Células da membrana amniocoriônica no sangue materno como um biomarcador para parto prematuro

Mirar:

O objetivo do estudo é 1) caracterizar as células circulantes da membrana amniocoriônica fetal (células ACM) em mulheres grávidas e 2) investigar se elas podem funcionar como biomarcadores de disfunção da membrana amniocoriônica, incluindo risco de parto prematuro.

Fundo:

Globalmente, o nascimento prematuro (15 milhões. por ano) é a principal causa de mortalidade infantil em menores de 5 anos (1 milhão. por ano) e morbidade. Vias importantes incluem contrações de trabalho de parto prematuro (PLC), ruptura pré-termo das membranas fetais pré-trabalho de parto (PPROM) e parto iatrogênico devido à pré-eclâmpsia e restrição de crescimento fetal.

No trabalho de parto, a membrana amniocoriônica fetal sofre uma senescência celular e libera células da membrana amniocoriônica fetal (células ACM) para a circulação materna. Recursos semelhantes são esperados em casos com PPROM. Em colaboração com a ARCEDI Biotech Aps e a Divisão Médica da Universidade do Texas em Galveston, a Universidade de Aarhus identificou marcadores específicos de células da membrana fetal, ou seja, proteínas específicas altamente expressas pelas células ACM. Anticorpos disponíveis comercialmente específicos para essas proteínas identificadas podem ser usados ​​para isolar células ACM do sangue materno. Os estudos preliminares indicam que as células ACM circulantes estão presentes na segunda metade da gravidez, mas não na primeira metade da gravidez.

Os investigadores querem confirmar por imuno-histoquímica que anticorpos específicos podem identificar células ACM nas membranas fetais e que podem ser uma plataforma para isolar células ACM da circulação materna.

Materiais e métodos:

Os investigadores irão isolar células ACM do sangue materno por Seleção de Células de Ativação Magnética (MACS) usando diferentes anticorpos específicos para células ACM. As células ACM enriquecidas serão coradas usando citoqueratina marcada com fluorescência e anticorpos vimentina, e classificadas individualmente por Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS). A verdadeira identificação das células ACM derivadas do feto será feita por análise de Short Tandem Repeat (SRT).

Os anticorpos com melhor desempenho serão selecionados com base em estudos piloto em gestantes a termo e nas semanas 12, 20, 28 e 34 de gestação, bem como no trabalho de parto e pós-parto. A expressão proteica e a especificidade de cada anticorpo serão confirmadas por imuno-histoquímica e microscopia de campo claro em biópsias das membranas fetais, tecido placentário e leito placentário no útero.

O protocolo estabelecido será utilizado para avaliar o número de células ACM no sangue materno em gestações normais e patológicas em coortes transversais de gestantes a termo com e sem contrações de trabalho de parto e ruptura espontânea de membranas, mulheres com PLC antes de 34 semanas de gestação, mulheres com PPROM antes de 34 semanas de gestação e um grupo controle na idade gestacional de 25+0 a 37.

Perspectivas:

No futuro, espera-se que os resultados melhorem o diagnóstico e o tratamento da ameaça de parto prematuro, evitando assim a mortalidade e morbidade em milhões de crianças em todo o mundo.