重症 COVID-19 患者的 DNA 损伤

将记录所有患者的医院文件数据：人口统计数据、临床数据（Horowitz 指数、旋前位的必要性、开放操作、与 ECMO 的连接、循环状态和其他器官功能）、实验室数据：炎症活动参数和 COVID-19 特异性标记物（血细胞计数与白细胞分类计数、CRP、IL-6、铁蛋白、降钙素原、D-二聚体）。

在这项研究中，将收集 4 毫升肝素化外周血用于分析目的，超出淋巴细胞分离和氧化性 DNA 损伤监测的标准做法，在进入 ICU 时 (D1)、2 天后 (D3) 和第 7 天 (D7)住院的。 同一血样将用于测定红细胞膜中的 EPA 和 DHA omega-3。 以相同的时间间隔和频率，将收集 10 ml 尿液用于测定 8-hydroxy-2-deoxyquanosine (8-OHdG)，因此总共收集 30 ml 尿液用于分析目的。

分析处理的细节：外周血淋巴细胞损伤将使用用于 DNA 断裂的碱性 COMET 分析方法和使用特定酶检测氧化碱基、核酸内切酶 III (ENDO III) 检测氧化嘧啶和甲酰胺嘧啶 DNA 的改良 COMET 分析进行评估糖基化酶 (FPG) 用于检测氧化嘌呤。 白细胞修复能力将使用改良的 COMET 分析来确定，该分析使用患者淋巴细胞和具有明确 DNA 损伤的 HeLa 细胞的提取物。 患者尿液中 8-hydroxy-2-deoxyquanosine (8-OHdG) DNA 损伤的程度将通过 ELISA 测定 8-OHdG 的浓度来确定。