin er den eneste forbindelse, der kunne målrette bindingsgrænsefladen mellem SARS-CoV-2 Spike og ACE2 humane receptorer. baseret på virtuel screening kan hesperidin forstyrre interaktionen af ​​ACE2 med RBD af SARS-CoV-2 og dermed blokere dets indtræden i lungecellerne [15]. Derfor kan hesperidin bruges som et lovende profylaktisk middel mod COVID-19-infektion.

Værts antivirale reaktioner mod COVID-19-infektion afhænger af aktiveringen af ​​både immunsystemet og cellulære selvforsvarsmekanismer. Immunitet spiller en stor rolle i beskyttelsen af ​​værten mod virusinfektion. Forekomsten af ​​immunoverrespons eller immundefekt er ansvarlig for, at inficerede patienters tilstand bliver kritisk eller alvorlig[16]. Hesperidins antivirale aktivitet mod influenzavirus involverer dets rolle i aktiveringen af ​​den mitogenaktiverede proteinkinase (MAPK)-vej. MAPK-værtsforsvarskaskaden bidrager til effektivt at begrænse viral replikation, spredning og minimere vævsskade[9]. En nylig undersøgelse viste, at interferon-MAPK-vejen spillede en vigtig rolle i COVID-19-immunresponset[16]. Derfor hjælper hesperidin ved dets aktivering til at være vært for immunitet mod COVID-19 viral replikation og dermed dets progression, som vil forbedre patientens resultat.

Patienter inficeret med COVID-19 udviste det, der kaldes "cytokinstorm", som primært startede som en inflammatorisk reaktion og resulterede i ukontrolleret overproduktion af opløselige markører for inflammation. Tilgængelig dokumentation, der viser, at cytokinstorm er en væsentlig årsag til udviklingen af ​​ARDS. Cytokinstorm involverer frigivelse af forskellige immunaktive molekyler såsom interferoner (f. IFNy), interleukiner (f.eks. IL-1β, IL-2, IL-6), kemokiner og tumornekrosefaktor-alfa (TNF-α) [17].

Hesperidin med dets høje antiinflammatoriske aktivitet hæmmede udskillelsen af ​​pro-inflammatoriske cytokiner såsom IFN-y og IL-2[18]. Desuden hæmmede hesperidin IL 1β-stimulerede inflammatoriske reaktioner ved at hæmme aktiveringen af ​​NF κB-signaleringskaskaden [19]. Det spillede også en hovedregel i at undertrykke frigivelsen af ​​inflammatoriske markører såsom (TNFα og IL-6) hos type 2-diabetespatienter[20]. Derfor kan det bruges som adjuverende terapi til at kontrollere den alvorlige inflammatoriske reaktion mod COVID-19.

Aktivering af koagulationsveje efter immunresponset på COVID-19-infektion fremmer koagulationsdannelse. Den foreslåede mekanisme til dannelse af mikrotrombose involverer forekomsten af ​​prokoagulant-antikoagulant ubalance, blodpladeaktivering og omdannelse af fibrinogen til fibrin. Dissemineret intravaskulær koagulation disponerer for udvikling af multiorgansvigt, især i alvorlige inficerede tilfælde[21].

En profylaktisk dosis af heparin (med lav molekylvægt, LMWH) anbefales til beskyttelse mod venøs tromboemboli hos COVID-19 indlagte patienter[21]. I denne sammenhæng er det vigtigt at fremhæve rollen af ​​samtidig administration af hesperidin og diosminblanding med heparin til beskyttelse mod tromboemboli. Resultater fra tidligere kliniske forsøg, der brugte Daflon 500 mg med LMWH, bekræftede den signifikante effekt af denne kombination sammenlignet med LMWH alene til at forhindre forekomsten af ​​lungeemboli og dyb venetrombose. Derfor kan samtidig administration af LMWH og Daflon 500 mg signifikant hæmme koageldannelse og forhindre sygdomsprogression [22].

Diagnostiske kriterier Den virale forskningsinstitution i Kina har foretaget foreløbig identifikation af SARS-CoV-2 gennem de klassiske Kochs postulater og observation af dets morfologi gennem elektronmikroskopi[1]. Indtil videre er den gyldne kliniske diagnosemetode for COVID-19 nukleinsyrepåvisning i næse- og svælgprøvetagning eller andre luftvejsprøver ved real-time PCR og yderligere bekræftet ved næste generations sekventering Klinisk klassificering af patienter Patienter kan grupperes i tre kategorier: asymptomatisk, øvre luftvejsinfektion (URTI) ved rhinitis, pharyngitis eller isoleret lavgradig feber og myalgi, og nedre luftvejsinfektioner (LRTI) ved symptomer på lungebetændelse eller bronkitis[3].

Bivirkninger af (Hesperidin og Diosmin blanding, Daflon®) Som al anden medicin kan Daflon 500 mg give bivirkninger, men ikke alle får bivirkninger. Der er beskrevet nogle tilfælde af almindelige mave-tarmlidelser og neurovegetative lidelser (ubehagsfølelse), som ikke kræver at stoppe behandlingen.

Sikkerhedsproblemer ved (Hesperidin og Diosmin-blanding, Daflon®) Daflon 500 mg tabletter er MULIGT SIKKER for de fleste mennesker, når de tages gennem munden i op til 6 måneder. Sikkerheden ved at bruge den i længere tid er ukendt. Bivirkninger omfatter mavesmerter og uro, diarré og hovedpine.

Kontraindikationer af (Hesperidin og Diosmin blanding, Daflon®) Ingen rapporterede kontraindikationer.

Interaktioner af (Hesperidin og Diosmin blanding, Daflon®) Ingen alvorlige lægemiddel-interaktioner, kun moderate og mindre interaktioner

• Celiprolol: (Moderat interaktion mellem lægemidler) Hesperidin kan reducere absorptionen af ​​celiprolol.
• Diltiazem: (Moderat interaktion mellem lægemidler) Hesperidin kan reducere absorptionen af ​​diltiazem.
• Verapamil: (Moderat interaktion mellem lægemidler) Hesperidin kan øge absorptionen af ​​verapamil.
• Antihypertensiva: (Moderat interaktion mellem lægemidler) Hesperidin kan sænke forhøjet blodtryk kan få dit blodtryk til at blive for lavt.
• Antikoagulantia / antiblodplademedicin: (Moderat interaktion mellem lægemidler) Hesperidin kan forsinke blodkoagulationen, hvilket kan øge chancerne for blå mærker og blødninger.
• Beroligende medicin (benzodiazepiner) (moderat lægemiddelinteraktion) Hesperidin kan forårsage for meget søvnighed.

Særlige forholdsregler og advarsler:

• Graviditet og amning: Hesperidin er MULIGT SIKKER for gravide eller ammende kvinder, når det tages gennem munden med diosmin.
• Blødningsforstyrrelse: Hesperidin kan bremse blodkoagulationen og øge risikoen for blødning. I teorien kan hesperidin gøre blødningsforstyrrelser værre.
• Lavt blodtryk: Hesperidin kan sænke blodtrykket. I teorien kan det at tage hesperidin få blodtrykket til at blive for lavt hos mennesker, der allerede har lavt blodtryk.
• Kirurgi: Hesperidin kan forlænge blødningen. Der er bekymring for, at hesperidin kan øge risikoen for blødning under og efter kirurgiske indgreb. Stop med at tage hesperidin mindst 2 uger før en planlagt operation.

Forskningsmål

Dette forskningsforslag blev brugt som en praktisk strategi til at levere et passende lægemiddel eller lægemiddelkombination til mulig behandling af COVID-19-inficerede patienter. Dette lægemiddel kan hjælpe med at forhindre udviklingen af ​​respiratoriske komplikationer. Dette kan opnås gennem forskellige mål som følgende:

1. Screening af forskellige lægemidler relateret til forskellige farmakologiske klasser afhængigt af dets mulige aktivitet mod COVID-19-virus.
2. Tilvejebringelse af omkostningseffektiv og let at implementere behandlingsstrategi til inficerede patienter og/eller patienter med høj risiko for at udvikle respirationssvigt.
3. Endelig er denne kliniske strategi fortsat et vigtigt mål for at forbedre den egyptiske sundhedstilstand, som kan redde deres liv og samtidig spare mange penge.

Arbejdets omfang Arbejdets omfang vil blive udført gennem

1. Brug af nyligt genbrugt lægemiddel (Daflon 500 mg) til behandling af COVID-19 inficerede mennesker.
2. Evaluering af lægemidlets effekt på symptomatisk behandling af milde COVID-19-patienter gennem et klinisk forsøg designet i henhold til WHO (Klinisk behandling af alvorlig akut respiratorisk infektion (SARI) ved mistanke om COVID-19-sygdom) foreløbig vejledning offentliggjort den 13. marts 2020.
3. Undersøgelse af lægemidlets indvirkning på forebyggelsen af ​​adskillige kompilationer såsom akut respiratorisk distress syndrom (ARDS).

Randomiseret dobbelt-blind kontrolleret Parallel undersøgelse af (Hesperidin og Diosmin blanding, Daflon®) til behandling af Covid-19 nydiagnosticerede patienter i Egypten.

Undersøgelsesdesign Denne undersøgelse vil være en dobbeltblind randomiseret kontrolleret parallel undersøgelse. Undersøgelsespopulation og metodeindstilling Denne undersøgelse vil være på patienter, der i øjeblikket bevilges på udpegede hospitaler tilknyttet Ministeriet for Højere Uddannelse. Patienter vil blive randomiseret til enten at modtage Daflon versus kontrolgruppe, som vil modtage standardbehandling. Patienter Indlagte patienter med bekræftet COVID-19 vil inkluderes i denne undersøgelse i henhold til følgende kriterier; Voksen (18-65 år), begge køn, PCR-positiv i nasopharyngeal prøve ved indlæggelse. Derudover vil inklusionskriterier involvere nydiagnosticerede asymptomatiske eller med øvre luftvejsinfektion (URTI) patienter, som vil præsentere med rhinitis, pharyngitis eller isoleret lavgradig feber og myalgi.

Informeret samtykke Inden de inkluderes i undersøgelsen, vil patienter, der opfylder inklusionskriterierne, give deres skriftlige informerede samtykke til at deltage i undersøgelsen. Et informationsdokument, der klart angiver undersøgelsens art og risici eller bivirkninger og fordelene forbundet med deltagelse i undersøgelsen, vil blive givet til hver deltager. Undersøgelsen vil blive udført i overensstemmelse med de etiske standarder i Helsinki-erklæringen. Protokollen vil blive forelagt den nationale etiske komité til gennemgang og godkendelse. Dette forsøg vil blive registreret som klinisk forsøg.

Procedure Patienter vil blive set ved baseline for tilmelding, indledende dataindsamling og behandling på dag-0. Opfølgningsvarigheden vil være 28 dage eller indtil PCR negativ. Fra dag 1, hver dag, vil patienter modtage standardiseret behandling eller Daflon 1000 mg, tre gange dagligt i 10 dage. Symptomatisk behandling og antibiotika som en foranstaltning til forebyggelse af bakteriel superinfektion vil blive givet baseret på klinisk vurdering for alle deltagere. Alle deltagere vil blive underkastet blodprøvetagning ved baseline og efter opfølgningsperioden for RT-PCR-assay og for at evaluere ændringen i serum IL1β, TNF-α, hsCRP. CBC vil blive udført for lymfocyttælling. Ændringer i respirationsfrekvens og PaO2 vil blive vurderet. Endvidere vil dødeligheden blive beregnet.

Resultater Primære udfaldsmål: er RT-PCR negativ Sekundære resultatmål omfatter: ændringer i respirationsfrekvens og PaO2, ændring i serum IL1β, TNF-α, hsCRP, lymfocyttal, dødelighed og forekomst af bivirkninger.

Randomiseret dobbelt-blind kontrolleret Parallel undersøgelse af (Hesperidin og Diosmin blanding, Daflon®) til behandling af Covid-19 nydiagnosticerede patienter i Egypten.

Undersøgelsesdesign: Randomiseret dobbelt-blind kontrolleret Parallel undersøgelse Undersøgelsestype: Interventionel klinisk forsøg Tilmelding: 50 deltagere i hver arm Tildeling: Randomiseret opgave: Parallel intervention Modelbeskrivelse: To parallelle grupper tilfældigt hævdet Maskering: Dobbelt (deltager, investigator) Primært formål: Behandling eller effekt plus sikkerhed Estimeret undersøgelses startdato: 01/07/2020 Estimeret primær afslutningsdato: 15/07/2020 Estimeret undersøgelses afslutningsdato: 01/10/2020 Arms

Eksperimentel:

1000mg Daflon tre gange dagligt i 10 dage

Aktiv komparator:

Standardbehandling leveret på isolationshospitalerne. Resultater

Primære resultatmål:

PCR negativ

Sekundære resultatmål:

Ændringer i respirationsfrekvens Ændring hos patienter PaO2 Ændring i serum IL1β Ændring i serum TNF-α Ændring i serum hsCRP CBC for lymfocyttal Rapporterede bivirkninger Dødelighedsrate

Inklusionskriterier:

Bekræftede tilfælde af Covid-19 (alle ved RT-PCR) Nydiagnosticerede asymptomatiske eller med øvre luftvejsinfektion (URTI) patienter, som vil præsentere med rhinitis, pharyngitis eller isoleret lavgradig feber og myalgi, Voksen (18-65 år gammel) ) Begge køn

Ekskluderingskriterier:

Patienter med blødningsforstyrrelser Patienter med lavt til meget lavt blodtryk Patienter efter operation Immunkompromitterede patienter, der tager medicin efter screening