Rola integralności glikokaliksu w pierwotnej profilaktyce poważnych zdarzeń sercowo-naczyniowych

Ciśnienie krwi mierzono u każdego osobnika za pomocą cyfrowego sfigmomanometru oscylometrycznego (TensioMed, Budapest Węgry, Ltd). Każdy badany odpoczywa w cichym pomieszczeniu w temperaturze 25°C przez 30 minut przed badaniem. Mankiet zakłada się na prawe ramię, podczas gdy badany siedzi. Rozpoznanie nadciśnienia tętniczego stawia się na podstawie: 1) ciśnienia skurczowego ≥140 mmHg/ciśnienia rozkurczowego ≥90 mmHg po 3 kolejnych pomiarach lub 2) uczestnik przyjmuje leki hipotensyjne. Ponadto pobierane są próbki krwi na czczo w celu wykrycia obecności cukrzycy i hiperlipidemii w naszej próbce. Konkretnie, DM określa się albo na podstawie stężenia glukozy w osoczu ≥ 126 mg/dl mierzonego za pomocą enzymatycznego testu in vitro (Roche, automatyczny analizator kliniczny chemii) albo leczenia lekami przeciwcukrzycowymi. Podobnie hiperlipidemię definiowano na podstawie stężenia cholesterolu całkowitego ≥230 mg/dl i/lub LDL ≥160 mg/dl i/lub TG ≥200 mg/dl mierzonego metodą spektrofotometrii kolorymetrycznej (Roche Diagnostics) lub stosowania środków obniżających stężenie lipidów zgodnie z wytycznymi biegowymi, które odbyły się podczas badania wstępnego. Ponadto za palaczy uważa się tylko tych uczestników, którzy aktywnie palą w momencie rejestracji. Również obecność dodatniego wywiadu rodzinnego w kierunku choroby niedokrwiennej serca definiuje się jako chorobę wieńcową u krewnej kobiety pierwszego stopnia przed ukończeniem 65 roku życia lub krewnego mężczyzny przed ukończeniem 55 roku życia. BMI oblicza się jako stosunek masy ciała (kg) do kwadratu wzrostu (m2). Ponadto używamy systemu szacowania SCORE do obliczania 10-letniego ryzyka sercowo-naczyniowego dla każdego uczestnika.

Jeśli chodzi o pochodzenie etniczne, osoba nie jest uważana za Greka, jeśli urodziła się za granicą i ma co najmniej jednego z rodziców cudzoziemca lub urodziła się w Grecji, ale oboje rodzice byli obcokrajowcami. I odwrotnie, podmiot był uważany za Greka, jeśli on i oboje rodzice urodzili się w Grecji.

Kryteria wykluczenia to choroba wieńcowa (CAD), choroba tętnic obwodowych (PAD), niewydolność serca (HF), udar mózgu, niewydolność wątroby lub nerek, aktywna choroba nowotworowa i źle kontrolowana cukrzyca, zdefiniowana jako Hba1C>7%.

OCENA GLIKOKALIKSU ŚRÓDBŁONKOWEGO Oceniamy ilościowo perfundowany obszar graniczny (PBR, mierzony w μm) mikrokrążenia podjęzykowego za pomocą Sideview Darkfield Imaging (Microscan, Glycocheck, Microvascular Health Solutions Inc., Salt Lake City, UT, USA). W skrócie, kamera SDF wykorzystuje zielone odbite światło diody elektroluminescencyjnej (LED) (540 nm) z cząsteczek hemoglobiny do zobrazowania promieniowych przemieszczeń erytrocytów w mikronaczyniach. Kamera jest wkładana pod język i rejestruje ponad 3000 segmentów naczyniowych naczyń o średnicy od 5 μm do 25 μm. Obrazy są uzyskiwane automatycznie przez oprogramowanie Glycocheck. Następnie system sprawdza jakość nagrań i wybiera prawidłowe klatki (wzmocnienie kontrastu większe niż 60%), które będą dalej analizowane. Szerokość kolumny KKCz, jak również całkowita średnica perfundowanych mikronaczyń jest szacowana przez oprogramowanie z dużą dokładnością. Następnie PBR jest obliczane według wzoru [Średnica perfundowana - szerokość kolumny RBC]/2. Oprogramowanie zapewnia również PBR naczyń o średnicy 5-9μm, 10-19μm, 20-25μm oraz średnią 5-25μm W rezultacie PBR wyraża zewnętrzny obszar światła naczynia, który jest podatny na penetrację przez erytrocyty i jest zgodny z integralnością warstwy glikokaliksu. Zatem wysokie wartości PBR są uważane za wskaźnik uszkodzonego glikokaliksu śródbłonka z zaburzonymi właściwościami barierowymi, co pozwala na wysoką przestrzenno-czasową dystrybucję erytrocytów. Z drugiej strony, niskie wartości PBR są związane z solidną grubą warstwą glikokaliksu. Cała procedura trwa około 3 minut, nie wymaga dużej wiedzy specjalistycznej, jest niezależna od operatora, ma zadowalającą powtarzalność i dlatego jest wysoce zalecana jako sprawdzona technika oceny funkcji glikokaliksu śródbłonka. Pomiary PBR są niezależne od wypełnienia segmentów naczyń krwinkami czerwonymi (hematokryt), ponieważ oprogramowanie uwzględnia tylko te segmenty naczyń, których procent wypełnienia przekracza 50%. W związku z tym segmenty naczynia są wybierane tylko wtedy, gdy co najmniej 11 z 21-liniowych markerów ma pozytywny sygnał na obecność erytrocytów. Zatem wartości PBR są niezależne od hematokrytu, odzwierciedlając uszkodzony glikokaliks, który jest bardziej dostępny dla krążących erytrocytów.

W naszym badaniu ocena PBR odbywa się między godziną 9:00 a 11:00, po 8 godzinach postu i abstynencji od alkoholu i tytoniu oraz czasowego odstawienia leków na 48 godzin przed badaniem.

FOLLOW UP Dokonujemy kontynuacji naszej badanej kohorty po 6 latach od rekrutacji poprzez kontakt telefoniczny i planowaną wizytę w poradni. W skrócie, podczas ponownej oceny uczestnicy lub ich przedstawiciele prawni – w przypadku niezdolności do pracy lub śmierci – proszeni są o podanie częstości występowania poważnych zdarzeń sercowo-naczyniowych lub zgonu z dowolnej przyczyny. Główny złożony punkt końcowy głównych zdarzeń niepożądanych obejmuje zgon, zawał mięśnia sercowego (ICD-10: DI20-22), udar (ICD-10: DI60-68; DG45) i hospitalizację z powodu niewydolności serca (ICD-10: DI50-51; DI42; DI11). Każde z wyżej wymienionych zdarzeń jest udokumentowane szpitalną dokumentacją medyczną lub listami lekarzy prowadzących oraz potwierdzone przez elektroniczną dokumentację bezpieczeństwa narodowego z wykorzystaniem odpowiedniego ICD10.

ANALIZA STATYSTYCZNA

Analizę statystyczną przeprowadza SPSS wersja 25 (IBM SPSS Statistics, Inc., Chicago, IL) i Stata wersja 16 (StataCorp LP, College Station, TX). Zmienne skali przedstawiono jako średnią ±SD w przypadku rozkładu normalnego, wyznaczoną testem normalności Kołmogorowa-Smirnowa i Shapiro-Wilka lub jako mediany i rozstępy międzykwartylowe w przypadku rozkładu innego niż normalny. Zmienne nominalne wyrażono jako częstości i procenty. Zmienne ilościowe są porównywane przy użyciu prób niezależnych, testów t Studenta lub testów Manna-Whitneya, jak wskazano, podczas gdy zmienne kategoryczne są porównywane przy użyciu testów chi-kwadrat lub dokładnych testów Fishera, odpowiednio. Ponadto pacjentów dzieli się na dychotomie w oparciu o średnie wartości PBR dla podjęzykowej średnicy mikronaczyń 5-25 μm, 5-9 μm, 10-19 μm i 20-25 μm. Modele proporcjonalnego hazardu Coxa są budowane dla każdej zmiennej, aby zdecydować, czy którakolwiek z wartości średnich z powyższych kategorii PBR może służyć jako niezależny predyktor poważnych zdarzeń sercowo-naczyniowych lub zgonu na poziomie istotności p<0,05. Skumulowane częstości zdarzeń są obliczane przy użyciu analizy przeżycia Kaplana-Meiera dla pacjentów z niższą lub wyższą średnią wartością PBR. Test log-rank dla danych czasu do zdarzenia w odniesieniu do całkowitej liczby zdarzeń jest używany do porównania tych dwóch grup. Modele proporcjonalnego hazardu Coxa są budowane dla każdego możliwego czynnika ryzyka w odniesieniu do punktów końcowych badania. Otrzymuje się oszacowane współczynniki ryzyka i odpowiadające im 95% przedziały ufności. Wartość P <0,05 uważa się za znaczącą. Analiza wieloczynnikowa obejmuje czynniki o udowodnionej wartości klinicznej lub wartość p ≤0,1 w analizie jednoczynnikowej. Ponadto porównujemy wartości chi-kwadrat modeli wielowymiarowych przed i po dostosowaniu do PBR. Zmiana chi-kwadrat przy wartości p<0,05 jest uważana za znaczącą. Ponadto obliczamy wskaźnik reklasyfikacji netto (NRI) i C Harrella, aby ocenić poprawę przewidywania ryzyka przez PBR, a wartość p <0, 05 uważa się za istotną.