Amniokorioniske membranceller i mors blod som en biomarkør for prematur fødsel

Mål:

Målet med studien er 1) å karakterisere sirkulerende føtale amniokorioniske membranceller (ACM-celler) hos gravide kvinner og 2) å undersøke om de kan fungere som biomarkører for amniokorionisk membrandysfunksjon, inkludert risiko for prematur fødsel.

Bakgrunn:

Globalt, prematur fødsel (15 mill. per år) er den viktigste årsaken til barnedødelighet under 5 år (1 mill. per år) og sykelighet. Viktige veier inkluderer premature fødselskontraksjoner (PLC), Preterm Prelabor Rupture of the Fetal Membranes (PPROM) og iatrogen fødsel på grunn av preeklampsi og fostervekstbegrensning.

Ved fødsel gjennomgår fosterets amniokorioniske membran en cellulær senescens og fjerner fosterets amniokorioniske membranceller (ACM-celler) til mors sirkulasjon. Lignende funksjoner forventes å bli sett i tilfeller med PPROM. I samarbeid med ARCEDI Biotech Aps og University of Texas Medical Branch i Galveston, har Aarhus Universitet identifisert spesifikke føtale membrancellemarkører, det vil si spesifikke proteiner sterkt uttrykt av ACM-cellene. Kommersielt tilgjengelige antistoffer spesifikke for disse identifiserte proteinene kan brukes til å isolere ACM-celler fra mors blod. De foreløpige studiene indikerer at sirkulerende ACM-celler er tilstede i andre halvdel av svangerskapet, men ikke i første halvdel av svangerskapet.

Etterforskerne ønsker å bekrefte ved immunhistokjemi at spesifikke antistoffer kan identifisere ACM-celler i fosterets membraner, og at de kan være en plattform for å isolere ACM-celler fra mors sirkulasjon.

Materialer og metoder:

Etterforskerne vil isolere ACM-celler fra mors blod ved Magnetic Activating Cell Sorting (MACS) ved å bruke forskjellige spesifikke antistoffer for ACM-celler. De anrikede ACM-cellene vil bli farget med fluorescensmerket cytokeratin og vimentin-antistoffer, og sortert individuelt ved fluorescensaktivert cellesortering (FACS). Den sanne identifiseringen av de fosteravledede ACM-cellene vil bli gjort ved hjelp av Short Tandem Repeat (SRT) analyse.

De antistoffene som fungerer best vil bli valgt ut basert på pilotstudier på gravide ved termin og i svangerskapsuke 12, 20, 28 og 34, samt ved fødsel og fødsel. Proteinekspresjonen og spesifisiteten til hvert antistoff vil bli bekreftet ved immunhistokjemi og lysfeltmikroskopi på biopsier fra fosterets membraner, placentavev og placentasengen i livmoren.

Den etablerte protokollen vil bli brukt til å evaluere antall ACM-celler i mors blod i normale og patologiske svangerskap på tverrsnittskohorter av termingravide kvinner med og uten fødselssammentrekninger og spontan ruptur av membraner, kvinner med PLC før 34 ukers svangerskap, kvinner med PPROM før 34 ukers svangerskap, og en kontrollgruppe ved svangerskapsalder 25+0 til 37.

Perspektiver:

I fremtiden forventes resultatene å forbedre diagnostikken og behandlingen av truende prematur fødsel, og dermed forhindre dødelighet og sykelighet hos millioner av barn over hele verden.