Le rôle de l'intégrité du glycocalyx dans la prévention primaire des événements cardiovasculaires majeurs

La tension artérielle est mesurée chez chaque sujet à l'aide d'un sphygmomanomètre oscillométrique numérique (TensioMed, Budapest Hongrie, Ltd). Chaque sujet se repose dans une pièce calme à 25°C pendant 30 minutes avant l'examen. Le brassard est placé dans le bras droit, tandis que le sujet est assis. Le diagnostic d'hypertension est posé sur la base de : 1) pression artérielle systolique ≥ 140 mmHg/pression artérielle diastolique ≥ 90 mmHg après 3 mesures consécutives ou 2) le participant reçoit un traitement antihypertenseur. De plus, des échantillons de sang à jeun sont prélevés pour identifier la présence de diabète sucré et d'hyperlipidémie dans notre échantillon. Plus précisément, le DM est déterminé soit par une glycémie ≥ 126 mg/dl mesurée par le test enzymatique in vitro (Roche, analyseur clinique de chimie automatique) soit par un traitement avec des agents antidiabétiques . De même, l'hyperlipidémie était définie soit par un cholestérol total ≥ 230 mg/dl, et/ou des LDL ≥ 160 mg/dl, et/ou des TG ≥ 200 mg/dl mesurés par la spectrophotométrie colorimétrique (Roche Diagnostics) ou l'utilisation d'agents hypolipémiants selon les directives de course tenues lors de l'examen initial. De plus, seuls les participants qui fument activement au moment de l'inscription sont considérés comme fumeurs. En outre, la présence d'antécédents familiaux positifs de maladie coronarienne est définie comme une maladie coronarienne chez une parente au premier degré avant 65 ans ou un parent masculin avant 55 ans. L'IMC est calculé comme le rapport du poids (kg) au carré de la taille (m2). De plus, nous utilisons le système d'estimation SCORE pour calculer le risque cardiovasculaire à 10 ans pour chaque participant.

En ce qui concerne l'ethnicité, un individu n'est pas considéré comme grec s'il est né à l'étranger et a également au moins un parent étranger ou s'il est né en Grèce mais que ses deux parents étaient étrangers. Inversement, un sujet était considéré comme grec si lui et simultanément ses deux parents étaient nés en Grèce.

Les critères d'exclusion sont les antécédents de maladie coronarienne (CAD), de maladie artérielle périphérique (MAP), d'insuffisance cardiaque (IC), d'accident vasculaire cérébral, d'insuffisance hépatique ou rénale, de néoplasie active et de DM mal contrôlé, défini comme Hba1C> 7 %.

ÉVALUATION DU GLYCOCALYX ENDOTHÉLIAL Nous quantifions la région limite perfusée (PBR, mesurée en μm) de la microvascularisation sublinguale en utilisant Sideview Darkfield Imaging (Microscan, Glycocheck, Microvascular Health Solutions Inc., Salt Lake City, UT, USA) . En bref, la caméra SDF utilise la lumière verte réfléchie de la diode électroluminescente (LED) (540 nm) des molécules d'hémoglobine pour représenter les déplacements radiaux des globules rouges dans les microvaisseaux. La caméra est insérée sous la langue et capture plus de 3000 segments vasculaires de vaisseaux d'un diamètre allant de 5 μm à 25 μm. Les images sont obtenues automatiquement par le logiciel Glycocheck. Ensuite, le système vérifie la qualité des enregistrements et sélectionne les images valides (amélioration du contraste supérieure à 60%), qui vont être analysées plus en détail . La largeur de la colonne RBC, ainsi que le diamètre total perfusé des microvaisseaux sont estimés par le logiciel avec une grande précision. Ensuite, le PBR est calculé par la formule [Perfused Diameter- RBC column width]/2. exprime la zone externe de la lumière des vaisseaux qui est vulnérable à la pénétration des globules rouges et correspond à l'intégrité de la couche de glycocalyx. Ainsi, des valeurs élevées de PBR sont considérées comme un indicateur de glycocalyx endothélial endommagé avec des propriétés de barrière affectées, ce qui permet une distribution spatio-temporelle élevée des globules rouges. D'autre part, à l'inverse, de faibles valeurs de PBR sont associées à une couche de glycocalyx épaisse et robuste. L'ensemble de la procédure dure environ 3 minutes, ne nécessite pas d'expertise élevée, est indépendant de l'opérateur, a une reproductibilité satisfaisante et est donc fortement recommandé comme technique validée pour l'évaluation de la fonction du glycocalyx endothélial . Les mesures PBR sont indépendantes du remplissage en globules rouges des segments de vaisseaux (hématocrite), car le logiciel n'inclut que les segments de vaisseaux qui ont un pourcentage de remplissage supérieur à 50 %. Par conséquent, les segments de vaisseaux ne sont sélectionnés que lorsqu'au moins 11 des marqueurs de 21 lignes ont un signal positif pour la présence d'un érythrocyte. Ainsi, les valeurs de PBR sont indépendantes de l'hématocrite, reflétant un glycocalyx endommagé qui est plus accessible aux érythrocytes circulants .

Dans notre étude, l'évaluation de la PBR a lieu entre 9h00 et 11h00, après 8 heures de jeûne et d'abstinence d'alcool et de tabac et arrêt temporaire des médicaments pendant 48 h avant l'examen également.

SUIVI Nous effectuons un suivi de notre cohorte d'étude 6 ans après le recrutement via contact téléphonique et rendez-vous planifié à la clinique externe. Brièvement, lors de la réévaluation, il est demandé aux participants ou à leurs représentants légaux - en cas d'incapacité ou de décès - l'incidence des événements cardiovasculaires majeurs ou des décès attribués à une cause quelconque. Le principal résultat composite des événements indésirables majeurs comprend le décès, l'infarctus du myocarde (ICD-10 : DI20-22), l'accident vasculaire cérébral (ICD-10 : DI60-68 ; DG45) et l'hospitalisation pour insuffisance cardiaque (ICD-10 : DI50-51 ; DI42; DI11). Chacun des événements susmentionnés est documenté par les dossiers médicaux de l'hôpital ou les lettres des médecins traitants et confirmé par les dossiers électroniques de la sécurité nationale à l'aide de la CIM10 appropriée.

ANALYSES STATISTIQUES

L'analyse statistique est effectuée par SPSS version 25 (IBM SPSS Statistics, Inc., Chicago, IL) et Stata version 16 (StataCorp LP, College Station, TX). Les variables d'échelle sont présentées sous forme de moyenne ± SD en cas de distribution normale, telle que déterminée par les tests de normalité de Kolmogorov-Smirnov et de Shapiro-Wilk, ou sous forme de médianes et d'intervalles interquartiles en cas de distribution non normale. Les variables nominales sont exprimées en fréquences et en pourcentages. Les variables d'échelle sont comparées à l'aide d'échantillons indépendants de tests t de Student ou de tests de Mann-Whitney, comme indiqué, tandis que les variables catégorielles sont comparées à l'aide de tests du chi carré ou de tests exacts de Fisher, selon le cas. De plus, les patients sont dichotomisés en fonction des valeurs moyennes de PBR pour le diamètre des microvaisseaux sublinguaux 5-25 μm, 5-9 μm, 10-19 μm et 20-25 μm . Des modèles de risque proportionnel de Cox sont construits pour chaque variable afin de décider si l'une des valeurs moyennes des catégories PBR ci-dessus peut servir de prédicteur indépendant d'événements cardiovasculaires majeurs ou de décès à un niveau de signification de valeur p <0,05. Les taux d'événements cumulés sont calculés à l'aide de l'analyse de survie de Kaplan-Meier pour les sujets ayant une valeur PBR moyenne inférieure ou supérieure. Le test du log-rank pour les données de temps jusqu'à l'événement par rapport au nombre total d'événements est utilisé pour la comparaison de ces deux groupes. Des modèles de risque proportionnel de Cox sont construits pour chaque facteur de risque possible en relation avec les critères d'évaluation de l'étude. Les rapports de risque estimés et leurs intervalles de confiance respectifs à 95 % sont obtenus. Les valeurs P<0,05 sont considérées comme significatives. L'analyse multivariée inclut des facteurs ayant une valeur clinique prouvée ou une valeur p ≤ 0,1 lors de l'analyse univariée. De plus, nous comparons les valeurs du chi carré des modèles multivariés avant et après ajustement pour le PBR. Le changement du chi carré avec une valeur de p<0,05 est considéré comme significatif. De plus, nous calculons l'indice de reclassification nette (NRI) et le C de Harrell pour évaluer l'amélioration de la prédiction du risque par PBR et la valeur p <0,05 est considérée comme significative.