重症の COVID-19 患者における DNA 損傷

病院の文書からのデータは、すべての患者について記録されます: 人口統計学的データ、臨床データ (ホロウィッツ指数、回内位の必要性、開放手技、ECMO への接続、循環状態およびその他の臓器機能)、検査データ: 炎症活動のパラメーターCOVID-19 固有のマーカー (白血球数、CRP、IL-6、フェリチン、プロカルシトニン、D ダイマーによる血球数)。

この研究では、ICU への入院時 (D1)、2 日後 (D3)、および 7 日目 (D7) に、リンパ球の分離と酸化的 DNA 損傷のモニタリングのための標準的な方法を超えて、分析目的で 4 ml のヘパリン化末梢血が収集されます。入院の。 同じ血液サンプルを使用して、赤血球膜中の EPA および DHA オメガ 3 を測定します。 同じ間隔と頻度で、10 ml の尿が 8-ヒドロキシ-2-デオキシカノシン (8-OHdG) の測定のために収集されるため、合計 30 ml の尿が分析目的で収集されます。

分析処理の詳細: 末梢血リンパ球の損傷は、DNA 切断についてはアルカリ COMET ASSAY 法を使用して評価され、酸化塩基の検出には特定の酵素、酸化ピリミジンおよびホルムアミドピリミジン DNA の検出にはエンドヌクレアーゼ III (ENDO III) を使用して修正された COMET ASSAY が使用されます。酸化プリンの検出のためのグリコシラーゼ (FPG)。 白血球修復能力は、患者のリンパ球および定義済みの DNA 損傷を伴う HeLa 細胞の抽出物を使用する修正 COMET ASSAY を使用して決定されます。 患者の尿中の 8-ヒドロキシ-2-デオキシカノシン (8-OHdG) DNA 損傷の程度は、ELISA によって 8-OHdG の濃度を測定することによって決定されます。