主要な心血管イベントの一次予防における糖衣の完全性の役割

デジタルオシロメトリック血圧計（TensioMed、Budapest Hungary、Ltd）を使用して各被験者の血圧を測定する。 各被験者は検査前に 25°C の静かな部屋で 30 分間休息します。 被験者が座った状態でカフを右腕に装着します。 高血圧の診断は、1) 3 回連続測定後の収縮期血圧 ≥140 mmHg/拡張期血圧 ≥90 mmHg、または 2) 参加者が降圧治療を受けている、に基づいて行われます。 さらに、サンプル中の糖尿病と高脂血症の存在を確認するために、絶食時の血液サンプルが採取されます。 具体的には、DM は、酵素 in vitro 検査 (Roche、自動化学臨床分析装置) によって測定される血漿グルコース ≥ 126 mg/dl、または抗糖尿病薬による治療のいずれかによって決定されます。 同様に、高脂血症は、比色分光光度法（Roche Diagnostics）によって測定された総コレステロール≧230 mg/dl、および/またはLDL≧160 mg/dl、および/またはTGs≧200 mg /dl、または脂質低下剤の使用によって定義されました。最初の検査時に行われたランニングガイドラインに従ってください。 さらに、喫煙者は、登録時に積極的に喫煙している参加者のみとみなされます。 また、冠動脈疾患の家族歴が陽性である場合は、65 歳未満の一親等女性親族または 55 歳未満の男性親族に冠動脈疾患があると定義されます。 BMIは、身長（m2）の二乗に対する体重（kg）の比として計算されます。 さらに、SCORE 推定システムを使用して、各参加者の 10 年間の心血管リスクを計算します。

民族に関する限り、海外で生まれ、少なくとも親が外国人である場合、またはギリシャで生まれたが両親が外国人である場合、その個人はギリシャ人とみなされません。 逆に、被験者と両親が同時にギリシャで生まれた場合、その被験者はギリシャ人とみなされました。

除外基準は、冠動脈疾患（CAD）、末梢動脈疾患（PAD）、心不全（HF）、脳卒中、肝不全または腎不全、活動性新生物およびコントロール不良のDMの病歴であり、Hba1C>7%と定義されます。

内皮糖衣の評価 Sideview Darkfield Imaging (Microscan、Glycocheck、Microvascular Health Solutions Inc.、ソルトレイクシティ、ユタ州、米国) を使用して、舌下微小血管構造の灌流境界領域 (PBR、μm 単位で測定) を定量化します。 簡単に説明すると、SDF カメラはヘモグロビン分子からの緑色反射発光ダイオード (LED) 光 (540 nm) を利用して、微小血管内の RBC の半径方向の変位を描写します。 カメラは舌の下に挿入され、直径が 5 μm ～ 25 μm の範囲の 3000 以上の血管セグメントを撮影します。 画像は Glycocheck ソフトウェアによって自動的に取得されます。 その後、システムは録画の品質をチェックし、さらに分析される有効なフレーム (60% を超えるコントラスト強調) を選択します。 RBC カラム幅と微小血管の合計灌流直径は、ソフトウェアによって高精度で推定されます。 次に、PBR は、式 [灌流直径 - RBC カラム幅]/2 によって計算されます。ソフトウェアは、直径 5 ～ 9 μm、10 ～ 19 μm、20 ～ 25 μm の血管の PBR と平均 5 ～ 25 μm も提供します。その結果、PBRは、RBC の浸透に対して脆弱であり、糖衣層の完全性と一致する血管内腔の外側領域を表します。 したがって、高い PBR 値は、バリア特性に影響を受けた損傷を受けた内皮糖衣の指標であると考えられ、これにより、RBC の高い時空間分布が可能になります。 一方、逆に、低い PBR 値は、堅牢な厚い糖衣層に関連付けられます。 全手順は約 3 分で完了し、高度な専門知識を必要とせず、オペレーターに依存せず、満足のいく再現性を備えているため、内皮糖衣機能の評価のための検証された技術として強く推奨されます。 ソフトウェアには充填率が 50% を超える血管セグメントのみが含まれるため、PBR 測定は血管セグメントの赤血球充填 (ヘマトクリット) とは独立しています。 したがって、血管セグメントは、21 ラインのマーカーのうち少なくとも 11 が赤血球の存在に関する陽性シグナルを持っている場合にのみ選択されます。 したがって、PBR 値はヘマトクリットとは独立しており、循環赤血球にとってアクセスしやすい糖衣の損傷を反映しています。

私たちの研究では、PBRの評価は、8時間の絶食とアルコールと喫煙の禁止、および検査前の48時間の薬物の一時中止後の9:00から11:00の間に行われます。

フォローアップ 私たちは、電話による連絡と外来診療所での予定された予約を通じて、研究コホートの募集から 6 年後にフォローアップを実施します。 簡単に言うと、再評価では、参加者またはその法定代理人が、無能力または死亡した場合に、何らかの原因による重大な心血管イベントまたは死亡の発生率を尋ねられます。 主要な有害事象の主な複合アウトカムは、死亡、心筋梗塞（ICD-10: DI20-22）、脳卒中（ICD-10: DI60-68; DG45）および心不全による入院（ICD-10: DI50-51; DG45）で構成されます。 DI42; DI11)。 前述の各事象は、病院の医療記録または主治医の手紙によって文書化され、適切な ICD10 を使用した国家安全保障電子記録によって確認されます。

統計分析

統計分析は、SPSS バージョン 25 (IBM SPSS Statistics, Inc.、イリノイ州シカゴ) および Stata バージョン 16 (StataCorp LP、テキサス州カレッジステーション) によって実行されます。 スケール変数は、正規性検定 Kolmogorov-Smirnov 検定および Shapiro-Wilk によって決定される正規分布の場合は平均 ±SD として、非正規分布の場合は中央値と四分位範囲として表示されます。 名目変数は度数とパーセンテージで表されます。 スケール変数は、示されている独立サンプルのスチューデント t 検定またはマン-ホイットニー検定を使用して比較され、カテゴリ変数は必要に応じてカイ二乗検定またはフィッシャーの直接確率検定を使用して比較されます。 さらに、患者は舌下微小血管直径 5 ～ 25 μm、5 ～ 9 μm、10 ～ 19 μm、および 20 ～ 25 μm の PBR の平均値に基づいて二分化されます。 コックス比例ハザード モデルは変数ごとに構築され、上記の PBR カテゴリの平均値のいずれかが、p 値 < 0.05 の有意水準で主要な心血管イベントまたは死亡の独立した予測因子として機能するかどうかを決定します。 累積イベント率は、平均 PBR 値が低い被験者と高い被験者のカプラン マイヤー生存分析を使用して計算されます。 これら 2 つのグループの比較には、合計イベントに関する時間データのログランク テストが使用されます。 Cox 比例ハザード モデルは、研究のエンドポイントに関連して、考えられるリスク要因ごとに構築されます。 推定ハザード比とそれぞれの 95% 信頼区間が得られます。 P 値 <0.05 は有意とみなされます。 多変量解析には、臨床的価値が証明されている因子、または単変量解析で p 値 ≤0.1 である因子が含まれます。 さらに、PBR を調整する前と後の多変量モデルのカイ 2 乗値を比較します。 p 値が 0.05 未満のカイ二乗変化は有意であると考えられます。 さらに、PBR によるリスク予測の改善を評価するために、正味再分類指数 (NRI) と Harrell の C を計算します。p 値 <0.05 は有意であると考えられます。