Glycocalyx-integritetens rolle i den primære forebyggelse af større kardiovaskulære hændelser

Blodtrykket måles hos hvert individ ved hjælp af et digitalt oscillometrisk blodtryksmåler (TensioMed, Budapest Hungary, Ltd). Hvert forsøgsperson hviler i et stille rum ved 25°C i 30 minutter før undersøgelsen. Manchetten placeres i højre arm, mens forsøgspersonen sidder. Diagnosen hypertension stilles på baggrund af: 1) systolisk blodtryk ≥140 mmHg/diastolisk blodtryk ≥90 mmHg efter 3 på hinanden følgende målinger eller 2) deltageren er i antihypertensiv behandling. Desuden udtages fastende blodprøver for at identificere tilstedeværelsen af ​​diabetes mellitus og hyperlipidæmi i vores prøve. Specifikt bestemmes DM ved enten plasmaglucose ≥ 126 mg/dl målt ved den enzymatiske in vitro-test (Roche, automatisk kemi-klinisk analysator) eller behandling med antidiabetiske midler. Tilsvarende blev hyperlipidæmi defineret ved enten total kolesterol ≥230 mg/dl og/eller LDL ≥160 mg/dl og/eller TGs ≥200 mg/dl målt ved kolorimetrisk spektrofotometri (Roche Diagnostics) eller brugen af ​​lipidsænkende midler i henhold til de løberetningslinjer, der blev afholdt under den indledende eksamen. Derudover betragtes rygere kun som de deltagere, der aktivt ryger på tilmeldingstidspunktet. Tilstedeværelsen af ​​positiv familiehistorie med koronararteriesygdom er også defineret som koronarsygdom hos en kvindelig slægtning i første grad før 65 år eller en mandlig slægtning før 55 års alderen. BMI beregnes som forholdet mellem vægt (kg) og kvadratet af højden (m2). Desuden bruger vi SCORE-estimeringssystemet til at beregne den 10-årige kardiovaskulære risiko for hver deltager.

For så vidt angår etnicitet, betragtes en person ikke som græsk, hvis han/hun er født i udlandet og også har mindst en udenlandsk forælder, eller han/hun er født i Grækenland, men begge forældre var udlændinge. Omvendt blev et emne betragtet som græsk, hvis de og begge forældre samtidigt var født i Grækenland.

Eksklusionskriterier er historien om koronararteriesygdom (CAD), perifer arteriel sygdom (PAD), hjertesvigt (HF), slagtilfælde, lever- eller nyresvigt, aktiv neoplasi og dårligt kontrolleret DM, defineret som Hba1C>7%.

ENDOTELIAL GLYCOCALYX EVALUERING Vi kvantificerer den perfunderede grænseregion (PBR, målt i μm) af den sublinguale mikrovaskulatur ved at bruge Sideview Darkfield Imaging (Microscan, Glycocheck, Microvascular Health Solutions Inc., Salt Lake City, UT, USA). Kort fortalt bruger SDF-kameraet grønt reflekteret lysemitterende diode (LED) lys (540 nm) fra hæmoglobinmolekyler til at afbilde de radiale forskydninger af RBC'er i mikrokarrene. Kameraet er indsat under tungen og fanger mere end 3000 vaskulære segmenter af kar med en diameter på fra 5 μm til 25 μm. Billederne opnås automatisk af Glycocheck-softwaren. Efterfølgende kontrollerer systemet kvaliteten af ​​optagelserne og vælger de gyldige frames (kontrastforbedring større end 60%), som skal analyseres yderligere. RBC-søjlebredden såvel som den totale perfunderede diameter af mikrokar estimeres af softwaren med høj nøjagtighed. Derefter beregnes PBR ved formlen [Perfused Diameter- RBC column width]/2. Softwaren giver også PBR for kar med diameter 5-9μm, 10-19μm, 20-25μm og middelværdien 5-25μm Som et resultat heraf PBR udtrykker det ydre område af karets lumen, der er sårbart over for RBC-penetration og er i overensstemmelse med integriteten af ​​glycocalyx-laget. Således betragtes høje PBR-værdier som en indikator for beskadiget endotelglykokalyx med påvirkede barriereegenskaber, hvilket tillader høj rumlig-temporal fordeling af RBC'er. På den anden side Omvendt er lave PBR-værdier forbundet med robust tykt glycocalyx-lag. Hele proceduren varer ca. 3 minutter, kræver ikke høj ekspertise, er operatøruafhængig, har tilfredsstillende reproducerbarhed og anbefales derfor stærkt som en valideret teknik til vurdering af endotel glycocalyx funktion. PBR-målingerne er uafhængige af røde blodlegemers fyldning af karsegmenterne (hæmatokrit), fordi softwaren kun inkluderer karsegmenter, der har en fyldningsprocent på mere end 50 %. Derfor vælges karsegmenter kun, når mindst 11 af de 21-linjede markører har et positivt signal for tilstedeværelsen af ​​en erytrocyt. Således er PBR-værdier uafhængige af hæmatokrit, hvilket afspejler en beskadiget glycocalyx, der er mere tilgængelig for cirkulerende erytrocytter.

I vores undersøgelse finder evalueringen af ​​PBR sted mellem kl. 9.00 og 11.00, efter 8 timers faste og afholdenhed fra alkohol og rygning samt midlertidig seponering af medicin i 48 timer før undersøgelsen også.

OPFØLGNING Vi udfører en opfølgning på vores studieårgang 6 år efter rekrutteringen via telefonisk kontakt og planlagt aftale i ambulatoriet. Kort fortalt, ved revurderingen bliver deltagerne eller deres juridiske repræsentanter - i tilfælde af manglende evne eller død - spurgt om forekomsten af ​​større kardiovaskulære hændelser eller dødsfald, der kan tilskrives en hvilken som helst årsag. Det primære sammensatte resultat af større uønskede hændelser består af død, myokardieinfarkt (ICD-10: DI20-22), slagtilfælde (ICD-10: DI60-68; DG45) og hospitalsindlæggelse for hjertesvigt (ICD-10: DI50-51; DI42; DI11). Hver af de nævnte hændelser er dokumenteret af hospitalsjournaler eller behandlende lægebreve og bekræftet af de nationale sikkerhedsjournaler ved hjælp af den relevante ICD10.

STATISTISK ANALYSE

Statistisk analyse udføres af SPSS version 25 (IBM SPSS Statistics, Inc., Chicago, IL) og Stata version 16 (StataCorp LP, College Station, TX). Skalavariabler præsenteres som middelværdi ±SD i tilfælde af normalfordeling, som bestemt ved normalitetstestene Kolmogorov-Smirnov-testen og Shapiro-Wilk, eller som medianer og interkvartilintervaller i tilfælde af ikke-normalfordeling. Nominelle variabler er udtrykt som frekvenser og procenter. Skalavariabler sammenlignes ved hjælp af uafhængige prøver Students t-tests eller Mann-Whitney-tests som angivet, hvorimod kategoriske variabler sammenlignes ved hjælp af Chi-square-tests eller Fishers eksakte tests, alt efter hvad der er relevant. Derudover dikotomiseres patienterne baseret på middelværdierne af PBR for den sublinguale mikrokardiameter 5-25 μm, 5-9 μm, 10-19 μm og 20-25 μm. Cox proportional hazard-modeller er bygget for hver variabel for at afgøre, om nogen af ​​middelværdierne af ovenstående PBR-kategorier kan tjene som en uafhængig prædiktor for større kardiovaskulære hændelser eller død ved et signifikansniveau på p-værdi <0,05. Kumulative hændelsesrater beregnes ved hjælp af Kaplan-Meier-overlevelsesanalysen for forsøgspersoner med lavere kontra højere gennemsnitlig PBR-værdi. Log-rangtesten for tid-til-hændelse data med hensyn til de samlede hændelser bruges til sammenligning af disse to grupper. Cox proportional hazard-modeller er bygget for hver mulig risikofaktor i forhold til undersøgelsens endepunkter. Estimerede fareforhold og deres respektive 95 % konfidensintervaller opnås. P-værdi <0,05 anses for signifikante. Multivariat analyse omfatter faktorer med dokumenteret klinisk værdi eller p-værdi ≤0,1 ved univariat analyse. Desuden sammenligner vi chi-kvadratværdier af multivariate modeller før og efter justering for PBR. Chi-kvadratændring med p-værdi <0,05 anses for signifikant. Desuden beregner vi nettoomklassificeringsindekset (NRI) og Harrell's C for at evaluere forbedring i risikoforudsigelse ved PBR og p-værdi <0,05 anses for signifikant.