Amniokorioniske membranceller i moderens blod som en biomarkør for for tidlig fødsel

Sigte:

Formålet med undersøgelsen er 1) at karakterisere cirkulerende føtale amniokorioniske membranceller (ACM-celler) hos gravide kvinder og 2) at undersøge om de kan fungere som biomarkører for amniokorionmembrandysfunktion, herunder risiko for for tidlig fødsel.

Baggrund:

På verdensplan er præterm fødsel (15 mio. om året) er den største årsag til børnedødelighed under 5 år (1 mio. om året) og sygelighed. Vigtige veje omfatter præterm fødselskontraktioner (PLC), Preterm Prelabor Rupture of the Fetal Membranes (PPROM) og iatrogen levering på grund af præeklampsi og føtal vækstrestriktion.

Ved fødslen gennemgår den føtale amniokorioniske membran en cellulær senescens og afgiver føtale amniokorioniske membranceller (ACM-celler) til moderens kredsløb. Lignende funktioner forventes at blive set i tilfælde med PPROM. Aarhus Universitet har i samarbejde med ARCEDI Biotech Aps og University of Texas Medical Branch i Galveston identificeret specifikke føtale membrancellemarkører, det vil sige specifikke proteiner, der udtrykkes højt af ACM-cellerne. Kommercielt tilgængelige antistoffer, der er specifikke for disse identificerede proteiner, kan anvendes til at isolere ACM-celler fra moderens blod. De foreløbige undersøgelser indikerer, at cirkulerende ACM-celler er til stede i anden halvdel af graviditeten, men ikke i første halvdel af graviditeten.

Forskerne ønsker ved immunhistokemi at bekræfte, at specifikke antistoffer kan identificere ACM-celler i fosterets membraner, og at de kan være en platform til at isolere ACM-celler fra moderens kredsløb.

Materialer og metoder:

Efterforskerne vil isolere ACM-celler fra moderens blod ved Magnetic Activating Cell Sorting (MACS) ved hjælp af forskellige specifikke antistoffer for ACM-celler. De berigede ACM-celler vil blive farvet ved hjælp af fluorescensmærkede cytokeratin- og vimentin-antistoffer og sorteret individuelt ved hjælp af Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS). Den sande identifikation af de føtalt afledte ACM-celler vil blive udført ved Short Tandem Repeat (SRT) analyse.

De antistoffer, der klarer sig bedst, vil blive udvalgt på baggrund af pilotundersøgelser af gravide kvinder ved termin og i svangerskabsuge 12, 20, 28 og 34 samt ved fødslen og efter fødslen. Proteinekspressionen og specificiteten af ​​hvert antistof vil blive bekræftet ved immunhistokemi og lysfeltmikroskopi på biopsier fra fosterets membraner, placentavæv og placentalejet i livmoderen.

Den etablerede protokol vil blive brugt til at evaluere antallet af ACM-celler i moderens blod i normale og patologiske graviditeter på tværsnitskohorter af fuldbårne gravide kvinder med og uden veer og spontane brud på membraner, kvinder med PLC før 34 ugers graviditet, kvinder med PPROM før 34 ugers svangerskab, og en kontrolgruppe ved svangerskabsalder 25+0 til 37.

Perspektiver:

I fremtiden forventes resultaterne at forbedre diagnostikken og behandlingen af ​​truende for tidlig fødsel og dermed forhindre dødelighed og sygelighed hos millioner af børn verden over.