Devysers NGS ベースのキメリズム アッセイを使用した腎移植後のドナー由来の無細胞 DNA の検出に関する研究。

毎年 40 ～ 60 人の患者が、カロリンスカ大学病院で生体ドナー (LD) による腎移植を受けています。 移植の前に、これらの患者とそのドナーは、免疫学的適合性について調査されます。 これには、細胞傷害性およびフローサイトメトリーによるクロスマッチ、HLA タイピング、およびパネル反応性 HLA 抗体 (PRA) の存在の可能性の判定が含まれます。 通常、これらの検査は腎移植の 2 ～ 3 か月前に実施されます。 患者が特定の生体ドナーからの移植を受け入れると、移植前に本研究への参加に関心があるかどうかを尋ねられます。 患者とドナーが同意する場合は、適切なサンプル コレクション チューブ (無細胞 BCT チューブ) を使用して、移植前に 15 mL の血液を採取します。 このサンプルは、特定の遺伝子マーカーについて患者とドナーをスクリーニングするために使用されます。 さらに、移植前のサンプルは、各患者のHLA抗体の有無を決定するために使用されます。 現在の研究に最大50人の患者を含めることを目指しています。

移植後最初の 24 ～ 48 時間の間に、エキソソームなどの無細胞粒子を含む dd-cfDNA の存在の可能性を測定するために、患者からさらに 2 つのサンプル (10 mL) が収集されます。 すべてのサンプルから無細胞 DNA および RNA が抽出され、凍結保存され、後で配列決定されます。 移植と免疫抑制療法の開始に続いて、分析用のサンプルを週に 1 回、最大 3 か月間取得します。 収集されたすべてのサンプルは、すぐに分析されるか、将来の分析のために凍結されます。 保存された凍結サンプルは、後の時点で、dd-cfDNA を測定するための配列決定や、市販のビーズ技術 (Luminex または Immucor) を使用した HLA 抗体の存在の分析などの分子技術を使用して、解凍、バッチ処理、分析することができます。 これらのアッセイの結果は、専用のデータベースに追加されます。 得られた検査結果は、移植片の生存率、患者の生存率、臨床的および無症状の拒絶反応などを含む臨床結果や、他の検査データ (例: 移植片の病理学的検査、臨床化学、免疫抑制剤の濃度などから得られます)。