주요 심혈관 사건의 일차 예방에서 Glycocalyx 무결성의 역할

디지털 오실로메트릭 혈압계(TensioMed, Budapest Hungary, Ltd)를 사용하여 각 피험자에서 혈압을 측정합니다. 각 피험자는 검사 전 30분 동안 25°C의 조용한 방에서 휴식을 취합니다. 대상자가 앉은 상태에서 커프는 오른팔에 위치합니다. 고혈압의 진단은 1) 3회 연속 측정 후 수축기 혈압 ≥140mmHg/이완기 혈압 ≥90mmHg 또는 2) 참여자가 항고혈압 치료를 받고 있는 경우를 기준으로 합니다. 또한 우리 샘플에서 당뇨병과 고지혈증의 존재를 확인하기 위해 공복 혈액 샘플을 채취합니다. 구체적으로, DM은 효소 시험관내 시험(Roche, 자동 화학 임상 분석기)에 의해 측정된 혈장 포도당 ≥ 126 mg/dl 또는 항당뇨병제로의 치료에 의해 결정된다. 유사하게, 고지혈증은 비색 분광광도법(Roche Diagnostics)으로 측정한 총 콜레스테롤 ≥230 mg/dl 및/또는 LDL ≥160 mg/dl 및/또는 TG ≥200 mg/dl 또는 지질 저하제의 사용에 의해 정의되었습니다. 초기 시험 중에 개최된 실행 지침에 따라. 또한 흡연자는 등록 시점에 적극적으로 흡연하는 참가자로만 간주됩니다. 또한 관상동맥질환의 가족력이 양성이면 65세 이전의 직계 여성 또는 55세 이전의 남성 친족에서 관상동맥질환으로 정의한다. BMI는 키(m2)의 제곱에 대한 체중(kg)의 비율로 계산됩니다. 또한 SCORE 추정 시스템을 사용하여 각 참가자의 10년 심혈관 위험도를 계산합니다.

민족성에 관한 한 개인이 외국에서 태어나고 최소한 외국인 부모가 있거나 그리스에서 태어 났지만 부모가 모두 외국인인 경우 개인은 그리스인으로 간주되지 않습니다. 반대로 두 부모 모두 그리스에서 태어났다면 주제는 그리스인으로 간주되었습니다.

제외 기준은 Hba1C > 7%로 정의되는 관상 동맥 질환(CAD), 말초 동맥 질환(PAD), 심부전(HF), 뇌졸중, 간 또는 신부전, 활동성 신생물 및 잘 조절되지 않는 DM의 병력입니다.

내피 글리코칼릭스 평가 Sideview Darkfield Imaging(Microscan, Glycocheck, Microvascular Health Solutions Inc., Salt Lake City, UT, USA)을 사용하여 설하 미세혈관의 관류 경계 영역(PBR, μm 단위로 측정)을 정량화합니다. 간단히 말해, SDF 카메라는 헤모글로빈 분자의 녹색 반사 발광 다이오드(LED) 조명(540nm)을 활용하여 미세혈관 내 RBC의 방사형 변위를 묘사합니다. 카메라는 혀 아래에 삽입되어 직경이 5μm에서 25μm 범위인 혈관의 3000개 이상의 혈관 세그먼트를 캡처합니다. 이미지는 Glycocheck 소프트웨어에 의해 자동으로 획득됩니다. 그 후 시스템은 녹화 품질을 확인하고 유효한 프레임(60% 이상의 대비 향상)을 선택하여 추가로 분석합니다. RBC 열 너비와 미세혈관의 총 관류 직경은 소프트웨어에 의해 높은 정확도로 추정됩니다. 그러면 PBR은 [Perfused Diameter-RBC column width]/2 공식으로 계산됩니다. 소프트웨어는 또한 직경이 5-9μm, 10-19μm, 20-25μm이고 평균 5-25μm인 혈관의 PBR을 제공합니다. RBC 침투에 취약하고 glycocalyx 층의 무결성과 일치하는 혈관 내강의 외부 영역을 나타냅니다. 따라서, 높은 PBR 값은 영향을 받은 장벽 특성을 가진 손상된 내피 글리코칼릭스의 지표로 간주되며, 이는 RBC의 높은 시공간적 분포를 허용합니다. 반면에 낮은 PBR 값은 견고하고 두꺼운 glycocalyx 층과 관련이 있습니다. 전체 절차는 약 3분 동안 지속되며 높은 전문성이 필요하지 않고 작업자 독립적이며 만족스러운 재현성이 있으므로 내피 glycocalyx 기능 평가를 위한 검증된 기술로 적극 권장됩니다. PBR 측정은 혈관 세그먼트(헤마토크리트)의 적혈구 충전과 무관합니다. 소프트웨어에는 충전 비율이 50% 이상인 혈관 세그먼트만 포함되기 때문입니다. 따라서 혈관 분절은 21개 라인 마커 중 적어도 11개가 적혈구의 존재에 대한 양성 신호를 가질 때만 선택됩니다. 따라서 PBR 값은 적혈구 용적률과 독립적이며 순환 적혈구 에 더 쉽게 접근할 수 있는 손상된 glycocalyx를 반영합니다.

우리의 연구에서 PBR의 평가는 8시간 금식과 금주 및 금주 후, 검사 전 48시간 동안 약물을 일시적으로 중단한 후 9시에서 11시 사이에 이루어집니다.

후속 조치 우리는 외래 진료소에서 전화 연락 및 예정된 약속을 통해 모집 후 6년 후에 연구 코호트에 대한 후속 조치를 수행합니다. 간단히 말해서, 재평가에서 참가자 또는 법적 대리인은 무능력 또는 사망의 경우 주요 심혈관 사건의 발생률 또는 모든 원인으로 인한 사망에 대해 질문을 받습니다. 주요 부작용의 주요 복합 결과는 사망, 심근경색(ICD-10: DI20-22), 뇌졸중(ICD-10: DI60-68; DG45) 및 심부전으로 인한 입원(ICD-10: DI50-51; DI42, DI11). 이름이 지정된 각 이벤트는 병원 의료 기록 또는 담당 의사의 서신으로 문서화되며 적절한 ICD10을 사용하여 국가 보안 전자 기록으로 확인됩니다.

통계 분석

통계 분석은 SPSS 버전 25(IBM SPSS Statistics, Inc., Chicago, IL) 및 Stata 버전 16(StataCorp LP, College Station, TX)에 의해 수행됩니다. 척도 변수는 정규성 테스트 Kolmogorov-Smirnov 테스트 및 Shapiro-Wilk에 의해 결정된 대로 정규 분포의 경우 평균 ±SD로 표시되거나 비정규 분포의 경우 중앙값 및 사분위수 범위로 표시됩니다. 명목 변수는 빈도와 백분율로 표현됩니다. 척도 변수는 표시된 대로 독립 표본 스튜던트 t 검정 또는 Mann-Whitney 검정을 사용하여 비교하는 반면, 범주형 변수는 적절하게 카이 제곱 검정 또는 피셔의 정확 검정을 사용하여 비교합니다. 또한 설하 미세혈관 직경 5~25μm, 5~9μm, 10~19μm, 20~25μm에 대한 PBR의 평균값을 기준으로 환자를 이분화했다. Cox 비례 위험 모델은 위의 PBR 범주의 평균 값이 p 값<0.05의 유의 수준에서 주요 심혈관 사건 또는 사망의 독립적인 예측 변수 역할을 할 수 있는지 여부를 결정하기 위해 각 변수에 대해 작성됩니다. 누적 사건 발생률은 평균 PBR 값이 더 낮거나 더 높은 피험자에 대해 Kaplan-Meier 생존 분석을 사용하여 계산됩니다. 총 이벤트에 대한 이벤트까지의 시간 데이터에 대한 로그 순위 테스트는 이 두 그룹의 비교에 사용됩니다. Cox 비례 위험 모델은 연구 종료점과 관련하여 가능한 각 위험 요소에 대해 구축됩니다. 추정된 위험 비율과 각각의 95% 신뢰 구간을 얻습니다. P 값<0.05는 유의한 것으로 간주됩니다. 다변량 분석에는 입증된 임상적 가치가 있거나 단변량 분석에서 p 값이 0.1 이하인 요인이 포함됩니다. 또한 PBR 조정 전후의 다변량 모델의 ​​카이제곱 값을 비교합니다. p 값이 0.05 미만인 카이 제곱 변화는 유의한 것으로 간주됩니다. 또한 순 재분류 지수(NRI)와 Harrell's C를 계산하여 PBR에 의한 위험 예측의 개선을 평가하고 p value<0.05가 유의한 것으로 간주됩니다.