Células de membrana amniocoriónica en sangre materna como biomarcador de parto prematuro

Apuntar:

El objetivo del estudio es 1) caracterizar las células de la membrana amniocoriónica fetal (células ACM) circulantes en mujeres embarazadas y 2) investigar si pueden funcionar como biomarcadores de disfunción de la membrana amniocoriónica, incluido el riesgo de parto prematuro.

Fondo:

A nivel mundial, el parto prematuro (15 mill. por año) es la principal causa de mortalidad de niños menores de 5 años (1 mill. por año) y morbilidad. Las vías importantes incluyen las contracciones del trabajo de parto prematuro (PLC), la rotura prematura de las membranas fetales antes del trabajo de parto (PPROM) y el parto iatrogénico debido a la preeclampsia y la restricción del crecimiento fetal.

Durante el trabajo de parto, la membrana amniocoriónica fetal sufre una senescencia celular y arroja células de la membrana amniocoriónica fetal (células ACM) a la circulación materna. Se espera que se vean características similares en los casos con PPROM. En colaboración con ARCEDI Biotech Aps y la rama médica de la Universidad de Texas en Galveston, la Universidad de Aarhus ha identificado marcadores celulares de membrana fetal específicos, es decir, proteínas específicas altamente expresadas por las células ACM. Los anticuerpos disponibles comercialmente específicos para estas proteínas identificadas pueden usarse para aislar células ACM de la sangre materna. Los estudios preliminares indican que las células ACM circulantes están presentes en la segunda mitad del embarazo pero no en la primera mitad del embarazo.

Los investigadores quieren confirmar mediante inmunohistoquímica que anticuerpos específicos pueden identificar células ACM en las membranas fetales y que pueden ser una plataforma para aislar células ACM de la circulación materna.

Materiales y métodos:

Los investigadores aislarán las células ACM de la sangre materna mediante la clasificación de células de activación magnética (MACS) utilizando diferentes anticuerpos específicos para las células ACM. Las células ACM enriquecidas se tiñerán con anticuerpos de citoqueratina y vimentina marcados con fluorescencia y se clasificarán individualmente mediante clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS). La verdadera identificación de las células ACM derivadas del feto se realizará mediante un análisis de repetición corta en tándem (SRT).

Los anticuerpos que mejor funcionen serán seleccionados en base a estudios piloto en mujeres embarazadas a término y en las semanas de gestación 12, 20, 28 y 34, así como en trabajo de parto y posparto. La expresión proteica y la especificidad de cada anticuerpo se confirmarán mediante inmunohistoquímica y microscopía de campo claro en biopsias de las membranas fetales, el tejido placentario y el lecho placentario en el útero.

El protocolo establecido se utilizará para evaluar el número de células ACM en la sangre materna en embarazos normales y patológicos en cohortes transversales de mujeres embarazadas a término con y sin contracciones de parto y ruptura espontánea de membranas, mujeres con PLC antes de las 34 semanas de gestación, mujeres con RPM antes de las 34 semanas de gestación, y un grupo control a la edad gestacional de 25+0 a 37.

Perspectivas:

En el futuro, se espera que los resultados mejoren el diagnóstico y el tratamiento de la amenaza de parto prematuro, previniendo así la mortalidad y la morbilidad de millones de niños en todo el mundo.