Роль целостности Glycocalyx в первичной профилактике серьезных сердечно-сосудистых событий

Артериальное давление измеряют у каждого субъекта с помощью цифрового осциллометрического сфигмоманометра (TensioMed, Будапешт, Венгрия, ООО). Каждый испытуемый отдыхает в тихой комнате при 25°C в течение 30 минут перед исследованием. Манжета помещается в правую руку, в то время как субъект сидит. Диагноз артериальной гипертензии ставится на основании: 1) систолического артериального давления ≥140 мм рт.ст./диастолического артериального давления ≥90 мм рт.ст. после 3 последовательных измерений или 2) участник получает антигипертензивное лечение. Кроме того, образцы крови натощак берутся для выявления наличия сахарного диабета и гиперлипидемии в нашем образце. В частности, сахарный диабет определяется либо по уровню глюкозы в плазме ≥ 126 мг/дл, измеренному ферментативным тестом in vitro (Roche, автоматический биохимический клинический анализатор), либо по лечению противодиабетическими средствами. Точно так же гиперлипидемия определялась либо по общему холестерину ≥230 мг/дл, и/или по ЛПНП ≥160 мг/дл, и/или по ТГ ≥200 мг/дл, измеренным с помощью колориметрической спектрофотометрии (Roche Diagnostics), либо при использовании гиполипидемических средств. в соответствии с текущими инструкциями, проведенными во время первичного осмотра. Кроме того, курильщиками считаются только те участники, которые активно курили на момент зачисления. Также наличие положительного семейного анамнеза по ишемической болезни сердца определяется как ишемическая болезнь у родственника первой степени родства женского пола в возрасте до 65 лет или родственника мужского пола в возрасте до 55 лет. ИМТ рассчитывается как отношение веса (кг) к квадрату роста (м2). Кроме того, мы используем систему оценки SCORE для расчета 10-летнего сердечно-сосудистого риска для каждого участника.

Что касается этнической принадлежности, человек не считается греком, если он / она родился за границей, а также имеет хотя бы одного родителя-иностранца или он / она родился в Греции, но оба родителя были иностранцами. И наоборот, подданный считался греком, если он и одновременно оба родителя родились в Греции.

Критериями исключения являются ишемическая болезнь сердца (ИБС), заболевание периферических артерий (ЗПА), сердечная недостаточность (СН), инсульт, печеночная или почечная недостаточность, активная неоплазия и плохо контролируемый СД, определяемый как Hba1C>7%.

ОЦЕНКА ЭНДОТЕЛИАЛЬНОГО ГЛИКОКАЛИКСА Мы количественно определяем перфузируемую пограничную область (PBR, измеренную в мкм) подъязычной микроциркуляторной системы с помощью визуализации бокового обзора в темном поле (Microscan, Glycocheck, Microvascal Health Solutions Inc., Солт-Лейк-Сити, Юта, США). Вкратце, камера SDF использует зеленый отраженный свет (540 нм) светодиодов (LED) от молекул гемоглобина для изображения радиальных смещений эритроцитов внутри микрососудов. Камера вводится под язык и фиксирует более 3000 сосудистых сегментов сосудов диаметром от 5 мкм до 25 мкм. Изображения получаются автоматически с помощью программного обеспечения Glycocheck. После этого система проверяет качество записи и выбирает допустимые кадры (увеличение контрастности более 60%), которые будут подвергнуты дальнейшему анализу. Ширина колонки эритроцитов, а также общий перфузионный диаметр микрососудов оцениваются программой с высокой точностью. Затем рассчитывается PBR по формуле [Диаметр перфузии - ширина колонки эритроцитов]/2. Программное обеспечение также предоставляет PBR сосудов диаметром 5–9 мкм, 10–19 мкм, 20–25 мкм и средним значением 5–25 мкм. выражает внешнюю область просвета сосудов, которая уязвима для проникновения эритроцитов и соответствует целостности слоя гликокаликса. Таким образом, высокие значения PBR рассматриваются как индикатор поврежденного эндотелиального гликокаликса с нарушенными барьерными свойствами, что обеспечивает высокое пространственно-временное распределение эритроцитов. С другой стороны, наоборот, низкие значения PBR связаны с прочным толстым слоем гликокаликса. Вся процедура длится около 3 минут, не требует высокой квалификации, не зависит от оператора, имеет удовлетворительную воспроизводимость и, таким образом, настоятельно рекомендуется в качестве валидированного метода для оценки функции эндотелиального гликокаликса. Измерения PBR не зависят от заполнения сегментов сосудов красными кровяными тельцами (гематокрит), поскольку программное обеспечение включает только те сегменты сосудов, процент заполнения которых превышает 50%. Следовательно, сегменты сосудов выбираются только тогда, когда по крайней мере 11 из 21-линейных маркеров имеют положительный сигнал присутствия эритроцита. Таким образом, значения PBR не зависят от гематокрита, отражая поврежденный гликокаликс, более доступный для циркулирующих эритроцитов.

В нашем исследовании оценка ПБР проводится с 9:00 до 11:00, а также после 8-часового голодания и воздержания от алкоголя и курения, а также временного прекращения приема лекарственных препаратов за 48 ч до исследования.

ПОСЛЕДУЮЩИЕ НАБЛЮДЕНИЯ Мы проводим последующее наблюдение за нашей исследуемой группой через 6 лет после набора посредством телефонного контакта и планового визита в амбулаторную клинику. Вкратце, при повторной оценке у участников или их законных представителей - в случае недееспособности или смерти - спрашивают о частоте серьезных сердечно-сосудистых событий или смерти по любой причине. Первичный комбинированный исход серьезных нежелательных явлений состоит из смерти, инфаркта миокарда (МКБ-10: DI20-22), инсульта (МКБ-10: DI60-68; DG45) и госпитализации по поводу сердечной недостаточности (МКБ-10: DI50-51; ДИ42; ДИ11). Каждое из названных событий документируется больничными медицинскими записями или письмами лечащих врачей и подтверждается электронными записями органов национальной безопасности с использованием соответствующей МКБ-10.

СТАТИСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

Статистический анализ выполняется с помощью SPSS версии 25 (IBM SPSS Statistics, Inc., Чикаго, Иллинойс) и Stata версии 16 (StataCorp LP, College Station, TX). Масштабные переменные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение в случае нормального распределения, определенное с помощью критериев нормальности Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка, или в виде медиан и межквартильных размахов в случае ненормального распределения. Номинальные переменные выражаются в виде частот и процентов. Масштабные переменные сравниваются с использованием независимых выборок, критерия Стьюдента или критерия Манна-Уитни, как указано, тогда как категориальные переменные сравниваются с использованием критерия хи-квадрат или точного критерия Фишера, в зависимости от ситуации. Кроме того, пациентов делят на дихотомию на основе средних значений PBR для диаметра подъязычного микрососуда 5–25 мкм, 5–9 мкм, 10–19 мкм и 20–25 мкм. Модели пропорционального риска Кокса строятся для каждой переменной, чтобы решить, может ли какое-либо из средних значений вышеуказанных категорий PBR служить независимым предиктором основных сердечно-сосудистых событий или смерти при уровне значимости значения p<0,05. Совокупная частота событий рассчитывается с использованием анализа выживаемости Каплана-Мейера для субъектов с более низким или более высоким средним значением PBR. Для сравнения этих двух групп используется критерий логарифмического ранга для данных о времени до события по отношению к общему количеству событий. Модели пропорциональных рисков Кокса строятся для каждого возможного фактора риска в зависимости от конечных точек исследования. Получены оценочные отношения рисков и их соответствующие 95% доверительные интервалы. Значение P<0,05 считается значимым. Многомерный анализ включает факторы с доказанной клинической ценностью или значением p ≤0,1 при одномерном анализе. Более того, мы сравниваем значения хи-квадрат многомерных моделей до и после поправки на PBR. Изменение хи-квадрат со значением p<0,05 считается значимым. Кроме того, мы рассчитываем чистый индекс реклассификации (NRI) и C Харрелла, чтобы оценить улучшение прогнозирования риска с помощью PBR, и значение p<0,05 считается значимым.