Estudio para la detección de ADN libre de células derivado de donantes después de un trasplante renal mediante el ensayo de quimerismo basado en NGS de Devysers.

Cada año, entre 40 y 60 pacientes se someten a un trasplante renal con un donante vivo (LD) en el Hospital Universitario Karolinska. Antes del trasplante, se investiga la compatibilidad inmunológica de estos pacientes y sus donantes. Esto incluye pruebas cruzadas citotóxicas y de citometría de flujo, tipificación de HLA y determinación de la posible presencia de anticuerpos HLA reactivos con el panel (PRA). Normalmente estas investigaciones se realizan 2-3 meses antes del trasplante renal. Una vez que un paciente ha sido aceptado para el trasplante con un donante vivo determinado, antes del trasplante se le preguntará si está interesado en participar en el presente estudio. Si el paciente y el donante aceptan, recolectaremos 15 ml de sangre antes del trasplante utilizando tubos de recolección de muestras adecuados (tubos BCT sin células). Esta muestra se usará para evaluar al paciente y al donante en busca de marcadores genéticos específicos. Además, las muestras previas al trasplante se utilizarán para determinar la presencia o ausencia de anticuerpos HLA para cada paciente. Nuestro objetivo es incluir hasta 50 pacientes en el estudio actual.

Durante las primeras 24 a 48 horas posteriores al trasplante, se recolectarán dos muestras más (10 ml) del paciente para medir la posible presencia de dd-cfDNA, incluidas partículas libres de células, como los exosomas. El ADN y el ARN libres de células de todas las muestras se extraerán, se almacenarán congelados y luego se secuenciarán. Tras el trasplante y el inicio de la terapia inmunosupresora, se obtendrán muestras para análisis una vez por semana durante un máximo de 3 meses. Todas las muestras recolectadas se analizarán inmediatamente o se congelarán para análisis futuros. Las muestras congeladas almacenadas podrían, en un momento posterior, descongelarse, agruparse y analizarse utilizando técnicas moleculares, incluida la secuenciación para medir dd-cfDNA o el análisis de la presencia de anticuerpos HLA utilizando tecnologías comerciales de microesferas (Luminex o Immucor). Los resultados de estos ensayos se agregarán a una base de datos dedicada. Los resultados de laboratorio obtenidos se compararán con el resultado clínico, incluida la supervivencia del injerto, la supervivencia del paciente, los rechazos clínicos y subclínicos, etc., así como con otros datos de laboratorio (p. resultados del examen patológico del injerto, química clínica, concentración de fármacos inmunosupresores, etc.).