Cellule della membrana amniocoriale nel sangue materno come biomarcatore per la nascita pretermine

Scopo:

Lo scopo dello studio è 1) caratterizzare le cellule circolanti della membrana amniocoriale fetale (cellule ACM) nelle donne in gravidanza e 2) indagare se possono funzionare come biomarcatori della disfunzione della membrana amniocoriale, incluso il rischio di parto pretermine.

Sfondo:

A livello globale, la nascita pretermine (15 mln. all'anno) è la prima causa di mortalità infantile sotto i 5 anni (1 mln. all'anno) e morbilità. Percorsi importanti includono le contrazioni del travaglio pretermine (PLC), la rottura pretermine del travaglio delle membrane fetali (PPROM) e il parto iatrogeno dovuto a preeclampsia e restrizione della crescita fetale.

Al momento del travaglio, la membrana amniocoriale fetale subisce una senescenza cellulare e libera le cellule della membrana amniocoriale fetale (cellule ACM) nella circolazione materna. Funzionalità simili dovrebbero essere viste nei casi con PPROM. In collaborazione con ARCEDI Biotech Aps e l'Università del Texas Medical Branch a Galveston, l'Università di Aarhus ha identificato specifici marcatori cellulari di membrana fetale, ovvero specifiche proteine ​​altamente espresse dalle cellule ACM. Gli anticorpi disponibili in commercio specifici per queste proteine ​​identificate possono essere utilizzati per isolare le cellule ACM dal sangue materno. Gli studi preliminari indicano che le cellule ACM circolanti sono presenti nella seconda metà della gravidanza ma non nella prima metà della gravidanza.

I ricercatori vogliono confermare mediante immunoistochimica che anticorpi specifici possono identificare le cellule ACM nelle membrane fetali e che possono essere una piattaforma per isolare le cellule ACM dalla circolazione materna.

Materiali e metodi:

Gli investigatori isoleranno le cellule ACM dal sangue materno mediante Magnetic Activating Cell Sorting (MACS) utilizzando diversi anticorpi specifici per le cellule ACM. Le cellule ACM arricchite saranno colorate utilizzando anticorpi citocheratina e vimentina marcati con fluorescenza e ordinate individualmente mediante Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS). La vera identificazione delle cellule ACM derivate dal feto sarà effettuata mediante analisi Short Tandem Repeat (SRT).

Gli anticorpi con le migliori prestazioni saranno selezionati sulla base di studi pilota su donne in gravidanza a termine e nelle settimane 12, 20, 28 e 34 di gestazione, nonché durante il travaglio e il post partum. L'espressione proteica e la specificità di ciascun anticorpo saranno confermate mediante immunoistochimica e microscopia in campo chiaro su biopsie delle membrane fetali, del tessuto placentare e del letto placentare nell'utero.

Il protocollo stabilito verrà utilizzato per valutare il numero di cellule ACM nel sangue materno in gravidanze normali e patologiche su coorti trasversali di donne in gravidanza a termine con e senza contrazioni del travaglio e rottura spontanea delle membrane, donne con PLC prima delle 34 settimane di gestazione, donne con PPROM prima della 34a settimana di gestazione e un gruppo di controllo all'età gestazionale da 25+0 a 37 anni.

Prospettive:

In futuro, i risultati dovrebbero migliorare la diagnostica e il trattamento della minaccia di parto pretermine, prevenendo così la mortalità e la morbilità in milioni di bambini in tutto il mondo.