Devysers NGS 기반 Chimerism Assay를 이용한 신장 이식 후 공여자 유래 무세포 DNA 검출에 관한 연구.

매년 40-60명의 환자가 카롤린스카 대학 병원에서 살아있는 기증자(LD)와 함께 신장 이식을 받습니다. 이식 전에 이러한 환자와 기증자는 면역학적 적합성을 조사합니다. 여기에는 세포독성 및 유세포 분석 교차 일치, HLA 분류, 패널 반응성 HLA 항체(PRA)의 존재 여부 확인이 포함됩니다. 일반적으로 이러한 조사는 신장 이식 2-3개월 전에 수행됩니다. 환자가 주어진 살아있는 기증자와 함께 이식을 수락하면 이식 전에 현재 연구에 참여하는 데 관심이 있는지 여부를 묻습니다. 환자와 공여자가 수락하면 이식 전에 적합한 샘플 수집 튜브(Cell-Free BCT 튜브)를 사용하여 15mL의 혈액을 수집합니다. 이 샘플은 특정 유전자 마커에 대해 환자와 기증자를 선별하는 데 사용됩니다. 또한, 이식 전 샘플은 각 환자의 HLA 항체 유무를 결정하는 데 사용됩니다. 우리는 현재 연구에 최대 50명의 환자를 포함하는 것을 목표로 합니다.

이식 후 처음 24-48시간 동안 환자로부터 2개의 추가 샘플(10mL)을 수집하여 엑소좀과 같은 무세포 입자를 포함하는 dd-cfDNA의 잠재적 존재를 측정합니다. 모든 샘플에서 무세포 DNA와 RNA를 추출하여 냉동 보관한 후 나중에 시퀀싱합니다. 이식 및 면역억제 요법 개시 후 분석을 위한 샘플을 최대 3개월 동안 매주 1회 채취합니다. 수집된 모든 샘플은 즉시 분석되거나 향후 분석을 위해 동결됩니다. 저장된 냉동 샘플은 나중에 해동, 일괄 처리 및 상업적 비드 기술(Luminex 또는 Immucor)을 사용한 HLA 항체의 존재 분석 또는 dd-cfDNA 측정을 위한 시퀀싱을 포함한 분자 기술을 사용하여 분석할 수 있습니다. 이러한 분석의 결과는 전용 데이터베이스에 추가됩니다. 얻은 실험실 결과는 이식편 생존, 환자 생존, 임상 및 무증상 거부 등을 포함한 임상 결과 및 기타 실험실 데이터(예: 이식편의 병리학적 검사 결과, 임상 화학, 면역억제제 농도 등).