Dommages à l'ADN chez les patients COVID-19 gravement malades

Les données de la documentation hospitalière seront enregistrées pour tous les patients : données démographiques, données cliniques (indice de Horowitz, nécessité de la position de pronation, manœuvres d'ouverture, connexion à l'ECMO, état de la circulation et des autres fonctions des organes), données de laboratoire : paramètres de l'activité inflammatoire et marqueurs spécifiques COVID-19 (numération sanguine avec numération différentielle des leucocytes, CRP, IL-6, ferritine, procalcitonine, D-dimères).

Dans l'étude, 4 ml de sang périphérique hépariné seront prélevés à des fins d'analyse au-delà de la pratique standard pour l'isolement des lymphocytes et le suivi des dommages oxydatifs de l'ADN lors de l'admission à l'USI (J1), après 2 jours (J3) et au jour 7 (J7) de l'hospitalisation. Le même échantillon de sang sera utilisé pour déterminer l'EPA et le DHA oméga-3 dans les membranes érythrocytaires. Aux mêmes intervalles et fréquence, 10 ml d'urine seront collectés pour la détermination de la 8-hydroxy-2-désoxyquanosine (8-OHdG), soit un total de 30 ml d'urine sera collecté à des fins d'analyse.

Détails pour le traitement analytique : les dommages aux lymphocytes du sang périphérique seront évalués à l'aide de la méthode alcaline COMET ASSAY pour la rupture de l'ADN et du COMET ASSAY modifié à l'aide d'enzymes spécifiques pour la détection des bases oxydées, l'endonucléase III (ENDO III) pour la détection des pyrimidines oxydées et de l'ADN formamidopyrimidine glycosylase (FPG) pour la détection des purines oxydées. La capacité de réparation des leucocytes sera déterminée à l'aide d'un COMET ASSAY modifié, qui utilise des extraits de lymphocytes de patients et de cellules HeLa présentant des dommages définis à l'ADN. L'étendue des dommages à l'ADN de la 8-hydroxy-2-désoxyquanosine (8-OHdG) dans l'urine des patients sera déterminée en déterminant la concentration de 8-OHdG par ELISA.