早産のバイオマーカーとしての母体血中の羊膜細胞

標的：

この研究の目的は、1) 妊婦の循環胎児羊膜絨毛膜細胞 (ACM 細胞) を特徴付け、2) 早産のリスクを含む羊膜絨毛膜機能障害のバイオマーカーとして機能できるかどうかを調査することです。

バックグラウンド：

世界的に、早産（1,500万。 年間) は、5 歳未満の子供の死亡率の主な原因です (100 万. 年間）および罹患率。 重要な経路には、早期分娩収縮 (PLC)、胎児膜の早期分娩前破裂 (PPROM)、および子癇前症および胎児発育制限による医原性分娩が含まれます。

分娩時に、胎児の羊膜絨毛膜は細胞老化を起こし、胎児の羊膜絨毛膜細胞 (ACM 細胞) を母体循環に放出します。 同様の機能は、PPROM の場合にも見られると予想されます。 オーフス大学は、ARCEDI Biotech Aps およびガルベストンのテキサス大学医学部と協力して、特定の胎児膜細胞マーカー、つまり ACM 細胞によって高度に発現される特定のタンパク質を特定しました。 これらの同定されたタンパク質に特異的な市販の抗体を使用して、母体の血液から ACM 細胞を分離できます。 予備研究は、循環 ACM 細胞が妊娠の後半に存在するが、妊娠の前半には存在しないことを示しています。

研究者らは免疫組織化学によって、特定の抗体が胎児膜中の ACM 細胞を識別できること、およびそれらが母体循環から ACM 細胞を分離するためのプラットフォームになりうることを確認したいと考えています。

材料および方法：

調査員は、ACM 細胞に対するさまざまな特異的抗体を使用して、磁気活性化セルソーティング (MACS) によって母体の血液から ACM 細胞を分離します。 濃縮された ACM 細胞は、蛍光標識サイトケラチンおよびビメンチン抗体を使用して染色され、蛍光活性化細胞選別 (FACS) によって個別に選別されます。 胎児由来 ACM 細胞の真の識別は、Short Tandem Repeat (SRT) 分析によって行われます。

最高のパフォーマンスを発揮する抗体は、正期産、妊娠 12、20、28、34 週、および分娩時および分娩後の妊婦に対するパイロット研究に基づいて選択されます。 各抗体のタンパク質発現および特異性は、胎児膜、胎盤組織、および子宮内の胎盤床からの生検に対する免疫組織化学および明視野顕微鏡検査によって確認されます。

確立されたプロトコルを使用して、分娩収縮および膜の自然破裂の有無にかかわらず満期産の妊婦、妊娠 34 週前に PLC を有する女性、女性妊娠 34 週前の PPROM と妊娠期間 25+0 ～ 37 の対照群。

展望:

将来的には、この結果により、切迫早産の診断と治療が改善され、世界中の何百万人もの子供の死亡と罹患を防ぐことが期待されています。