Hesperidine en Diosmin voor de behandeling van COVID-19

Onderzoeksachtergrond en grondgedachte Eind december 2019 werd longontsteking van onbekende oorsprong ontdekt in de ziekenhuizen van de stad Wuhan, China, en voor het eerst gerapporteerd aan het WHO-landenkantoor [1-3]. Na een paar dagen heeft de Chinese overheid de overdracht van de nieuwe besmettelijke luchtwegaandoening van mens op mens bevestigd [4]. Eind januari 2020 heeft de WHO de uitbraak van ernstig acuut respiratoir syndroom (SARS), veroorzaakt door een nieuw coronavirus (SARS-CoV-2), uitgeroepen tot een internationale noodsituatie voor de volksgezondheid. De ziekte genaamd coronavirus 19 (COVID-19) verspreidde zich snel van China naar de hele wereld en vervolgens verklaarde de WHO het tot een wereldwijde pandemische ziekte. De virulente virusstructuur is nauw verwant aan de (SARS-CoV)-stam met een enkelstrengs positive-sense RNA-samenstelling[5].

Deze pandemische ziekte is vooral van groot belang voor de hele wereld en vooral voor landen met een hoge bevolkingsdichtheid zoals Egypte. Er is een kritieke behoefte aan opkomende, continue en kosteneffectieve gezondheidszorg voor geïnfecteerde mensen. Vroegtijdige detectie en strategieën om de progressie van COVID-19 te voorkomen, zouden een groot verschil maken voor geïnfecteerde patiënten en zouden ook economisch gunstig zijn voor een land met beperkte middelen.

Mensen die besmet zijn met COVID-19 hebben mogelijk geen symptomen, maar vormen toch een infectiebron voor andere omringende personen. De meest voorkomende klinische manifestaties na infectie variëren van milde symptomen van (gegeneraliseerde vermoeidheid, droge hoest, lichte koorts en keelpijn) tot ernstige symptomen van (typisch ernstig acuut respiratory distress syndrome (ARDS) en longontsteking)[6]. Hoewel de enorme wetenschappelijke onderzoeksinspanningen voornamelijk gericht zijn op het gebruik van antivirale middelen, het herbestemmen van bepaalde geneesmiddelen en de productie van vaccins voor de behandeling van COVID-19-patiënten, is er tot nu toe geen specifieke remedie of vaccin voor behandeling. De ontwikkeling van nieuwe medicijnen is een tijdrovend proces, dus het herpositioneren van medicijnen kan de optimale oplossing zijn om deze pandemische infectie onder controle te krijgen.

Geselecteerde medicijnen Hesperidine is een veel voorkomende flavonglycoside die wordt aangetroffen in citrusvruchten zoals citroenen en zoete sinaasappelen [7, 8]. Hesperidine heeft verschillende farmacologische activiteiten, zoals anti-atherogene, antihyperlipidemische, antidiabetische, venotone, cardioprotectieve, ontstekingsremmende en antihypertensieve acties. De ontstekingsremmende activiteit van hesperidine werd voornamelijk toegeschreven aan het antioxiderende afweermechanisme en de onderdrukking van pro-inflammatoire cytokineproductie [7]. Hesperidine vertoonde antivirale activiteit tegen het influenzavirus door een significante vermindering van virusreplicatie. Behandeling van geïnfecteerde cellen met hesperidine verbeterde cel-autonome immuniteit via activering en opregulatie van p38- en JNK-expressie, wat essentieel is voor celafweermechanismen tegen het griepvirus [9].

Hesperidine wordt al lange tijd als kruidengeneesmiddel gebruikt. De veiligheid van hesperidine werd op verzoek van de FDA bevestigd door FASEB (Federation of American Societies of Experimental Biology). Toxiciteitsstudies hebben het hoge veiligheidsprofiel van hesperidine na orale inname bevestigd. Resultaten van orale toxiciteitsstudies toonden de afwezigheid van nadelige bijwerkingen aan na orale inname van hesperidine van meer dan 2g/kg [10].

Daflon 500 mg is een op de markt gebrachte tabletdoseringsvorm die een gemicroniseerd flavonoïdemengsel bevat van 50 mg hesperidine en 450 mg diosmine dat wordt gebruikt als vasoprotectief venotonisch middel [10]. Dit hesperidinemengsel wordt gekenmerkt door zijn hoge veiligheidsprofiel. Voortzetting van orale toediening van hesperidinemengsel aan ratten gedurende 13 en 26 weken, waarbij een zeer hoge dosis van 35 maal de dagelijkse dosering werd gebruikt, vertoonde geen toxiciteit met een hoge LD50-waarde van meer dan 3 g/kg lichaamsgewicht. Klinische onderzoeken waarbij meer dan 2850 patiënten werden gebruikt die gedurende een periode van 6 weken tot 1 jaar met het hesperidinemengsel werden behandeld, toonden normale hematologische parameters, lever- en nierfuncties zonder tekenen van toxiciteit [11].

De rol van hesperidine bij de preventie en behandeling van COVID 19 werd onlangs door ons onderzoeksteam gepubliceerd in het tijdschrift Medical Hypotheses [12].

Het ontrafelen van cellulaire gastheerreceptoren die worden gebruikt voor cellulaire binnenkomst van COVID-19, zal mogelijke aanvalslijnen opleveren. Celinvoer van COVID-19 hangt af van twee opeenvolgende stappen, ten eerste binding van de virale piek (S-eiwit) aan gastheercelreceptoren, gevolgd door priming van S-eiwit door celproteasen. Onlangs hebben onderzoekers aangetoond dat COVID-19 de ACE-2-receptor gebruikt voor binnenkomst [13] en de serineprotease TMPRSS2 voor priming van S-proteïne. Camostat-mesylaat, een serineproteaseremmer, blokkeerde de toegang tot virussen en werd in Japan gebruikt als COVID-19-behandeling [14].

COVID-19 bindt zich aan de ACE-2-receptor via zijn specifieke Spike-receptorbindingsdomein (RBD)-sequentie om het SARS-CoV-2-RBD-ACE-2-complex te vormen. De voorgestelde computeractiviteit van 78 antivirale geneesmiddelen tegen de menselijke ACE2-receptor werd gescreend met behulp van homologiemodellering. Deze studie toonde aan dat hesperidine de enige verbinding is die zich kan richten op de bindingsinterface tussen SARS-CoV-2 Spike en ACE2 menselijke receptoren. op basis van virtuele screening kan hesperidine de interactie van ACE2 met RBD van SARS-CoV-2 verstoren en zo de toegang tot de longcellen blokkeren [15]. Daarom kan hesperidine worden gebruikt als een veelbelovend profylactisch middel tegen COVID-19-infectie.

Antivirale reacties van de gastheer tegen COVID-19-infectie zijn afhankelijk van de activering van zowel het immuunsysteem als de cellulaire zelfverdedigingsmechanismen. Immuniteit speelt een belangrijke rol bij de bescherming van de gastheer tegen virale infectie. Het optreden van overreactie van het immuunsysteem of immuundeficiëntie is verantwoordelijk voor het kritiek of ernstig worden van de toestand van geïnfecteerde patiënten[16]. De antivirale activiteit van hesperidine tegen het influenzavirus omvat zijn rol bij de activering van de door mitogeen geactiveerde proteïnekinaseroute (MAPK). De verdedigingscascade van de MAPK-gastheer draagt ​​bij aan het efficiënt beperken van virale replicatie, verspreiding en het minimaliseren van weefselschade [9]. Een recente studie toonde aan dat de interferon-MAPK-route een belangrijke rol speelde in de COVID-19-immuunrespons[16]. Daarom helpt hesperidine, door zijn activering om immuniteit te hosten, tegen de replicatie van COVID-19-virussen en dus de progressie ervan, wat de uitkomst van de patiënt zal verbeteren.

Met COVID-19 geïnfecteerde patiënten vertoonden een zogenaamde "cytokinestorm", die voornamelijk begon als een ontstekingsreactie en resulteerde in een ongecontroleerde overproductie van oplosbare ontstekingsmarkers. Beschikbaar bewijs dat aantoont dat cytokinestorm een ​​belangrijke oorzaak is voor de ontwikkeling van ARDS. Cytokinestorm omvat het vrijkomen van verschillende immuunactieve moleculen zoals interferonen (bijv. IFNγ), interleukinen (bijv. IL-1β, IL-2, IL-6), chemokinen en tumornecrosefactor-alfa (TNF-a) [17].

Hesperidine met zijn hoge ontstekingsremmende activiteit remde de secretie van pro-inflammatoire cytokines zoals IFN-γ en IL-2[18]. Bovendien remde hesperidine IL 1β-gestimuleerde ontstekingsreacties door de activering van de NF KB-signaleringscascade te remmen [19]. Het speelde ook een belangrijke rol bij het onderdrukken van de afgifte van ontstekingsmarkers zoals (TNFα en IL-6) bij diabetes type 2-patiënten [20]. Daarom kan het worden gebruikt als adjuvante therapie om de ernstige ontstekingsreactie tegen COVID-19 onder controle te houden.

Activering van stollingsroutes na de immuunrespons op COVID-19-infectie bevordert de vorming van stolsels. Het voorgestelde mechanisme voor de vorming van microtrombose omvat het optreden van procoagulans-anticoagulantia-onevenwichtigheid, activatie van bloedplaatjes en het omzetten van fibrinogeen in fibrine. Gedissemineerde intravasculaire coagulatie predisponeert voor de ontwikkeling van multi-orgaanfalen, vooral in ernstige geïnfecteerde gevallen [21].

Een profylactische dosis heparine (met laag moleculair gewicht, LMWH) wordt aanbevolen voor bescherming tegen veneuze trombo-embolie bij COVID-19 ziekenhuispatiënten[21]. In deze context is het essentieel om de rol te benadrukken van gelijktijdige toediening van een mengsel van hesperidine en diosmine met heparine voor bescherming tegen trombo-embolie. Resultaten van eerdere klinische onderzoeken waarbij Daflon 500 mg met LMWH werd gebruikt, bevestigden het significante effect van deze combinatie in vergelijking met alleen LMWH bij het voorkomen van longembolie en diepe veneuze trombose. Daarom kan gelijktijdige toediening van LMWH en Daflon 500 mg stolselvorming aanzienlijk remmen en ziekteprogressie voorkomen [22].

Diagnostische criteria De virale onderzoeksinstelling in China heeft een voorlopige identificatie van SARS-CoV-2 uitgevoerd door middel van de klassieke postulaten van Koch en het observeren van de morfologie ervan door middel van elektronenmicroscopie[1]. Tot nu toe is de gouden klinische diagnosemethode van COVID-19 de detectie van nucleïnezuur in de neus- en keeluitstrijkjes of andere bemonsteringen van de luchtwegen door real-time PCR en verder bevestigd door sequencing van de volgende generatie Klinische classificatie van patiënten Patiënten kunnen worden gegroepeerd in drie categorieën: asymptomatisch, infectie van de bovenste luchtwegen (URTI) bij rhinitis, faryngitis of geïsoleerde lichte koorts en myalgie, en infecties van de onderste luchtwegen (LLWI) bij symptomen van longontsteking of bronchitis[3].

Bijwerkingen van (mengsel van Hesperidine en Diosmin, Daflon®) Zoals elk geneesmiddel kan Daflon 500 mg bijwerkingen hebben, al krijgt niet iedereen daarmee te maken. Er zijn enkele gevallen beschreven van alledaagse gastro-intestinale stoornissen en neurovegetatieve stoornissen (onaangenaam gevoel) waarvoor het niet nodig is de behandeling te stoppen.

Veiligheidsproblemen van (Hesperidine en Diosmin-mengsel, Daflon®) Daflon 500 mg-tabletten zijn MOGELIJK VEILIG voor de meeste mensen bij orale inname gedurende maximaal 6 maanden. De veiligheid van langdurig gebruik is niet bekend. Bijwerkingen zijn maagpijn en maagklachten, diarree en hoofdpijn.

Contra-indicaties van (mengsel van Hesperidine en Diosmin, Daflon®) Geen gerapporteerde contra-indicaties.

Interacties van (mengsel van Hesperidine en Diosmin, Daflon®) Geen ernstige interacties tussen geneesmiddelen, slechts matige en kleine interacties

• Celiprolol: (Gematigde geneesmiddelinteractie) Hesperidine kan de absorptie van celiprolol verminderen.
• Diltiazem: (Gematigde geneesmiddelinteractie) Hesperidine kan de absorptie van diltiazem verminderen.
• Verapamil: (Gematigde interactie tussen geneesmiddelen) Hesperidine kan de absorptie van verapamil verhogen.
• Antihypertensiva: (Gematigde interactie tussen geneesmiddelen) Hesperidine kan een hoge bloeddruk verlagen, waardoor uw bloeddruk te laag kan worden.
• Anticoagulantia / plaatjesaggregatieremmers: (Gematigde interactie tussen geneesmiddelen) Hesperidine kan de bloedstolling vertragen, wat de kans op blauwe plekken en bloedingen kan vergroten.
• Kalmerende medicijnen (benzodiazepinen) (matige interactie tussen geneesmiddelen) Hesperidine kan te veel slaperigheid veroorzaken.

Speciale voorzorgsmaatregelen en waarschuwingen:

• Zwangerschap en borstvoeding: Hesperidine is MOGELIJK VEILIG voor zwangere vrouwen of vrouwen die borstvoeding geven bij orale inname met diosmin.
• Bloedstoornis: Hesperidine kan de bloedstolling vertragen en het risico op bloedingen verhogen. In theorie zou hesperidine bloedingsstoornissen kunnen verergeren.
• Lage bloeddruk: Hesperidine kan de bloeddruk verlagen. In theorie kan het gebruik van hesperidine ervoor zorgen dat de bloeddruk te laag wordt bij mensen die al een lage bloeddruk hebben.
• Chirurgie: Hesperidine kan het bloeden verlengen. Er bestaat bezorgdheid dat hesperidine het risico op bloedingen tijdens en na chirurgische ingrepen zou kunnen verhogen. Stop met het gebruik van hesperidine ten minste 2 weken voor een geplande operatie.

Onderzoeksdoelstellingen

Dit onderzoeksvoorstel werd gebruikt als een praktische strategie om een ​​geschikt medicijn of medicijncombinatie te bieden voor mogelijke behandeling van met COVID-19 geïnfecteerde patiënten. Dit medicijn kan de progressie van ademhalingscomplicaties helpen voorkomen. Dit kan worden bereikt door verschillende doelen als volgt:

1. Screening van verschillende geneesmiddelen die verband houden met verschillende farmacologische klassen, afhankelijk van de mogelijke activiteit ervan tegen het COVID-19-virus.
2. Het bieden van een kosteneffectieve en eenvoudig te implementeren behandelingsstrategie voor geïnfecteerde patiënten en/of patiënten met een hoog risico op het ontwikkelen van respiratoire insufficiëntie.
3. Ten slotte blijft deze klinische strategie een belangrijk doel bij het verbeteren van de Egyptische gezondheidstoestand, die hun leven kan redden en tegelijkertijd veel geld kan besparen.

Omvang van de werkzaamheden De omvang van de werkzaamheden zal worden uitgevoerd door middel van

1. Gebruik van nieuw hergebruikt medicijn (Daflon 500 mg) voor de behandeling van met COVID-19 geïnfecteerde mensen.
2. Evaluatie van het effect van het geneesmiddel op de symptomatische behandeling van milde COVID-19-patiënten door middel van een klinische proef die is opgezet volgens de WHO (Clinical management of ernstige acute respiratoire infectie (SARI) wanneer de ziekte van COVID-19 wordt vermoed), tussentijdse richtlijn gepubliceerd op 13 maart 2020.
3. Onderzoek naar de impact van het medicijn op de preventie van ernstige compilaties zoals Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS).

Gerandomiseerde, dubbelblinde, gecontroleerde parallelle studie van (mengsel van Hesperidine en Diosmin, Daflon®) voor de behandeling van nieuw gediagnosticeerde Covid-19-patiënten in Egypte.

Studieopzet Deze studie zal een dubbelblinde, gerandomiseerde, gecontroleerde parallelle studie zijn. Studiepopulatie en methoden. Deze studie zal worden uitgevoerd op patiënten die momenteel worden toegewezen aan aangewezen ziekenhuizen die zijn aangesloten bij het ministerie van Hoger Onderwijs. Patiënten zullen worden gerandomiseerd om ofwel Daflon te krijgen versus een controlegroep die standaardzorg zal krijgen. Patiënten In het ziekenhuis opgenomen patiënten met bevestigde COVID-19 zullen in deze studie worden opgenomen volgens de volgende criteria; Volwassene (18-65 jaar oud), beide geslachten, PCR-positief in nasofaryngeaal monster bij opname. Bovendien zullen de inclusiecriteria betrekking hebben op nieuw gediagnosticeerde asymptomatische patiënten of patiënten met een infectie van de bovenste luchtwegen (URTI) die zich presenteren met rhinitis, faryngitis of geïsoleerde lichte koorts en myalgie.

Geïnformeerde toestemming Alvorens te worden opgenomen in het onderzoek, zullen patiënten die aan de inclusiecriteria voldoen hun schriftelijke geïnformeerde toestemming geven om deel te nemen aan het onderzoek. Aan elke deelnemer wordt een informatiedocument overhandigd dat duidelijk de aard van het onderzoek en de risico's of bijwerkingen en voordelen van deelname aan het onderzoek aangeeft. De studie zal worden uitgevoerd in overeenstemming met de ethische normen van de Verklaring van Helsinki. Het protocol zal ter beoordeling en goedkeuring worden voorgelegd aan de Nationale Ethische Commissie. Deze proef wordt geregistreerd als klinische proef.

Procedure Patiënten zullen bij aanvang worden gezien voor inschrijving, initiële gegevensverzameling en behandeling op dag-0. De follow-up duur is 28 dagen of tot PCR negatief. Vanaf dag 1 krijgen patiënten elke dag gestandaardiseerde zorg of Daflon 1000 mg, driemaal daags gedurende 10 dagen. Symptomatische behandeling en antibiotica als maatregel om bacteriële superinfectie te voorkomen zullen worden verstrekt op basis van klinisch oordeel voor alle deelnemers. Alle deelnemers zullen worden onderworpen aan bloedmonsterafname bij baseline en na de follow-upperiode voor RT-PCR-assay en om de verandering in serum IL1β, TNF-α, hsCRP te evalueren. CBC zal worden gedaan voor het aantal lymfocyten. Veranderingen in ademhalingsfrequentie en PaO2 worden beoordeeld. Bovendien wordt het sterftecijfer berekend.

Uitkomsten Primaire uitkomstmaten: is RT-PCR negatief Secundaire uitkomstmaten omvatten: veranderingen in ademhalingsfrequentie en PaO2, verandering in serum IL1β, TNF-α, hsCRP, aantal lymfocyten, sterftecijfer en optreden van bijwerkingen.

Gerandomiseerde, dubbelblinde, gecontroleerde parallelle studie van (mengsel van Hesperidine en Diosmin, Daflon®) voor de behandeling van nieuw gediagnosticeerde Covid-19-patiënten in Egypte.

Onderzoeksopzet: Gerandomiseerde, dubbelblinde, gecontroleerde parallelle studie Onderzoekstype: Interventioneel klinisch onderzoek Inschrijving: 50 deelnemers in elke arm Toewijzing: Willekeurig Opdracht: Parallel Interventiemodel Beschrijving: Twee parallelle groepen willekeurig bevestigd Maskering: Dubbel (Deelnemer, Onderzoeker) Primair doel: Behandeling of werkzaamheid plus veiligheid Geschatte startdatum onderzoek: 01/07/2020 Geschatte primaire afrondingsdatum: 15/07/2020 Geschatte afrondingsdatum onderzoek: 01/10/2020 Arms

experimenteel:

1000 mg Daflon driemaal daags gedurende 10 dagen

Actieve vergelijker:

Standaardzorg geleverd in de isolatieziekenhuizen. Uitkomsten

Primaire uitkomstmaten:

PCR negatief

Secundaire uitkomstmaten:

Veranderingen in ademhalingsfrequentie Verandering in patiënten PaO2 Verandering in serum IL1β Verandering in serum TNF-α Verandering in serum hsCRP CBC voor lymfocytentelling Gemelde bijwerkingen Sterftecijfer

Inclusiecriteria:

Bevestigde gevallen van Covid-19 (alle door RT-PCR) Nieuw gediagnosticeerde asymptomatische patiënten of patiënten met een infectie van de bovenste luchtwegen (URTI) die rhinitis, faryngitis of geïsoleerde lichte koorts en myalgie zullen vertonen, Volwassene (18-65 jaar oud ) Beide geslachten

Uitsluitingscriteria:

Patiënten met bloedingsstoornissen Patiënten met een lage tot zeer lage bloeddruk Patiënten na een operatie Immuungecompromitteerde patiënten die medicijnen gebruiken bij screening