El papel de la integridad del glucocáliz en la prevención primaria de eventos cardiovasculares mayores

La presión arterial se mide en cada sujeto con la ayuda de un esfigmomanómetro oscilométrico digital (TensioMed, Budapest Hungría, Ltd). Cada sujeto descansa en una habitación tranquila a 25°C durante 30 minutos antes del examen. El manguito se coloca en el brazo derecho, mientras el sujeto está sentado. El diagnóstico de hipertensión se realiza sobre la base de: 1) presión arterial sistólica ≥140 mmHg/presión arterial diastólica ≥90 mmHg después de 3 mediciones consecutivas o 2) el participante está recibiendo tratamiento antihipertensivo. Además se extraen muestras de sangre en ayunas para identificar la presencia de diabetes mellitus e hiperlipidemia en nuestra muestra. En concreto, la DM está determinada por la glucosa plasmática ≥ 126 mg/dl medida por el ensayo enzimático in vitro (Roche, analizador clínico químico automático) o por el tratamiento con antidiabéticos . De igual forma, la hiperlipidemia se definió por Colesterol Total ≥230 mg/dl, y/o LDL ≥160 mg/dl, y/o TG ≥200 mg/dl medidos por espectrofotometría colorimétrica (Roche Diagnostics) o por el uso de hipolipemiantes. de acuerdo con las pautas de ejecución mantenidas durante el examen inicial. Además, se consideran fumadores solo aquellos participantes que fuman activamente en el momento de la inscripción. Asimismo, la presencia de antecedentes familiares positivos de enfermedad arterial coronaria se define como enfermedad coronaria en un familiar femenino de primer grado antes de los 65 años o en un familiar masculino antes de los 55 años. El IMC se calcula como la relación entre el peso (kg) y el cuadrado de la altura (m2). Además, utilizamos el sistema de estimación SCORE para calcular el riesgo cardiovascular a 10 años de cada participante.

En lo que respecta a la etnia, una persona no se considera griega si nació en el extranjero y también tiene al menos un padre extranjero o si nació en Grecia pero ambos padres eran extranjeros. A la inversa, un sujeto se consideraba griego si él y simultáneamente ambos padres habían nacido en Grecia.

Son criterios de exclusión los antecedentes de enfermedad arterial coronaria (EAC), enfermedad arterial periférica (EAP), insuficiencia cardiaca (IC), ictus, insuficiencia hepática o renal, neoplasia activa y DM mal controlada, definida como Hba1C>7%.

EVALUACIÓN DEL GLUCOCALIX ENDOTELIAL Cuantificamos la región límite perfundida (PBR, medida en μm) de la microvasculatura sublingual mediante Sideview Darkfield Imaging (Microscan, Glycocheck, Microvascular Health Solutions Inc., Salt Lake City, UT, EE. UU.). Brevemente, la cámara SDF utiliza luz de diodo emisor de luz (LED) verde reflejada (540 nm) de las moléculas de hemoglobina para representar los desplazamientos radiales de los glóbulos rojos dentro de los microvasos. La cámara se inserta debajo de la lengua y captura más de 3000 segmentos vasculares de vasos con un diámetro que oscila entre 5 μm y 25 μm. Las imágenes son obtenidas automáticamente por el software Glycocheck. Posteriormente, el sistema comprueba la calidad de las grabaciones y selecciona los fotogramas válidos (mejora de contraste superior al 60 %), que se van a analizar más a fondo. El software calcula con gran precisión el ancho de la columna de RBC, así como el diámetro total perfundido de los microvasos. Luego, el PBR se calcula mediante la fórmula [Diámetro perfundido: ancho de columna de RBC]/2. expresa el área exterior de la luz de los vasos que es vulnerable a la penetración de glóbulos rojos y es consistente con la integridad de la capa de glucocáliz. Por lo tanto, los valores altos de PBR se consideran un indicador de glucocáliz endotelial dañado con propiedades de barrera afectadas, lo que permite una alta distribución espacio-temporal de los glóbulos rojos. Por otro lado, a la inversa, los valores bajos de PBR están asociados con una capa de glucocáliz gruesa y robusta. El procedimiento completo dura aproximadamente 3 minutos, no requiere mucha experiencia, es independiente del operador, tiene una reproducibilidad satisfactoria y, por lo tanto, es muy recomendable como técnica validada para la evaluación de la función del glucocáliz endotelial. Las mediciones de PBR son independientes del llenado de glóbulos rojos de los segmentos de vasos (hematocrito), porque el software solo incluye segmentos de vasos que tienen un porcentaje de llenado de más del 50%. Por lo tanto, los segmentos de vasos solo se seleccionan cuando al menos 11 de los 21 marcadores de línea tienen una señal positiva para la presencia de un eritrocito. Por lo tanto, los valores de PBR son independientes del hematocrito, lo que refleja un glucocáliz dañado que es más accesible para los eritrocitos circulantes.

En nuestro estudio, la evaluación de la PBR se realiza entre las 9:00 y las 11:00 horas, después de 8 horas de ayuno y abstinencia de alcohol y tabaco y suspensión temporal de medicamentos también durante 48 horas antes del examen.

SEGUIMIENTO Realizamos un seguimiento de nuestra cohorte de estudio 6 años después del reclutamiento mediante contacto telefónico y cita programada en la consulta externa. Brevemente, en la reevaluación se pregunta a los participantes oa sus representantes legales -en caso de incapacidad o muerte- la incidencia de eventos cardiovasculares mayores o muerte atribuida a cualquier causa. El resultado compuesto primario de eventos adversos mayores consiste en muerte, infarto de miocardio (ICD-10: DI20-22), accidente cerebrovascular (ICD-10: DI60-68; DG45) y hospitalización por insuficiencia cardíaca (ICD-10: DI50-51; ED42; ED11). Cada uno de los eventos antes mencionados está documentado por los registros médicos del hospital o las cartas de los médicos que lo atienden y confirmado por los registros electrónicos de seguridad nacional utilizando el ICD10 apropiado.

ANÁLISIS ESTADÍSTICO

El análisis estadístico se realiza mediante SPSS versión 25 (IBM SPSS Statistics, Inc., Chicago, IL) y Stata versión 16 (StataCorp LP, College Station, TX). Las variables de escala se presentan como media ± DE en caso de distribución normal, según lo determinado por las pruebas de normalidad de Kolmogorov-Smirnov y Shapiro-Wilk, o como medianas y rangos intercuartílicos en caso de distribución no normal. Las variables nominales se expresan como frecuencias y porcentajes. Las variables de escala se comparan mediante pruebas t de Student o pruebas de Mann-Whitney para muestras independientes, según se indique, mientras que las variables categóricas se comparan mediante pruebas de chi-cuadrado o pruebas exactas de Fisher, según corresponda. Además, los pacientes se dicotomizan en función de los valores medios de PBR para el diámetro de los microvasos sublinguales de 5-25 μm, 5-9 μm, 10-19 μm y 20-25 μm. Los modelos de riesgos proporcionales de Cox se construyen para cada variable para decidir si cualquiera de los valores medios de las categorías PBR anteriores puede servir como predictor independiente de eventos cardiovasculares importantes o muerte en un nivel significativo de valor de p <0,05. Las tasas acumulativas de eventos se calculan utilizando el análisis de supervivencia de Kaplan-Meier para sujetos con un valor PBR medio más bajo frente a uno más alto. La prueba de rango logarítmico para los datos de tiempo hasta el evento con respecto al total de eventos se usa para comparar estos dos grupos. Los modelos de riesgos proporcionales de Cox se construyen para cada posible factor de riesgo en relación con los criterios de valoración del estudio. Se obtienen las razones de riesgo estimadas y sus respectivos intervalos de confianza al 95%. Los valores de p<0,05 se consideran significativos. El análisis multivariado incluye factores con valor clínico comprobado o valor de p ≤0,1 en el análisis univariado. Además, comparamos los valores de chi-cuadrado de modelos multivariados antes y después de ajustar por PBR. El cambio de chi cuadrado con un valor de p <0,05 se considera significativo. Además, calculamos el índice de reclasificación neta (NRI) y la C de Harrell para evaluar la mejora en la predicción del riesgo por PBR y el valor de p <0,05 se considera significativo.