Исследование обнаружения донорской бесклеточной ДНК после трансплантации почки с использованием анализа химеризма на основе NGS от Devysers.

Каждый год 40-60 пациентов проходят трансплантацию почки от живого донора (LD) в Каролинской университетской больнице. Перед трансплантацией этих пациентов и их доноров исследуют на иммунологическую совместимость. Это включает цитотоксические и проточные цитометрические перекрестные анализы, HLA-типирование, а также определение возможного присутствия панельно-реактивных HLA-антител (PRA). Обычно эти исследования проводят за 2-3 месяца до трансплантации почки. Как только пациент будет принят на трансплантацию от данного живого донора, перед трансплантацией его спросят, заинтересованы ли они в участии в настоящем исследовании. Если пациент и донор соглашаются, мы соберем 15 мл крови перед трансплантацией, используя подходящие пробирки для сбора образцов (пробирки Cell-Free BCT). Этот образец будет использоваться для скрининга пациента и донора на наличие специфических генетических маркеров. Кроме того, образцы перед трансплантацией будут использоваться для определения наличия или отсутствия антител к HLA у каждого пациента. Мы стремимся включить в текущее исследование до 50 пациентов.

В течение первых 24-48 часов после трансплантации у пациента будут взяты еще два образца (10 мл) для измерения потенциального присутствия dd-cfDNA, включая бесклеточные частицы, такие как экзосомы. Внеклеточная ДНК и РНК из всех образцов будут извлечены, сохранены в замороженном виде и позже секвенированы. После трансплантации и начала иммуносупрессивной терапии образцы для анализа будут браться один раз в неделю на срок до 3 месяцев. Все собранные образцы будут либо немедленно проанализированы, либо заморожены для последующего анализа. Хранящиеся замороженные образцы могут быть позднее разморожены, объединены в партии и проанализированы с использованием молекулярных методов, включая секвенирование для измерения dd-cfDNA или анализ на наличие HLA-антител с использованием коммерческих технологий гранул (Luminex или Immucor). Результаты этих анализов будут добавлены в специальную базу данных. Полученные лабораторные результаты будут сравниваться с клиническими результатами, включая выживаемость трансплантата, выживаемость пациентов, клиническое и субклиническое отторжение и т. д., а также другие лабораторные данные (например, результаты патологического исследования трансплантата, клинической химии, концентрации иммунодепрессантов и т.д.).