Studie for påvisning av donoravledet cellefritt DNA etter nyretransplantasjon ved bruk av Devysers NGS-basert kimærismeanalyse.

Hvert år gjennomgår 40-60 pasienter nyretransplantasjon med en levende donor (LD) ved Karolinska Universitetssykehuset. Før transplantasjon blir disse pasientene og deres givere undersøkt for deres immunologiske kompatibilitet. Dette inkluderer cytotoksisk- og flowcytometrisk kryssmatching, HLA-typing samt bestemmelse av mulig tilstedeværelse av panelreaktive HLA-antistoffer (PRA). Normalt utføres disse undersøkelsene 2-3 måneder før nyretransplantasjon. Når en pasient har blitt akseptert for transplantasjon med en gitt levende donor, vil de før transplantasjon bli spurt om de er interessert i å delta i denne studien. Hvis pasienten og giveren godtar det, vil vi samle inn 15 ml blod før transplantasjon ved å bruke egnede prøvetakingsrør (Cell-Free BCT-rør). Denne prøven vil bli brukt til screening av pasient og donor for spesifikke genetiske markører. Videre vil pretransplantasjonsprøvene brukes til å bestemme tilstedeværelse eller fravær av HLA-antistoffer for hver pasient. Vi har som mål å inkludere opptil 50 pasienter i den nåværende studien.

I løpet av de første 24-48 timene etter transplantasjon vil ytterligere to prøver (10 ml) fra pasienten samles inn for å måle potensiell tilstedeværelse av dd-cfDNA inkludert cellefrie partikler som eksosomer. Det cellefrie DNA og RNA fra alle prøvene vil bli ekstrahert, lagret frosset og senere sekvensert. Etter transplantasjon og oppstart av den immunsuppressive behandlingen, vil det bli tatt prøver for analyse én gang hver uke i opptil 3 måneder. Alle innsamlede prøver vil enten analyseres umiddelbart eller fryses for fremtidig analyse. Lagrede frosne prøver kan, på et senere tidspunkt, tines, batcheres og analyseres ved bruk av molekylære teknikker, inkludert sekvensering for måling av dd-cfDNA eller analyse av tilstedeværelsen av HLA-antistoffer ved bruk av kommersielle perleteknologier (Luminex eller Immucor). Resultater fra disse analysene vil bli lagt til en dedikert database. De oppnådde laboratorieresultatene vil bli sammenlignet med klinisk utfall, inkludert transplantatoverlevelse, pasientoverlevelse, kliniske og subkliniske avvisninger osv. samt andre laboratoriedata (f.eks. resultater fra patologisk undersøkelse av transplantatet, klinisk kjemi, konsentrasjon av immunsuppressive medikamenter etc).